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目的:研究五味化痔胶囊对痔模型大鼠肛周肿胀、溃疡、出血等症状,直肠组织病理形态学,炎症因子,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子κB(PI3K/AKT/NF-κB)信号通路表达的影响,探究其治疗痔病的作用机制。方法:SD大鼠分为空白组、模型组、美沙拉嗪组、五味化痔胶囊低、中、高剂量组。选用角叉菜胶、脂多糖、山莨菪碱、酚磺乙胺混合液,注射于大鼠肛肠局部复制大鼠痔模型。造模后,中药各组予五味化痔胶囊干预7 d,观察肛周肿胀、溃疡、出血等症状表现,HE染色观察直肠组织病理形态,酶联免疫吸附试验检测组织匀浆中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)以及白介素-6(IL-6)的水平,qRT-PCR技术观察直肠组织中PI3K、AKT、NF-κB的基因表达,免疫组化法观察直肠组织环氧化酶2(COX2)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组肛周肿胀、溃疡、出血等症状评分升高(P<0.05),光镜下观察到直肠组织黏膜缺损、间质血管扩张充血、炎性细胞浸润等情况;血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平上升(P<0.05),直肠组织中PI3... 相似文献
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目的 基于TLR4/NF-κB/MLCK 通路研究百合地黄汤对对氯苯丙氨酸(PCPA)及多因素刺激所致失眠伴
肠道菌群失调小鼠的治疗作用及机制,为临床用药提供理论依据。方法 将84 只KM 小鼠随机分为正常组、
模型组、阳性药物组(地西泮,1.38 mg·kg-1)、百合组(2.25 g·kg-1)、地黄组(2.25 g·kg-1)、百合地黄汤组
(4.5 g·kg-1)。采用夹尾2 min、昼夜颠倒24 h、垫料潮湿24 h、45°鼠笼倾斜24 h、交替鼠笼24 h、禁食不禁
水24 h、冷水浴3 min 等多因素刺激4 周结合PCPA 腹腔注射2 d 共同制备失眠小鼠模型。模型复制成功后,
给予相应的药物治疗。采用高架十字迷宫系统观察小鼠的焦虑样行为;通过翻正反射实验观察睡眠潜伏期和睡
眠持续时间;16sRNA 测序法分析小鼠肠道菌群组成结构;液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测脑和结肠γ-氨
基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、色氨酸(Trp)、5-羟色氨酸(5-HTP)、5-羟色胺(5-HT)的浓度变化;免疫组织
化学法检测结肠中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的表达情况;实时荧光定量PCR 法(qRTPCR)
检测结肠组织中基因白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、ZO-1、
Occludin、Toll 样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达情况;蛋白免疫印迹
法(Western Blot)检测结肠上皮组织中蛋白TLR4、NF-κB、磷酸化-核因子κB(p-NF-κB)、MLCK、肌球蛋白
轻链(MLC)和磷酸化-肌球蛋白轻链(p-MLC)表达情况。结果 与正常组小鼠比较,模型组小鼠在高架十字迷
宫中进入开臂区域的距离、在开臂区域停留的时间明显缩短(P<0.05);睡眠潜伏期明显延长、睡眠持续时间
明显缩短(P<0.05);肠道菌群的丰富度、均匀度降低(P<0.01);脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT 浓
度明显降低(P<0.01),Glu 浓度明显升高(P<0.01);结肠中GABA、Glu 浓度明显降低(P<0.01),Trp、5-HTP、
5-HT 浓度明显升高(P<0.01);结肠组织炎性因子IL-1β、IL-6 以及TNF-α 基因表达水平明显升高(P<
0.01),ZO-1、Occludin 基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),通路中TLR4、NF-κB、MLCK 基因表达水
平明显升高(P<0.01),TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC 蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组小鼠比
较,百合地黄汤能够明显延长失眠小鼠在高架十字迷宫中进入开臂区域距离、在开臂区域停留的时间(P<
0.05);明显缩短睡眠潜伏期、增加睡眠持续时间(P<0.05);肠道菌群的丰富度、均匀度升高(P<0.01);升高
脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT 浓度(P<0.05,P<0.01),降低Glu 浓度(P<0.01);升高结肠中
GABA、Glu 浓度(P<0.01),降低Trp、5-HTP、5-HT 浓度(P<0.05,P<0.01);下调IL-1β、IL-6、TNF-α
基因表达水平(P<0.01),上调ZO-1、Occludin 基因和蛋白表达水平(P<0.01),下调通路中TLR4、NF-κB、
MLCK 基因表达水平和TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC 蛋白表达水平(P<0.01)。结论 百合地黄汤能够
有效治疗失眠伴肠道菌群失调症状,其作用机制可能与调节脑和肠内神经递质紊乱、下调TLR4/NF-κB/MLCK 信
号通路表达、上调紧密连接蛋白表达、降低炎症反应,进而修复肠黏膜机械屏障有关。 相似文献
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目的 基于PPAR/JNK2通路探讨锦灯笼防治药物性肝损伤(DILI)的作用机制。方法 将50只Wistar大鼠随机分为5组:正常组、模型组、水飞蓟宾组(44.1 mg·kg-1)及锦灯笼高(6.67 g·kg-1)、低(1.67 g·kg-1)剂量组。采用对乙酰氨基酚(APAP,1 000 mg·kg-1)溶液灌胃复制DILI大鼠模型,同时给予相应药物灌胃,每日1次,连续30 d。检测大鼠血清生化指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX); HE染色法观察肝组织病理变化;免疫组化法检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)的表达情况;免疫荧光检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)的表达情况;Western Blot法检测肝组织c-Jun氨基末端激酶2(JNK2)、磷酸化氨基末端激酶2(p-JNK2)蛋白表达情况;qRT-PCR法检... 相似文献
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目的 探讨楮实子对对乙酰氨基酚(APAP)引起的L02细胞损伤的保护作用。方法 CCK-8法测定不同浓度(0.1、0.3、1.0、3.0、10.0 mg/ml)楮实子水提物溶液对正常L02细胞的存活率。L02细胞APAP染毒后,取对数生长期的L02细胞,分为正常组、APAP组(40 mmol/L)、楮实子组(1 mg/ml),采用CCK-8法测定细胞存活率,采用DCFA-DH法测定细胞内活性氧(ROS)水平。Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;罗丹明123染色检测L02细胞内线粒体膜电位表达情况。Western blot法检测细胞JNK、p-JNK、78GRP78、CHOP的表达水平。结果 与0.1 mg/ml楮实子水提物比较,0.3、1.0、3.0、10.0 mg/ml楮实子水提物细胞活性降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,APAP组细胞存活率下降,细胞凋亡平均荧光强度值升高(P<0.05);与APAP组比较,1 mg/ml楮实子水提物细胞存活率升高,细胞凋亡平均荧光强度值降低(P<0.05)。APAP组ROS荧光强度值高于正常组,差异有高... 相似文献
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