巨噬细胞肿瘤疫苗抗瘤作用的实验研究

目的：探究巨噬细胞肿瘤疫苗的细胞形态与表型特征,并观察其CTL反应的诱导效果。方法：分别采用透射与扫描电子显微镜、免疫荧光染色及流式细胞术等技术对巨噬细胞肿瘤疫苗的超微结构及CD14、CD68、CD80、CD86、MHCⅡ等分子进行测定。采用生长状态良好的H22肿瘤细胞移植于接种不同肿瘤疫苗的实验小鼠,分别采用直接测量法、MTT法及比色法测定瘤重量、瘤体积、肿瘤细胞杀伤率和培养上清液LDH活性。结果：巨噬细胞肿瘤疫苗细胞表面有许多的伪足皱褶、囊泡,胞浆内有大量大小不一、形态不规则的吞噬体；CD14、CD68、CD80、CD86及MHCⅡ的阳性细胞率分别为53.90%、98.60%、26.50%、90.20%和25.40%。小鼠体内实验结果显示,巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的肿瘤形成率、瘤体积与瘤重量明显低于对照组和石蜡诱生的巨噬细胞接种组（P均〈0.05）；巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的成瘤率与灭活肿瘤细胞接种组无明显差异（P〉0.05）,但瘤体积与瘤重量明显低于灭活肿瘤细胞接种组（P均〈0.05）。另外,巨噬细胞肿瘤疫苗接种组的淋巴细胞自体肿瘤细胞杀伤率和培养上清液LDH活性分别高于对照组、灭活肿瘤细胞接种组和石蜡诱生的巨噬细胞接种组。结论：巨噬细胞肿瘤疫苗具备巨噬细胞的典型特征,该种细胞接种后可诱导机体产生特异性抗肿瘤免疫反应。     

人缺血脑组织中TNF-α和IL-1β的表达

目的 :检测人缺血脑组织中TNF α和IL 1β的表达。 方法 :将 13例脑梗死的死亡病例按发病时间分成 <2d、3～ 5d、 >5d3个组 ,以非缺血侧半球作为对照 ,用免疫组化染色法检测缺血脑组织中TNF α和IL 1β的表达。结果 :人脑缺血后缺血病灶中TNF α和IL 1β呈高表达 ,与正常侧脑组织相比较有极显著差异。TNF α和IL 1β表达细胞的分布与缺血灶相一致 ,呈局灶性分布。TNF α的表达高峰在病后 2d内。IL 1β表达高峰在病后 3～ 5d。在病后 5d ,缺血侧TNF α和IL 1β的表达与正常侧无显著差异。结论 :人类脑缺血组织中TNF α和IL 1β的表达与动物实验的结果相似 ,提示TNF α和IL 1β参与了脑缺血损伤 ,有助于临床建立新的有针对性的治疗措施     

人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白V3区对细胞结合能力的研究

目的：研究人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）不同亲嗜株包膜糖蛋白Ｖ３区结合于靶细胞的能力。方法：合成来源于不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区的生物素标记和非标记的多肽。采用流式细胞计数分析生物素化的 Ｖ３多肽对细胞的结合能力以及细胞表面的结合配体。结果：ＨＩＶ－１Ｘ４　亲嗜株ＩＩＩＢＶ３区能结合于多种细胞的表面，包括辅助受体ＣＸＣＲ４；竞争实验结果显示蛋白酶抑制剂能抑制该结合。Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区只极微弱地结合于外周血单核细胞和表达ＣＣＲ５ 的人星形胶质细胞表面。结论：不同嗜性ＨＩＶ－１Ｖ３区结合于细胞表面的能力不同从亲嗜株Ｖ３区直接结合于细胞表面并被其自身所增强，其靶分子至少包括辅助受体 ＣＸＣＲ４和蛋白酶分子；而Ｒ５亲嗜株 ＡＤＡ Ｖ３区则不结合于 ＣＣＲ５和蛋白酶。     

hB7-1重组腺病毒感染的肿瘤细胞的生物学特性

目的 在完成hB7-1 cDNA克隆并成功构建包含hB7-1基因的重组腺病毒rAdexl-B7－1的基础上,对经rAdexl-B7－1感染的B16细胞的体外生物学特性进行了研究。方法 以FACS、电镜等方法观察病毒感染前后B16细胞的变化。结果 ①重组腺病毒经KEK293细胞扩增、CsCl纯化后滴度可达10^10ＰＦＵ／ml,且２０ＭＯＩ的病毒可使９５％以上的Ｂ１６细胞被感染。②细胞动力学研究显示,rAdexl-B7-1对Ｂ１６的生长及集落形成能力无影响。③ＦＡＣＳ结果表明,rAdexl-B7-1细胞的增殖周期无影响。④扫描电镜及透射电镜结果表明,经rAdexl-B7-1感染的Ｂ１６细胞在表面形态及超微结构上出现变化。结论 重组腺病毒rAdexl-B7-1对Ｂ１６细胞的生长动力学无影响,对形态学有轻微影响。     

