青天葵组织培养研究进展

对青天葵组织培养从外植体、培养条件、方法和结果等方面做了较全面的总结,青天葵是可以通过组织培养达到快速繁殖目的的。并对组培品种和野生品种进行了比较,发现组培品种并没有退化,而且组培品种在产能和产量上都优于野生品种。青天葵组培的研究对其工业化大量生产,提高产量有积极的意义。     

库仑电化学法测定葛根中葛根素的方法学研究

目的 建立葛根素的电化学含量测定方法 .方法 采用库仑阵列检测器研究葛根素的电化学行为及含量测定方法 .结果 在pH4.32磷酸盐缓冲液中,葛根素在0.16～162 ng内与峰面积呈良好线性关系,回归方程为A=1444.7C+88.635,相关系数r=0.999 8,平均回收率为96.88%,RSD为1.75%.结论 电化学法操作简便,准确,灵敏度高,可用于葛根素的含量测定以及生物样品的测定.     

青天葵总DNA的提取与随机扩增多态性DNA反应条件的建立

目的 建立并优化青天葵样品总DNA提取方法及随机扩增多态性DNA(RAPD)反应.方法 采用改进的高盐低pH法提取青天葵鲜叶和药材样品,通过正交设计和均匀设计,改变反应体系和扩增程序优化随机扩增多态性DNA.结果 使用高盐低pH值法可较好地提取新鲜叶片的DNA,药材叶片含杂质较多,但都能用于RAPD.反应体系为:缓冲液2.0 μ1,0.5 μl dNTP(各2.5 mmol·L-1),0.8 μl Mg2+(25 mmol·L-1),0.5 μl引物(20 pmol·μl-1),0.2 μl Taq酶(5U·μ1-1),1 μl DNA(50 ng),1μl BSA(20 mg·ml-1),加双倍蒸馏水至20 μl.扩增程序为:94 ℃预变性3 min;94 ℃变性30 s,40 ℃退火30 s,72 ℃延伸60 s,40个循环;72℃延伸5 min.结论 建立并优化了的青天葵样品总DNA提取方法及RAPD反应体系.     

青天葵形态遗传多样性研究

目的探讨不同品种的青天葵及其替代品在形态学上的遗传多样性。方法从叶型,叶脉,叶片大小,叶重等10个形态学指标进行统计,并用统计分析软件进行处理分析。结果通过对13个青天葵样品的形态性状进行调查分析,发现不同品种的青天葵在叶型,叶脉,叶片大小,叶重等形态学数据上存在差异;聚类分析结果显示,以欧式距离15来看可分为两类,毛叶芋兰为一类,毛唇芋兰为一类,与种属间的分类一致;在毛唇芋兰品种中,又可分为小叶青天葵,中叶青天葵和大叶青天葵3类,大叶品种间的多样性与地理种源有一定的关联。结论青天葵在形态学上存在遗传多样性。     

基于RAPD的青天葵遗传多样性及鉴别研究

目的 建立及优化青天葵样品总DNA的提取方法及RAPD反应,探讨不同品种的青天葵及其替代品、伪品在DNA分子水平上的遗传多样性及其遗传关系.方法 使用高盐低pH值法提取总DNA,采用随机扩增多态性DNA,从49条随机引物中筛选能扩出清晰条带的引物,对22个青天葵样品及伪品进行RAPD分析.用统计分析软件对扩增出的条带进行聚类分析,以Shonnon's指数和Nei's指数对青天葵遗传多样性进行估算.结果 高盐低pH值法提取的新鲜样品纯度高,药材纯度低,但都能用于RAPD.选取能扩增出清晰条带的19条引物,把鲜品与干品分别聚类分析.干药材中小叶与中叶距离较近,与大叶及毛叶距离远.新鲜叶片中三种青天葵为一类,青天葵与其组培品、毛叶与红薯叶距离稍远,与车前草、积雪草距离最远.青天葵种群遗传多样性Shonnon's指数为0.463,Nei's指数为0.267,种群内遗传多样性较高,基因流为0.94.结论 不同品种青天葵间及伪品在分子水平上存在差异,可用此方法鉴别青天葵.青天葵的遗传多样性大多是由地理环境造成的.