肝炎肝硬化患者血清IL-10、IL-18水平的变化及意义

目的探讨血清IL10、IL18在肝炎肝硬化的发病机制中的作用。方法62例肝炎肝硬化患者根据childpugh分级法分为3组:childpughA级组19例、childpughB级组23例和childpughC级组20例。采用ELISA法检测3组患者和20例健康献血员血清IL10、IL18的水平。结果childpughA、B、C级组血清IL18水平均明显高于对照组(P均<0.01),childpughA级组血清IL10水平略高于对照组,但无显著性差异(P>0.05);childpughB、C级组明显低于对照组(P<0.05);有腹水组、无腹水组血清IL18水平均明显高于对照组(P均<0.01),有腹水组血清IL10水平明显低于无腹水组、对照组(P<0.05,P<0.01);血清IL10水平与血清IL8水平呈负相关(r=-0.51,P<0.01);血清白蛋白水平与血清IL10水平呈正相关(r=0.566,P<0.01),与血清IL8水平呈负相关(r=-0.315,P<0.01);血清凝血酶原活动度与血清IL10水平呈正相关(r=0.506,P<0.01),与血清IL18水平呈负相关(r=-0.463,P<0.01);血清总胆红素水平与血清IL8水平呈正相关(r=0.677,P<0.01),与血清IL10水平呈负相关(r=-0.339,P<0.01)。结论IL10、IL18在肝炎肝硬化的发病机制中起一定的作用,其水平与肝损害程度密切相关。     

肝炎肝硬化患者血清可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅰ、白细胞介素10、白细胞介素18水平及意义

为探讨可溶性肿瘤坏死因子受体（sTNFR）Ⅰ、白细胞介素（IL）-10、IL-18在肝炎肝硬化发病中的作用。将62例肝炎肝硬化患者按Child-Pugh分级，检测其血清sTNFRⅠ、IL-10、IL-18水平。结果示肝炎肝硬化患者sTNFRⅠ、IL-18水平显著升高，且随Child—Pugh评分升高而上升；IL-10水平变化则相反。sTNFRⅠ水平与凝血酶原活动度（PTA）、白蛋白（ALB）、总胆红索（TBIL）呈负相关；IL-10水平与PTA、ALB呈正相关，与TBIL呈负相关；IL-18水平与TBIL呈正相关，与PTA、ALB呈负相关。提示sTNFRⅠ、IL-10、IL-18与肝损害程度密切相关。     

抗体库优化策略对特异性抗肝癌单链抗体的人源化

目的:对特异性抗肝癌单链抗体(single chain variable fragment,scFv)DM同步进行人源化和优化,以获得亲和力高和免疫原性低的人源化抗肝癌单链抗体.方法:通过分子结构和序列分析,确定对抗原结合位点的构象有重要影响的骨架区(FR)残基,把难以判断回复突变残基的人、鼠源副本同时编入人源化抗体序列中;通过重叠延伸PCR技术合成人源化抗体全基因,利用噬茵体展示技术构建人源化组合抗体库;通过肝癌细胞筛选阳性克隆,ELISA方法测定各个克隆抗原结合活性;用硫氰酸盐洗脱法测定并比较亲本抗体和人源化scFv的相对亲和力.结果:成功构建人源化组合抗体库,实际库容4.77×10 5,包含由2 5不同重链和2 2不同轻链组成的128种人源化DM;经过筛淘及ELISA鉴定,获得HDM1、HDM2和HDM3 3个阳性克隆,相对亲和力指数分别为HDM1 1.6 mol/L、HDM2 1.2 mol/L和HDM3 2.2 mol/L.结论:抗体库优化法是一个高效、简便的人源化方法;获得的3株阳性克隆HDM1、HDM2、HDM3与亲本抗体DM同样具有良好的抗原结合特异性和较高的亲和力.     

胃镜直视下喷洒生物蛋白胶治疗消化性溃疡并出血的疗效观察

目的探讨生物蛋白胶在治消化性溃疡并出血的疗效.方法甲组采用胃镜下喷洒生物蛋白胶治疗;乙组采用胃镜下喷洒或黏膜下注射1:10000肾上腺素治疗.比较两种方法治疗消化性溃疡并出血的疗效.结果甲组有效率为93.33%,乙组有效率为94.59%,两组比较,x2=0.056,P＞0.05,差别没有统计学意义.结论胃镜下喷洒生物蛋白胶治疗消化性溃疡并出血成功率高,操作安全,病人耐受性好,止血效果确切.     

抑癌基因PTEN及P16蛋白在疣状胃炎及胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨疣状胃炎与胃癌之间的关系.方法:采用免疫组织化学法检测PTEN及P16蛋白在慢性浅表性胃炎、疣状胃炎及胃癌组织中的表达.结果:疣状胃炎组PTEN蛋白阳性率显著低于慢性浅表性胃炎组(44.4% vs 92%,χ2=14.47,P＜0.01),而与胃癌组(25.8%)比较无显著差异(χ2=2.51,P＞0.05).疣状胃炎组P16蛋白阳性率显著低于慢性浅表性胃炎组(50% vs 96%,χ2=14.56,P＜0.01),但明显高于胃癌组(19.4%)(χ2=6.80,P＜0.01).结论:抑癌基因PTEN及P16可能参与了疣状胃炎癌变过程.     

