大豆肽减轻β-淀粉样蛋白肽诱导的小鼠原代海马神经元损伤

目的：研究大豆肽对β- 淀粉样蛋白肽（ Aβ）诱导的海马神经元损伤是否具有保护作用。方法： 分离胚胎 18.5 d C57BL/6 小鼠海马原代神经元,培养7 d 后用10 μmol/L 的Aβ25-35 处理,制作神经元损伤模型;随后分别在 神经元培养基中加入0.1%、0.5% 和1.0% 的大豆肽,处理48 h 后,利用MTT法检测大豆肽对海马神经细胞活力的 影响,DAPI 染色检测神经细胞凋亡形态变化;免疫印迹检测神经细胞凋亡蛋白表达的变化;免疫荧光染色法检测 原代神经元中微管蛋白β-Ⅲ-tubulin 及微管相关蛋白MAP2的变化。结果：大豆肽提高了Aβ25-35 所致神经损伤模型 中海马神经元的细胞活力,大豆肽降低了Aβ25-35 所致神经损伤模型中海马神经元的凋亡,减轻了细胞骨架的损伤。 结论：大豆肽对Aβ 诱导的神经细胞凋亡及细胞骨架损伤具有明显的抑制作用。     

调控组织因子基因表达的药物筛选研究

本研究建立TF启动子转录活性的荧光素酶基因稳定细胞株,应用该细胞模型筛选调控TF基因表达的药物,并为深入研究其分子机制打下基础。构建TF启动子的一系列5′端截短型的荧光素酶报告基因质粒(包括-2174 bp~+128 bp,-684 bp~+128 bp,-247 bp~+128 bp,-201 bp~+128 bp),将质粒电转染至U937细胞中,建立表达荧光素酶报告基因的稳定细胞株。应用ATRA验证该细胞株的功能;应用bortezomib、尿多酸肽(CDA-II)等药物处理该细胞株24小时,分析荧光素酶基因活性,筛选出能够调控TF基因表达的药物。结果发现,5 nmol/L bortezomib能激活其转录活性,上调TF转录本表达水平;1 mg/ml CDA-Ⅱ抑制TF启动子的转录活性,下调TF转录本的表达水平。TF启动子逐步截短功能分析发现,bortezomib及CDA-ⅡII调控TF启动子转录活性的区域位于-201 bp—0 bp之间。结论:本研究建立了表达TF启动子荧光素酶活性的U937稳定细胞株,并筛选出能够调控TF基因转录的药物CDA-II及bortezomib,为将来筛选新药物及深入研究其分子机...     

诊断学教学中融入医患沟通技能的培养

针对目前新医学模式、医患关系的转换,对诊断学教学进行改革,将医患沟通技能的培养融入诊断学教学过程.通过课堂上理论知识讲解、课后强化训练等方式,训练学生们的医患沟通能力,并通过角色扮演使学生们能将其应用于临床实践,取得了较好的教学效果.     

过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株的建立

本研究目的建立过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株(K562-HMGB1)及不表达该蛋白的对照细胞株(K562-pcDNA3.1),为研究hm gb1基因在白血病发生及进展中的作用与机制建立基础。从U937白血病细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA。以cDNA为模板应用PCR技术扩增hm gb1编码基因,将其连接入PMD18-T vector(PMD18-T-HM BG1vector),并转化至大肠杆菌DH5a中。对氨苄青霉素筛选的阳性克隆进行扩增、质粒抽提,应用限制性内切酶KpnI/XhoI酶切鉴定,最终应用DNA测序得到序列正确的阳性克隆;然后将PMD18-T-HM BG1vector克隆中的hm gb1基因应用限制性内切酶KpnI/XhoI切出,并连接入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到重组质粒pcDNA3.1-HM BG1。将pcDNA3.1-HM BG1、pcDNA3.1质粒分别电转染至K562细胞,电转染后48小时后加入终浓度800μg/m l的G418进行药物加压筛选,2周后得到有效转染pcDNA3.1-HM BG1及pcDNA3.1载体的K562细胞株(K562-HM BG1,K562-pcDNA3.1)。通过RT-PCR和W estern b lot技术分别在转录及蛋白表达水平检测K562稳定细胞株中HMGB1蛋白过表达情况,验证建立的K562稳定株的功能。结果表明,成功构建pcDNA3.1-HM BG1表达载体,并转染至K562细胞中,建立了过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株(K562-HM BG1)。在转录及蛋白水平上验证了该稳定细胞株过表达HMGB1蛋白。结论:已成功建立了过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株及对照细胞株即K562-HM BG1细胞及K562-pcDNA3.1细胞,为研究hm gb1基因在白血病发生及进展中的作用及机制建立了基础。     

