基于C1GALT1/C1GALT1C1通路探讨加味升降散对IgA肾病大鼠Gd-IgA1的影响

目的 通过观察加味升降散对免疫球蛋白（Ig）A肾病大鼠血清及肾组织中微小RNA-148b（miRNA-148b）、白细胞介素-6（IL-6）、核心1β1，3-半乳糖基转移酶（C1GALT1）、分子伴侣Cosmc（core1β3-Gal-T特异性分子伴侣，C1GALT1C1）、半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgA1）表达的影响探讨其可能作用机制，为临床运用加味升降散治疗IgA肾病提供科学依据。方法 将42只SPF级雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常组8只、造模组34只，将大鼠适应性饲养1周后采用联合牛血清白蛋白（BSA）灌胃+尾静脉注射脂多糖（LPS）+皮下注射四氯化碳（CCl₄）、蓖麻油的免疫复合的方法建立实验性IgA肾病大鼠模型。造模完成后随机选取2只大鼠取材，检测造模是否成功。造模成功后，将造模组大鼠按照随机数字表法分成模型组、中药低剂量（加味升降散，6.27 g·kg^-1）组、中药高剂量（加味升降散，12.54 g·kg^-1）组、贝那普利（10 mg·kg^-1）组各8只，进行药物灌胃，1次/d，治疗4周。于实验第1周末、第9周末、第13周末检测24 h尿蛋白定量（24 h-UTP），第14周各组大鼠麻醉后取材，股动脉取血后离心取上清检测白蛋白（ALB）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检IL-6、Gd-IgA1表达水平变化；苏木素-伊红（HE）/马松（Masson）/碘酸六胺银（PASM）法观察肾组织病理改变；透射电镜观察肾小球超微结构变化；免疫组化法观察IL-6、C1GALT1、C1GALT1C1表达情况；免疫荧光观察肾小球系膜区；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）观察miRNA-148b、IL-6、C1GALT1、C1GALT1C1 mRNA表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测IL-6、C1GALT1、C1GALT1C1蛋白水平变化。结果 与正常组比较，模型组大鼠24 h-UTP、SCr、ALT、IL-6、Gd-IgA1含量水平明显升高（P<0.05），ALB含量水平明显降低（P<0.05）；肾小球系膜细胞增生、系膜区增厚、足细胞足突融合，大量颗粒状IgA免疫复合物沉积于肾小球系膜区；IL-6在系膜区、足细胞表达增强，C1GALT1、C1GALT1C1在系膜区、足细胞表达减弱；IL-6 mRNA、miRNA-148b表达增强（P<0.01），C1GALT1 mRNA、C1GALT1C1 mRNA表达减弱（P<0.01）；IL-6蛋白表达显著增强（P<0.01），C1GALT1、C1GALT1C1蛋白表达显著减弱，差异具有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较，加味升降散干预后，24 h-UTP、SCr、ALT、IL-6、Gd-IgA1含量水平显著降低，差异具有统计学意义（P<0.05，P<0.01），ALB含量水平升高，差异具有统计学意义（P<0.05）；病理损害减轻；基底膜IgA免疫复合物沉积明显减少；IL-6在大鼠肾小球系膜区、足细胞的表达减弱，C1GALT1、C1GALT1C1在系膜区、足细胞表达增强；IL-6 mRNA、miRNA-148b表达减少（P<0.01），C1GALT1 mRNA、C1GALT1C1 mRNA表达增加（P<0.01）；IL-6蛋白表达明显减弱（P<0.05，P<0.01），C1GALT1、C1GALT1C1蛋白表达增强，差异具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）；中药组表现出明显的量效趋势。结论 加味升降散可能通过降低IgA肾病大鼠血清及肾组织中miRNA-148b、IL-6表达，使C1GALT1、C1GALT1C1表达恢复，减少Gd-IgA1的生成，从而减轻肾脏病理损害，减少蛋白尿，发挥保护肾脏的作用，达到延缓疾病进展的目的，并且随剂量增加效果增强。     

