4’-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌JAR细胞内Ca2+浓度的影响

目的:探讨4'-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及细胞内Ca2 浓度的影响.方法:应用MTT法、流式细胞术和激光共聚焦扫描显微镜技术,体外观察该化合物对JAR细胞的影响.结果:4'-甲醚-黄芩素对JAR细胞的生长具有抑制作用.随着药物浓度与作用时间的增加,Annexin V-FITC /PI-细胞、细胞内Ca2 浓度逐渐增加,与对照组相比差异有显著性.结论:4'-甲醚-黄芩素能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2 浓度有关.     

4’-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌JAR细胞内Ca^2＋浓度的影响

目的：探讨4＇-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及细胞内Ca^2＋浓度的影响。方法：应用MTT法、流式细胞术和激光共聚焦扫描显微镜技术，体外观察该化合物对JAR细胞的影响。结果：4＇-甲醚-黄芩素对JAR细胞的生长具有抑制作用。随着药物浓度与作用时间的增加，Annexin V-FITC^＋／PI-细胞、细胞内Ca^2＋浓度逐渐增加，与对照组相比差异有显著性。结论：4’-甲醚-黄芩素能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖，诱导凋亡，其机制与提高细胞内Ca^2＋浓度有关。     

马鞭草有效成分对人绒毛膜癌耐药细胞株JAR／VP16的逆转作用研究

目的:研究马鞭草有效成分4'-甲醚-黄芩素(4'-methylether-scutellarein,4'-M-S)对人绒毛膜癌多药耐药细胞株JAR/VP16的耐药逆转作用.方法:MTT法检测4'-M-S对JAR/VP16细胞的增殖抑制作用,确定药物逆转浓度及其对耐药细胞的逆转倍数和逆转效率;单克隆抗体酶免定量法测定耐药细胞中绒毛膜促性腺激素(hCG)分泌变化;流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡率;光镜和透射电镜观察耐药细胞形态学改变.结果:4'-M-S对JAR/VP16细胞具有明显增殖抑制作用,20 μg/ml 4'-M-S可显著逆转JAR/VP16细胞对鬼臼乙叉甙(VP16)、氨甲喋呤(MTX)及放线菌素D(ACTD)的耐受性,逆转倍数为:5.02、3.67、2.48;逆转效率为:81.19%、76.89%、64.08%;4'-M-S联合作用后,耐药细胞hCG分泌量明显下降;细胞周期阻滞于G0～G1期和G2～M期,细胞凋亡率达19.71%;透射电镜观察发现细胞质空泡化、内质网扩张、核物质浓缩边聚等早期凋亡现象.结论:4'-M-S对JAR/VP16细胞具有耐药逆转作用,可能的机制是抑制耐药细胞生长及诱导细胞凋亡.     

4′-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究

目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P<0.01);4-MS作用72h后细胞内Ca2 浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。40mg/L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P<0.01)。20、40mg/L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P<0.01)。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2 浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。     

p38MAPK及Caspase3在LNG诱导人子宫肌瘤细胞凋亡中的作用

目的 探讨p38MAPK及Caspase3在高浓度左炔诺孕酮(LNG)诱导体外培养人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中的作用.方法 原代培养UtLMC传代后,加入不同浓度LNG,流式细胞术测定其对细胞凋亡率的影响,并以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞;Western blot测定p38MAPK、Caspase3在LNG诱导细胞凋亡中的活性变化.结果 流式细胞术分析,加药组细胞凋亡率随LNG浓度的增加而逐渐升高,与对照组相比有显著性差异(t值分别为8.458、25.582、58.415、127.390,均P<0.05);AO/EB双染后发现,对照组无明显凋亡细胞,10μg/mL LNG作用UtLMC后,早期凋亡细胞多于阴性对照组,随着LNG剂量的增加,晚期凋亡细胞也逐渐增多,核浓聚、偏位,被染成桔红色;在10μg/mL以上LNG诱导UtLMC凋亡中,p38MAPK磷酸化水平升高(t值分别为96.278、165.878,均P<0.05),Caspase3被明显激活(t值分别为31.527、53.190,均P<0.05).结论 高浓度LNG诱导UtLMC凋亡的机制涉及多途径、多靶点,可能与直接激活p38MAPK信号通路,诱导Caspase3活化有关.     

4＇-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究

目的探讨4’-甲醚-黄芩素（4-MS）对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法，体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度（10、20、40mg／L）的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用，呈剂量依赖，作用72h后其增殖抑制率分别为（14.14±0.75）％、（34.34±2.99）％、（61.11±2.99）％（P〈0.01）；4-MS作用72h后细胞内Ca^2＋浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0，与对照组相比差异有显著性（P〈0.05）。40mg／L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为（2.36±0.19）％、（4.22±2.44）％、（7.34±0.56）％，明显高于对照组（P〈0.01）。20、40mg／L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01，明显低于对照组（P〈0.01）。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖，诱导凋亡，其机制与提高细胞内Ca^2＋浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。     

4′-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究

目的 探讨4'-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制.方法 应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响.结果 不同质量浓度(10、20、40 mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72 h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P＜0.01);4-MS作用72 h后细胞内Ca2+浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).40 mg/L 4-MS作用12、24、36 h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P＜0.01).20、40 mg/L 4-MS作用48 h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P＜0.01).结论 4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2+浓度、降低hTERT mRNA的表达有关.     

4＇-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究

目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P<0.01);4-MS作用72h后细胞内Ca2 浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。40mg/L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P<0.01)。20、40mg/L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P<0.01)。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2 浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。     

子宫平滑肌瘤细胞原代培养及鉴定

目的:建立人子宫平滑肌瘤细胞原代培养方法,为子宫肌瘤发病机制及治疗药物筛选的研究提供理想的细胞株系.方法:采用消化法及组织块贴壁2种方法进行子宫平滑肌瘤细胞培养.倒置显微镜下观察原代培养的细胞,并用免疫组化染色对其进行鉴定.结果:2种方法均可获得大量子宫肌瘤细胞,所培养的细胞在倒置显微镜下呈梭形和典型"峰-谷"样生长,α-Actin免疫组化染色呈强阳性.结论:采用该2种方法均可成功进行人子宫平滑肌瘤细胞的原代培养,且培养的人子宫平滑肌细胞生长良好,纯度高,可用于子宫肌瘤发病机制及治疗药物筛选的研究.     

左炔诺孕酮下调survivin基因促进人子宫肌瘤细胞凋亡

目的探讨左炔诺孕酮(LNG)诱导人子宫肌瘤细胞(UtLMC)凋亡过程中survivin的表达变化。方法原代培养人子宫肌瘤细胞传代后,加入不同浓度LNG,以AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞;RT-PCR检测抑凋亡基因survivin mRNA的表达,Western blot测定survivin蛋白的表达。结果 10 mg/L LNG作用UtLMC后早期凋亡细胞多于阴性对照组,随着LNG剂量的增加,晚期凋亡细胞也逐渐增多,核浓聚、偏位,被染成桔红色;在10 mg/L以上LNG诱导的UtLMC凋亡中,survivin mRNA表达显著下降,蛋白表达由对照组的33.82±0.02下降至10.37±0.03(P<0.05)。结论一定浓度的左炔诺孕酮所诱导的人子宫肌瘤细胞凋亡,可能与抑制survivin抗凋亡活性相关。