诊断学教学改革模式在医学专科院校的应用

诊断学是连接医学基础学科与临床学科的重要课程,学好诊断学对于医学生具有非常重要的意义。我校传统的诊断学教学模式存在一些缺陷与不足,我校教研室积极开展诊断教学改革,结合我校实际情况,探索应用模拟临床情景、加强实践操作的诊断学教学模式,取得了一些经验和收获。     

制作诱导多能干细胞饲养层细胞最佳条件的研究

诱导多能干细胞(IPS)是近年来研究的热门,而IPS细胞体外培养需要饲养层细胞。小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)可分泌白血病抑制因子,作为IPS细胞的饲养层细胞。目的建立分离培养小鼠胚胎成纤维细胞的体系,制作高质量的IPS饲养层细胞。方法选妊娠11.5~15.5d的昆明小鼠制作MEF细胞,选择第三代MEF细胞用不同浓度丝裂霉素C处理,制作饲养层细胞,在饲养层细胞上接种IPS细胞,观察各组IPS细胞生长状态并计算克隆数目。结果妊娠第13.5天的胚胎制作的MEF,经10μg/ml的丝裂霉素C处理3h的饲养层细胞状态较好,其IPS生长状况最好,克隆数目和质量最佳。结论不同胎龄胚胎分离的MEF可用做IPS饲养层,第13.5d的胚胎分离的MEF细胞经10μg/ml的丝裂霉素C处理3h制成的饲养层细胞最适于IPS细胞生长。     

运动疗法，改善老年人轻度认知障碍

<正>轻度认知障碍（mild cognitive impairment,MCI）是介于不可逆的健康性老龄化和痴呆的中间阶段。运动疗法是老年人轻度认知障碍的主要康复治疗方法之一,可显著改善其生活质量。本研究通过比较不同类型运动疗法在老年人轻度认知障碍中的康复应用效果,以期为老年人MCI康复的运动疗法选择提供有益的补充。     

维甲酸诱导小鼠iPS细胞向神经细胞分化

目的:研究小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iP S细胞)在体外维甲酸(retinoic acid,RA)的诱导下能否分化成功能性的神经细胞。方法:首先将iPS细胞悬浮培养形成拟胚体,利用RA将其诱导分化成神经前体细胞,然后利用免疫荧光染色技术观察小鼠iPS细胞在体外分化成神经细胞以及突触发生的形态特征。结果:小鼠iPS细胞在RA的诱导下不但能够分化为成熟神经元与胶质细胞还可以观察到树突棘及突触连接的形成。结论:RA作为一种作用很强的分化诱导剂,可以有效的诱导小鼠iPS细胞分化为功能性的神经元和神经胶质细胞,这对其进行后续的神经发育的机制、药物筛选以及自体iPS细胞移植的研究具有重要意义。     

老年人骨密度T值与生活方式的相关性分析

目的 探讨老年人骨密度T值与生活方式的相关性,旨在寻求预防老年人骨质疏松的方法。方法 选取2020年2月至2022年1月在天津医科大学总医院住院的432例老年患者作为研究对象,收集患者的社会人口学资料、服用药物情况、生活习惯、骨质疏松指标等。采用SPSS 22.0统计学软件处理数据,统计分析老年人骨密度T值与生活方式的相关性。结果 女性老年患者的骨密度T值低于男性,体重指数≤18.4 kg/m2老年患者的骨密度T值低于体重指数>18.4 kg/m2者,年龄≥80岁老年患者的骨密度T值低于年龄<80岁者,牛奶摄入<3次/周老年患者的骨密度T值低于牛奶摄入≥3次/周者,应用他汀类药物老年患者的骨密度T值高于未应用者,应用含维生素D3钙片老年患者的骨密度T值高于未应用者,差异有统计学意义（P<0.05）。Pearson相关性分析结果显示,老年患者的骨密度T值与年龄呈负相关（r=-0.327,P<0.05）,老年患者的骨密度T值与体重指数、牛奶摄入频率、他汀类药物应用、含维生素D3钙片应用呈正相关（r=0.284、0.317、0.296、0.247,P<0....