补阳还五汤通过激活脂联素通路减轻大鼠脑缺血再灌注后炎症损伤

目的：研究补阳还五汤通过激活脂联素(APN)通路减轻大鼠脑缺血再灌注后炎症损伤、改善神经功能。方法：将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和补阳还五汤联合APN抑制剂(GW9662)组。假手术组仅分离组织剥离血管,模型组建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,补阳还五汤组给予补阳还五汤灌胃16 g·kg^-1,2次/d。补阳还五汤+GW9662组于造模术前30 min给予GW9662腹腔注射4 mg·kg^-1,术后给予补阳还五汤灌胃16 g·kg^-1,2次/d。脑缺血再灌注24 h后,采用免疫荧光(IF)法观察大鼠脑组织中脂联素受体1(AdipoR1)的表达,以及AdipoR1与神经元标记物(NeuN)、小胶质细胞标记物(Iba1)的共定位;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清和脑组织APN含量;行为学检测中,横木行走测试观察大鼠平衡能力,抓力测试观察大鼠肢体力量恢复情况。免疫荧光法检验髓过氧化物酶(MPO)的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)...     

补阳还五汤通过甲酰肽受体2减轻大鼠脑缺血再灌注后氧化应激损伤

目的 探讨补阳还五汤通过甲酰肽受体2（FPR2）对脑缺血再灌注模型大鼠氧化应激反应的抑制作用及神经保护作用。方法 将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和补阳还五汤联合FPR2抑制剂（Boc-2）组，假手术组仅游离血管，不做插线处理。其他各组运用改良Longa法构建大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，缺血2 h后再灌注；再灌注后补阳还五汤组和补阳还五汤联合Boc-2组给予补阳还五汤（16 g·kg^-1）灌胃，每日2次；补阳还五汤联合Boc-2组术前30 min腹腔注射Boc-2 （0.4 mg·kg^-1）；假手术组与模型组给予等体积生理盐水。再灌注24 h后，退化神经元染色（FJC）观察FJC阳性细胞数目的变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测缺血侧脑组织凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax）和活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3）蛋白表达；生化试剂盒检测缺血侧脑组织中超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA），谷胱甘肽（GSH），一氧化氮（NO）水平；免疫荧光检测还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶2（NOX2）平均荧光强度。结果 与假手术组比较，模型组的FJC阳性细胞数目增加（P<0.01），Bcl-2表达减少（P<0.01），Bax和cleaved Caspase-3表达增加（P<0.01），NO和MDA含量增加（P<0.05，P<0.01），GSH和SOD活性下降（P<0.05，P<0.01），NOX2表达增加（P<0.01）；与模型组比较，补阳还五汤组FJC阳性细胞数目减少（P<0.01），Bcl-2表达增加（P<0.01），cleaved Caspase-3和Bax明显减少（P<0.05，P<0.01），NO和MDA减少（P<0.05，P<0.01），GSH和SOD增加（P<0.01），NOX2表达减少（P<0.01）。给予Boc-2后，补阳还五汤的作用部分被抑制。结论 补阳还五汤可以减轻脑缺血再灌注大鼠氧化应激损伤，抑制细胞凋亡，其作用机制可能与FPR2调控NOX2的表达有关。     

补阳还五汤对脑缺血后12/15-脂氧合酶及相关炎性产物影响

目的 观察补阳还五汤对脑缺血再灌注后12/15-脂氧合酶（12/15-LOX）及下游相关代谢产物的影响。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和12/15-LOX抑制剂PD146176组。假手术组只分离组织和剥离血管,模型组建立大鼠大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,补阳还五汤组于造模术后给予补阳还五汤16 g·kg-1灌胃,2次/d,PD146176组于造模术前30 min给予PD14617610 mg·kg-1皮下注射（同补阳还五汤组做阳性对照）。缺血再灌注后6 h、24 h、48 h和72 h运用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测脑组织12/15-LOX的表达水平;免疫荧光（IF）法观察大鼠脑组织中12/15-LOX蛋白与神经元标记物（NeuN）、小胶质细胞标记物（Iba1）及星形胶质细胞标记物（GFAP）的共定位;酶联免疫吸附（ELISA）法检测12/15-LOX抗炎代谢产物消退素D1(RvD1)的含量,以及促炎代谢产物12-羟基廿碳四烯酸（12-HETE）和15-羟基廿碳四烯酸（15...     

碱性成纤维细胞生长因子提高大鼠脑缺血/再灌注损伤后突触可塑性的机制研究

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）提高大鼠脑缺血/再灌注损伤后突触可塑性的机制。方法：构建大鼠大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）模型，缺血2h后再灌注，随机分为缺血/再灌注损伤组（MCAO/R组）、MCAO/R+bFGF组、MCAO/R+成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)抑制剂组和MCAO/R+bFGF+Gap26[缝隙连接蛋白43(connexin 43, Cx43)抑制剂]组，另设假手术组作为对照，每组6只。bFGF和Gap26于术后第3天腹腔注射（剂量分别为100μg/kg,25μg/kg，每天1次），FGFR1抑制剂于术后第3天灌胃给药（3 mg/kg，每天2次），7 d后取材。采用Western blot检测缺血侧海马组织中Cx43的表达；通过免疫荧光双标染色标记FGFR1与星形胶质细胞标志物胶质细胞原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的表达；免疫荧光染色观察突触小泡蛋白（synapto...