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目的:通过无血清法富集人胃癌 BGC -823干细胞,并对所获得的 BGC -823干细胞生物学特性进行研究。方法:采用无血清悬浮培养方法富集人胃癌 BGC -823干细胞球。后续实验分为 BGC -823干细胞组和 BGC -823细胞组:采用蛋白印迹(Western Blot)法和 Hoechst33342染色法对所富集细胞的干性进行鉴定;利用平板克隆实验检测细胞单克隆形成能力;采用 CCK -8法检测细胞对紫杉醇的敏感性;RT -PCR 法检测 P -gp mRNA 的表达;细胞免疫荧光双染观察干细胞球 CD44、P -gp 的表达情况。结果:采用无血清悬浮培养法成功获得干细胞球。CCK -8结果显示,BGC -823干细胞对紫杉醇敏感性较 BGC -823细胞降低(P <0.05)。干细胞球单克隆形成能力较人胃癌 BGC -823细胞增强(P <0.05)。Western Blot 和 Ho-echst33342染色法结果显示无血清富集的细胞为胃癌干细胞。RT -PCR、细胞免疫组化检测显示 BGC -823干细胞 CD44、P -gp 的表达较 BGC -823细胞升高,统计学差异明显(P <0.05)。结论:利用无血清富集法收集的人胃癌 BGC -823干细胞球为研究干细胞的理想模型,胃癌干细胞的形成是耐药出现的潜在机制。 相似文献
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