补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smads通路的影响

目的:观察补肾通络方对博莱霉素所致肺纤维化大鼠肺组织病理及转化生长因子β_1(TGF-β_1)/Smads通路蛋白的影响,揭示该方抑制肺纤维化的作用机制。方法:48只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组8只,模型组、补肾通络低、高剂量组、氢化可的松琥珀酸钠组各10只。除正常组外,各组均采用博莱霉素法诱导肺纤维化制备模型。从术后第3天开始,补肾通络高、低剂量组分别给予14. 2,7. 1 g·kg~(-1)补肾通络方药灌胃,氢化可的松琥珀酸钠组给予4. 58 g·kg-1氢化可的松琥珀酸钠溶液腹腔注射,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,共治疗28 d。大鼠处死后测定血清羟脯氨酸(HYP),透明质酸(HA),层粘连蛋白(LN)的含量,取肺组织,采用苏木精-伊红染色法(HE)及马松(Masson)三色染色法观察肺组织病理形态变化,采用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)观察各组大鼠肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3,Smad7等mRNA和蛋白表达变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠肺纤维化明显,HYP,HA,LN含量升高(P 0. 05,P 0. 01),肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达升高(P 0. 05,P 0. 01),Smad7蛋白和mRNA表达降低(P 0. 01);与模型组相比,补肾通络高剂量组血清HYP,HA,LN的含量下降(P 0. 05,P 0. 01)肺组织TGF-β_1,Smad2,Smad3蛋白和mRNA表达降低(P 0. 05),Smad7蛋白和mRNA表达升高(P 0. 01)。结论:补肾通络方可有效改善肺纤维化的病变进程,其机制可能与调节TGF-β_1/Smads通路有关。     

参芪柔脉合剂对脑梗死合并颈动脉粥样硬化患者炎症因子及内皮功能的影响

目的:比较参芪柔脉合剂对脑梗死合并颈动脉粥样硬化(CAS)患者血脂、血清炎症因子和血管内皮功能及神经功能评分(NIHSS)的影响。方法:选取脑梗死合并CAS患者85例,采用随机数字表法分为2组,对照组42例采用脑梗死常规治疗加辛伐他汀胶囊治疗,治疗组43例在对照组基础上加参芪柔脉合剂治疗,疗程均为3个月。比较2组患者血脂4项、NIHSS评分、炎症因子水平、血管内皮功能、颈动脉超声检查结果及不良反应发生情况。结果:治疗后,2组患者总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、白细胞介素6(IL-6)、内皮素1(ET-1)、颈动脉内中膜厚度(IMT)、斑块Crouse积分及NIHSS评分均较治疗前显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、一氧化氮(NO)均较治疗前显著升高,且治疗组改善优于对照组,差异均有统计学意义(P 0. 05或P 0. 01)。结论:参芪柔脉合剂能改善脑梗死合并CAS患者血脂情况、降低血清炎症因子水平、改善血管内皮功能,并可减小颈动脉粥样硬化斑块,且具有较高安全性。     

尺肤针颅脑穴埋线治疗轻度认知功能障碍的临床观察

目的观察尺肤针颅脑穴埋线治疗轻度认知功能障碍的临床疗效。方法将80例轻度认知功能障碍病人随机分为对照组和治疗组,各40例。对照组给予常规治疗,治疗组常规治疗基础上给予尺肤针颅脑穴埋线治疗。以30 d为1个疗程,3个疗程后观察两组精神状态简易速检表(MMSE)、日常生活自理能力量表(ADL)积分、血清超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量变化,并比较两组临床疗效。结果治疗后治疗组MMSE评分较对照组提高(P0.05),治疗组ADL评分优于对照组(P0.01),差异有统计学意义。治疗后两组血清SOD活性较治疗前显著升高,MDA含量较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);治疗后治疗组血清SOD活性和MDA与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组临床总有效率为72.5%,对照组临床总有效率为42.5%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论尺肤针颅脑穴埋线疗法能有效改善轻度认知功能障碍病人日常生活自理能力、血清SOD和MDA水平。     

补肾活血方对血管性痴呆大鼠脑海马细胞凋亡及ERK2，CREB表达的影响

目的:探讨补肾活血方治疗血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠脑海马细胞凋亡的作用与机制。方法:75只SD雄性大鼠经水迷宫筛选后,随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组,补肾活血方高、低剂量(10.14,5.07 g·kg~(-1)·d~(-1))组,共5组,除假手术组外,其余各组采用两血管阻断法制备VD大鼠模型。补肾活血方高、低剂量组和尼莫地平组分别予补肾活血方药及尼莫地平片治疗30 d,各组大鼠进行Morris水迷宫测试,并采用原位细胞凋亡检测法(TUNEL)测定脑海马细胞凋亡情况,免疫组化法及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠脑海马细胞外信号调节激酶2(ERK2),环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P0.05),穿越平台次数及原平台停留时间均减少(P0.01),脑海马细胞凋亡积分吸光度(IA)显著升高,平均灰度值显著下降(P0.01),脑海马ERK2,CREB(免疫组化)表达的IA明显下降,平均灰度值明显升高(P0.05),蛋白表达量(Western blot)显著下降(P0.01);与模型组比较,补肾活血方高、低剂量组能提高大鼠水迷宫学习记忆能力,降低细胞凋亡IA(P0.01),升高平均灰度值(P0.01),提高脑海马组织ERK2,CREB的IA和蛋白表达量(P0.05,P0.01)。结论:补肾活血方药可能通过调控大鼠海马ERK/CREB信号通路,抑制海马细胞凋亡,从而改善VD大鼠学习记忆能力。     

