Notch1下调对三叶青黄酮抑制食管癌EC9706细胞迁移和侵袭的影响

目的:观察三叶青黄酮(Tetrastigma Hemsleyani Radix flavone,THRF)对食管癌(esophagus cancer,EC)EC9706细胞增殖、迁移、侵袭能力及Notch1的影响,探讨其抗食管癌的可能作用机制。方法:体外培养EC9706细胞,以不同终质量浓度(0.5~20 g·L~(-1))三叶青黄酮进行处理,未加三叶青黄酮为空白组,以MW 167处理为MW167组。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8),检测三叶青黄酮对EC9706细胞增殖的抑制作用,计算半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50);采用细胞黏附实验,划痕修复实验,transwell小室体外侵袭实验观察EC9706细胞黏附力、迁移、侵袭能力,同时采用免疫细胞化学和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测Notch1蛋白和mRNA表达的变化。结果:与空白组比较,三叶青黄酮可明显升高EC9706细胞抑制率(P0.05,P0.01),三叶青黄酮可明显降低EC9706细胞黏附率、迁移率、侵袭细胞数,Notch1阳性细胞率和mRNA表达(P0.05,P0.01)。结论:三叶青黄酮能明显抑制EC9706细胞增殖,降低细胞迁移和侵袭能力,与其下调Notch1有关,可能是其抗食管癌的机制之一。     

三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡与cleaved-caspase-3表达的关系

目的：观察三叶青黄酮诱导肺癌SPC-A-1细胞凋亡作用和对cleaved-caspase-3表达的影响,探讨其抗肺癌的可能作用机制。方法：体外培养SPC-A-1细胞,以不同剂量三叶青黄酮进行处理,未给予三叶青黄酮组作为对照组。采用3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）比色分析法,观察三叶青黄酮对SPC-A-1细胞增殖抑制作用,计算半数抑制浓度（IC₅₀）;采用流式细胞仪和TUNEL染色检测三叶青黄酮对SPC-A-1细胞凋亡的影响;分别采用免疫细胞分析和蛋白印记分析（Western blot）检测三叶青黄酮对SPC-A-1细胞cleaved-caspase-3表达的影响。结果：三叶青黄酮对SPC-A-1细胞增殖具有明显抑制作用,呈剂量和时间依赖性,并诱导SPC-A-1细胞凋亡,与对照组比较,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;三叶青黄酮显著增加SPC-A-1细胞cleaved-caspase-3表达水平,与对照组比较,差异具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：三叶青黄酮可显著抑制SPC-A-1细胞增殖,并诱导其凋亡,机制可能与增强cleaved-caspase-3表达有关。