HSV-1致Hela细胞凋亡的扫描电镜及透射电镜观察

目的 探讨HSV－1感染Hela细胞时,是否发生凋亡。方法 用扫描电镜及透射电镜观察感染72h的Hela细胞的形态变化。结果 正常的Hela细胞表面有丰富的微绒毛。细胞间隔清晰,可幼稚连接,连接不紧密。胞浆内线粒体嵴结构完整,并可大量的粗面内质网及游离核糖体,极少的脂滴。细胞核内多为常染色体,核仁清晰,核浆比约1：1。凋亡细胞中核内异染色质增多,染色质浓缩成块状,边集于核膜。线粒体轻度肿胀,溶酶体代偿性增多。核膜、胞膜、各细胞器膜均完整。坏死细胞的染色质呈不规则的团块状,但不象凋亡细胞那样集中于核周边。细胞膜、核膜和细胞器的结构破坏,线粒体空泡变,细胞崩解,胞浆及其内容物外泄。HSV－1感染的Hela细胞体积明显缩小,核浆比例明显增加。细胞表面的微绒毛断裂、减少,细胞膜球状突起。核膜完整,核致密,呈块状分布,边集于核膜。细胞膜、细胞器结构完整。可见出泡现象和凋亡小体形成现象。在胞核内可见病毒体。结论 ①HSV－1感染Hela细胞时,造成细胞死亡形式是核死亡形式即凋亡;②HSV－1感染Hela细胞时,细胞凋亡占绝对优势,同时伴有细胞坏死。     

ST1571对恶性多发性神经胶质母细胞瘤（GBM）的体外抑瘤作用

目的：研究酪氨酸激酶抑制剂(ST1571)对恶性胶质瘤细胞的肿瘤生物学调节作用，方法：用免疫组化法探查血小板源生长因子(PDGF)及其受体在T98G，U87MG，LNZ308，RG四种胶质瘤细胞的表达；MTT法用于检查ST1571／TMZ单独或联合应用对胶质瘤细胞的增殖抑制作用，ST1571诱导的细胞凋亡途径由流式细胞仪检测，免疫印迹杂交法用来探查ST1571抵抗细胞的蛋白激酶网络变化。结果：所用胶质瘤细胞均不同程度的表达PDGF及受体.ST1571与TMZ相互协同作用于胶质瘤细胞株T98G；101μmol／LST1571可部分抑制所测胶质瘤细胞增殖、可完全抑制其形成集落；高于101μmol／L浓度的ST1571可快速诱导胶质瘤细胞凋亡或坏死：胶质瘤细胞株T98G与ST1571长期共培养后，瘤细胞蛋白激酶网络有较大改变。结论：研究表明，PDGF受体酪氨酸激酶抑制剂ST1571有较强的抑制恶性胶质瘤细胞(GBM)增殖的作用并可能与其他化疗药物协同抗肿瘤。     

人类TAP2基因克隆及真核表达质粒的构建

抗原处理相关转运体(transporter associated with antigen processing,TAP)属于ABC(ATP-binding cassette)超家族成员,由TAP1(75 kD)和TAP2(71 kD)形成异二聚体,负责抗原肽从胞浆到内质网的转运,在MHC Ⅰ类分子的抗原处理及提呈过程中发挥重要作用.     

沈阳地区献血者疑难血型鉴定原因分析及处理措施

目的分析沈阳中心血站检验科送检的ABO血型正反定型不一致的原因,确保血型鉴定准确,保证临床输血安全。方法采用2个厂家的试剂进行血型血清学比较,检测沈阳中心血站检验科送检的初筛ABO血型正反定型不符或存在不规则抗体的标本。结果沈阳中心血站检验科送检的288例献血者ABO血型正反定型不一致标本血清中抗体减弱196例,不规则抗体26例,ABO亚型22例,冷凝集素3例,抗原减弱3例,抗体减弱加不规则抗体1例,其他37例。结论献血者出现血型鉴定困难的常见原因主要包括抗体减弱、ABO亚型、冷凝集素、抗体减弱加不规则抗体等。对初筛ABO血型正反定型不一致的献血者一定要进行血清学鉴定,如仍无法定型则需进行基因定型,从而确保临床输血的安全。     

华支睾吸虫感染患者血清Th1/Th2细胞因子水平检测及意义

目的研究华支睾吸虫病患者血清中Th1/Th2细胞因子IL-2和IL-4的水平变化,并探讨其在肝吸虫致病机制中的作用。方法分别采集华支睾吸虫病人和健康人的血清,用ELISA方法检测血清中Th1/Th2细胞因子IL-2和IL-4的水平。结果华支睾吸虫病人血清IL-2的水平与正常对照组相比(P<0.01)显著降低,IL-4的水平与正常对照组相比显著升高(P<0.05)。结论华支睾吸虫感染病人血清细胞因子水平异常,表现为Th1型细胞因子水平下降,Th2型细胞因子水平升高,病人细胞免疫功能下降,体液免疫功能增强升高,本研究结果表明肝吸虫感染后引起的细胞因子紊乱参与肝吸虫致病过程。     

京医药特色敷贴疗法在急性痛风性关节炎患者中的应用效果

目的 探讨京医药特色敷贴疗法在急性痛风性关节炎患者中的应用效果。方法 以2021年2月至2022年2月防城港市中医医院收治的60例急性痛风性关节炎患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组(30例)和观察组(30例)。对照组患者予以常规干预,观察组患者基于常规干预联合使用京医药特色敷贴进行干预。比较2组患者的症状积分、肿胀度、疼痛程度和实验室指标。结果 干预3 d及7 d后,2组的症状积分、视觉模拟评分法(VAS)评分、血尿酸(UA)、红细胞沉降率(ESR)和C反应蛋白(CRP)水平均较干预前降低,肿胀度均轻于干预前(P均<0.05);观察组的症状积分、VAS评分、ESR、UA和CRP水平均较同期对照组更低,肿胀度均轻于同期对照组(P均<0.05)。结论 京医药特色敷贴疗法能够减轻急性痛风性关节炎患者的肿胀及疼痛程度,降低ESR、UA和CRP水平,缓解临床症状。