血瘀证动物模型制备与思考

随着老龄化社会的来临,心脑血管疾病的发病率和死亡率呈持续上升趋势,研究建立符合"因""脉""证""治"思路的血瘀证动物模型变得尤为急迫。本研究从病因、生理病理和病证结合3个角度,总结分析近10年血瘀证动物模型进展,以期为血瘀证研究提供参考。     

当归补血汤通过改善足细胞线粒体功能障碍减轻糖尿病肾病大鼠氧化应激及炎症反应

目的:探讨当归补血汤通过改善足细胞线粒体功能障碍对糖尿病肾病(DKD)大鼠氧化应激及炎症反应的干预作用.方法:SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组采用高糖高脂喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型.成模大鼠随机分为模型组、当归补血汤低剂量(0.72 g·kg-1)组、当归补血汤高剂量(...     

张锡纯对弦脉的认识

正一代大家、近代名医,盐山张锡纯,主张衷中参西中医为体西医为用,融中、西医于一体,著有《医学衷中参西录》~([1]),至今对后世有着重大的指导意义,是一位善于继承、又勇于开拓进取的医家~([2-3])。在临床各科都有建树,特别运用脉象来诊断疾病。脉诊是中医四诊之一,而弦脉及其复合脉象在张锡纯的方剂和医案中有许多的记载~([4-5])。本文对弦脉及其复合脉进行初步的探讨和认识。希望对中医脉诊理论研究发挥积极的     

细胞焦亡与坏死性凋亡在糖尿病肾病中的作用及中医药干预研究进展

肥胖和糖尿病发病率的增加已使糖尿病肾病(DKD)成为慢性肾病和终末期肾病的主要原因。尽管目前有优化血糖控制和肾素-血管紧张素系统抑制等药物干预,但肾脏疾病进展和并发症的风险仍然很高。目前DKD发病机制尚未完全明确,包括慢性炎症反应、氧化应激、糖脂代谢紊乱、血流动力学异常等,近年研究发现肾脏固有细胞的程序性死亡(PCD)如细胞焦亡及坏死性凋亡对DKD发生发展有关键作用。细胞焦亡和坏死性凋亡是新近发现的细胞程序性死亡的两种途径,虽然这些细胞死亡程序可以保护宿主免受病原微生物的侵害,但他们的失调与多种自身免疫和自身炎症反应有关。细胞焦亡和坏死性凋亡紧密联系且相互交叉调节,这两种不同于凋亡的细胞自杀机制通过各自的执行蛋白消皮素D(GSDMD)和混合系激酶区域样蛋白(MLKL)导致膜破裂并使胞内容物释放,包括损伤相关分子模式(DAMPs)和炎症细胞因子如白细胞介素-1β(IL-1β)来触发炎症,而慢性炎症反应是导致DKD进展的关键因素。中医药防治DKD由来已久且临床疗效显著,研究表明中药可通过影响核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体,受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3),MLKL...     

基于RIPK1/RIPK3/MLKL信号通路探讨当归补血汤对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的影响

目的:观察当归补血汤对糖尿病肾病(DKD)大鼠足细胞损伤及受体相互作用蛋白激酶1/受体相互作用蛋白激酶3/混合系激酶区域样蛋白(RIPK1/RIPK3/MLKL)信号通路的影响,探讨其治疗DKD的可能作用机制。方法:50只SD大鼠随机选取8只设为正常组,其余大鼠6周高糖高脂饮食结合一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)0.035 g·kg-1制备2型糖尿病大鼠模型。模型制备成功后随机分为模型组,当归补血汤高、低剂量(1.44,0.72 g·kg-1)组,厄贝沙坦(0.017 g·kg-1)组。药物干预20周后检测各组大鼠空腹血糖(FBG),肾重指数(KI),尿微量白蛋白与尿肌酐比值(UACR);苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理形态学变化;透射电镜观察足细胞超微结构变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)水平;免疫组化法检测大鼠肾组织RIPK1,RIPK3,MLKL蛋白表达;原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠肾脏足细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠肾组织RIPK1,RIPK...