乳腺癌中神经激肽受体的表达及受体拮抗剂的作用研究*

目的:研究乳腺癌中全长型、截短型神经激肽1 受体（neurokinin 1 receptor,NK1R）和神经激肽2 受体（neurokinin 2 receptor,NK2R）的表达,及受体拮抗剂对乳腺癌细胞生长的影响。方法:采用免疫组织化学法检测天津医科大学肿瘤医院51例乳腺癌及其癌旁正常组织、30例乳腺良性病变组织总NK1R（包括NK1R-FL和NK1R-Tr）和NK2R 表达,采用实时定量PCR 和免疫印迹技术检测乳腺细胞系中NK1R-FL、NK1R-Tr和NK2R 表达,建立NK1R-FL和NK1R-Tr过表达的乳腺细胞系, 在NK1R 和NK2R 拮抗剂作用下测定细胞增殖和软琼脂集落形成能力。结果:乳腺癌及癌旁正常组织、乳腺良性病变组织中均总NK1R 过表达,乳腺癌组织中 NK1R-FL、NK2R 表达相比癌旁正常组织显著降低,并与乳腺癌分型、组织学分级、淋巴结转移及 Ki-67、HER-2、ER和PR表达相关。HBL-100 细胞中NK1R-FL和NK2R 过表达、NK1R-Tr低表达,MDA-MB-231、T-47D 和MCF-7 细胞中只表达NK1R-Tr。乳腺癌细胞中NK1R-Tr低表达、NK1R-FL表达增加其对NK1R 和NK2R 受体拮抗剂的敏感度。结论:乳腺组织中NK1R-FL、NK2R 共表达,乳腺癌细胞中NK1R-Tr过表达并负反馈调节NK1R-FL和NK2R 的表达,NK1R 和NK2R 受体可能成为乳腺癌治疗的新靶标。      

TuM2-PK，tPSA，fPSA/tPSA和PSAD对PSA灰区前列腺癌诊断价值的比较

目的:比较TuM2-PK,tPSA,fPSA/tPSA和PSAD在PSA灰区对前列腺癌的诊断价值。方法:选取tPSA在4～10 ng/mL的前列腺癌（PCa）、良性前列腺癌增生（BPH）及前列腺炎老年患者共252例,测其血中TuM2-PK,tPSA和fPSA,计算fPSA/tPSA比值;经直肠B超测前列腺体积,计算tPSA与前列腺体积之比,得到PSAD。用SPSS19.0分析TuM2-PK,tPSA,fPSA/tPSA和PSAD在PSA灰区对PCa的诊断价值。结果:PCa组的TuM2-PK,fPSA/tPSA和PSAD较比前列腺炎老年组及BPH组均有显著变化(P<0.05);3组间的tPSA没有显著差异(P>0.05)。TuM2-PK AUC(0.948)>PSAD AUC(0.801)> fPSA/tPSA AUC (0.610)> tPSA AUC (0.499)。当TuM2-PK,tPSA,fPSA/tPSA和PSAD最佳临界值分别取24.30 U/mL、6.60 ng/mL、0.16和0.15 ng/mL/cm³时,诊断PCa的敏感性和特异性分别为88.9%和92.1%,72.2%和44.9%,80.5%和60.2%,83.3%和71.8%。结论:在PSA灰区,TuM2-PK、fPSA/tPSA、PSAD均能提高PCa诊断的敏感性和特异性,且TuM2-PK比fPSA/tPSA和PSAD对于PCa的诊断具有更高的准确性。     

雌激素受体对乳腺癌细胞截短型神经激肽受体-1 的调控作用

摘要： 目的 探讨雌激素受体 α （ERα） 阳性的乳腺癌细胞中 ERα 对神经激肽受体-1 截短型变异体 （NK1R-Tr）的调控作用, 以及 ERα 是否通过调控 NK1R-Tr 的表达, 间接调控细胞的增殖能力。方法 染色质免疫共沉淀（CHIP） 实验验证 ERα 是否可以结合到 NK1R-Tr 启动子上游的 ERα 反应元件, 直接调控 NK1R-Tr 的表达; 荧光素酶报告基因实验验证 ERα 是否对 NK1R-Tr 的表达起正性调控作用。Western blot 实验和 RT-PCR 实验检测乳腺癌细胞系 MCF-7 和 T47D 的 ERα 和 NK1R-Tr 在蛋白水平和 mRNA 水平的表达情况; 以及在 ERα 激动剂雌二醇 （E2）刺激的条件下, 小干扰 RNA 敲除 ERα 后, NK1R-Tr 在不同水平的表达情况; 小干扰 RNA 敲除 NK1R-Tr 后, CCK-8 和克隆形成实验检测敲除 NK1R-Tr 的乳腺癌细胞的增殖能力。结果 在 NK1R-Tr 基因启动子上游存在 ERα 的反应元件, ERα 在 E2 存在条件下作用于该反应元件, 对 NK1R-Tr 的表达起正性调控作用。同样在 E2 刺激的条件下,敲除乳腺癌细胞 MCF-7 内源性 ERα 后, NK1R-Tr 在蛋白水平和 mRNA 水平的表达均下降; 且敲除 NK1R-Tr 的 MCF-7 细胞增殖能力较未敲除组明显降低。结论 在 ERα 阳性的乳腺癌细胞中, ERα 正性调控 NK1R-Tr 的表达,从而增强细胞的增殖能力。