对脑血管病患者实施健康教育的方法及体会

脑血管病是一种常见病、多发病 ,全国每年新发脑血管病人数约为 130～ 15 0万人。脑血管病已成为一个严重威胁人类健康的社会问题。对脑血管病人进行健康教育就是使病人及家属了解脑血管疾病的知识和康复保健知识 ,以达到延长患者生命和提高生活质量的目的。1　健康教育措施1.1　入院时的健康教育临床上多以急性脑血管病为常见。起病急、症状重 ,病人及家属此时心情焦虑、急躁 ,担心病人的安全。此时 ,应根据其心理特点 ,有计划、有重点地进行宣教。如出血性脑血管病 ,应绝对卧床休息 ,保持呼吸道通畅 ,头偏向一侧 ,头部冷敷等。待病情稍平…     

肝癌的早期治疗

原发性肝癌发病率居世界恶性肿瘤第五位，每年新增人数约100万，死亡约60万。近年来随着影像技术及分子生物学的发展，肝癌的早期治疗也取得了长足进步。[第一段]     

超声内镜诊断胆总管结石的护理配合与体会

目的探讨超声内镜（Endoscopic uhrasonography,EUS）诊断胆总管结石的护理配合。方法收集我院2009年9月至2011年9月临床怀疑胆总管结石行EUS检查的105例患者的临床资料,并总结护理体会。结果经EUS诊断,105例患者中胆总管结石83例,22例未见结石的患者中,经内镜下十二指肠乳头括约肌切开术（Endoscopic sphincteropapillotomy,EST）取出高位胆管结石2例;83例EUS诊断胆总管结石的患者中,1例经ERCP-4-EST未见结石。82例行ERCP＋EST检查的患者中,有3例并发轻度胰腺炎,10例出现高淀粉酶血症,经内科治疗后痊愈。所有行EUS检查的患者均未出现并发症。结论EUS检查属于无创性检查,相对简单及安全,掌握适应证及禁忌证,做好检查前访视、心理指导、检查中默契配合及检查后的精心护理可减轻患者痛苦,缩短检查时间,使检查顺利完成,保证患者安全。     

特异性抗肝癌单链抗体二聚体在毕赤酵母中的表达、纯化及生物学活性鉴定

目的:实现特异性抗肝癌单链抗体二聚体在毕赤酵母中高效表达、纯化并鉴定其生物学活性.方法:构建酵母表达载体pGAPZαA-BDM,转化感受态大肠杆菌DH5α,选择测序正确的阳性克隆进行扩增后,电转化酵母细胞,表达抗体二聚体,对表达抗体进行纯化、浓度检测,并鉴定其对肝癌细胞的结合活性,免疫组织化学检测二聚体对肝癌组织抗原的特异性.结果:测序显示成功构建酵母表达载体pGAPZαA-BDM,表达96 h抗体收获量最大,二聚体表达量为30 mg/L菌液,为大肠杆菌的300倍.抗肝癌单链抗体二聚体BDM与三种肝癌细胞结合,而与正常肝细胞不结合,结合效价为1:128.免疫组织化学显示二聚体与肝癌组织结合的阳性率比肝硬化、胃癌、正常肝组织高,差异有统计学意义.结论:成功制备了高表达量、高特异性、较好的活性及稳定性的抗肝癌单链抗体二聚体BDM,为制备免疫纳米颗粒及开展肝癌的放射免疫诊断和靶向治疗奠定了基础.     

抗肝癌单链抗体二聚体的制备及其对肝癌细胞株增殖的影响

目的:探讨特异性抗肝癌单链抗体二聚体在毕赤酵母中高效表达、纯化和鉴定其生物学活性的方法,并观察其对肝癌细胞增殖的影响.方法:构建酵母表达我体pGAPZαA-BDM,转化感受态大肠埃希菌DH5a,选择测序正确的阳性克隆进行扩增后,电转化酵母细胞,表达抗体二聚体,对表达抗体进行纯化、二聚体相对分子质量及形成比例和浓度检测,鉴定其对肝癌细胞的结合活性,免疫组化检测二聚体对肝癌组织抗原的特异性,MTT法观察二聚体抗体对肝癌细胞株增殖的影响.结果:测序及SDS-PAGE显示,成功构建及在酵母中表达抗体二聚体BDM,纯化后的抗体经凝肢过滤色谱检测,二聚体的相对分子质量为62×103,二聚体形成比例为92%;表达量为30 mg/L菌液.BDM与3株肝癌细胞结合效价为1:128,高于其亲本单链抗体.免疫组化显示,BDM与肝癌、肝硬化、胃癌、肠癌及正常肝组织反应的阳性率分别为40.0%、11.0%、6.7%、5.0%和0,P值均<0.05;MTT显示,二聚抗体BDM显示较好的抑瘤性,对肝癌细胞株的抑制率为30%,且有浓度依赖性.结论:成功制备高表达量、高特异性、较好的活性及较高稳定性的抗肝癌单链抗体二聚体BDM,其对肝癌细胞株的增殖有明显抑制作用,为后续将该抗体用于肝癌的放射免疫诊断和靶向治疗研究奠定了基础.