生物诱导法所产不同部位沉香挥发油成分分析

目的评价生物诱导法刺激白木香所产不同部位沉香质量。方法以乙醚冷浸法对提取诱导6个月后所得沉香挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其挥发油进行分析。结果共鉴定出159个成分,包括白木香木质部外侧黑色结香部分(B部分)86个成分,内侧棕色初结香部分(Z部分)73个成分;B部分以色酮类、芳香族类、倍半萜类等沉香特征性成分为主,Z部分以直链烷烃类为主。结论生物诱导法首先影响到的木质部外层(B部位)已含有丰富的沉香特征性成分,而后期影响到的木质部内层(Z部分)鲜见沉香特征性成分,说明该法是从外及内逐步影响白木香木质部,所形成的沉香质量也有显著差异。     

铁皮石斛共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ的体外抗氧化与诱导HepG2细胞凋亡的作用

目的:对不同道地种源铁皮石斛的共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ(芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷,viceninⅡ)进行体外抗氧化及诱导肝癌Hep G2细胞凋亡的活性研究。方法:采用2,2-联苯基~(-1)-苦基肼法(DPPH),2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸法(ABTS)和铜离子还原法对viceninⅡ(0. 005~1 g·L~(-1))进行体外的抗氧化活性研究;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测viceninⅡ(12. 5~100μmol·L~(-1))对人6种不同的肿瘤细胞体外的增殖抑制作用;后续凋亡实验viceninⅡ浓度为75μmol·L~(-1),采用Hoechst33258染色,荧光显微镜进行Hep G2细胞形态学观察;应用流式细胞术,磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)检测Hep G2细胞凋亡率;采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路及相关凋亡基因的mRNA表达。结果:ViceninⅡ质量浓度为1 g·L~(-1)时,对DPPH的清除率和Cu2+还原率为48. 82%和22. 01%(P 0. 01);当viceninⅡ质量浓度为0. 5 g·L~(-1)时,对ABTS清除率为86. 88%(P 0. 01); viceninⅡ显著抑制Hep G2细胞增殖并诱导凋亡,75μmol·L~(-1)的viceninⅡ作用48 h后,细胞存活率为45. 69%(P 0. 01),细胞凋亡率为14. 57%(P 0. 01),升高B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/Bcl-2,半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-8,p38,细胞外信号调节激(ERK),c-Jun氨基末端酶(JNK),核转录因子-κB(NF-κB) mRNA表达(P 0. 01)。结论:铁皮石斛不同道地种源的共性黄酮类成分新西兰牡荆苷Ⅱ在体外具有一定的抗氧化作用,能有效抑制Hep G2细胞增殖,并可能通过调控MAPK通路及Bax/Bcl-2途径诱导Hep G2细胞凋亡。     

自酿葡萄酒与市售葡萄酒中甲醇含量比较

目的：利用品红－亚硫酸法测定自酿葡萄酒中的甲醇含量,并与市售葡萄酒进行对比,对其进行安全性评价。方法：采用国家标准 GB ／T 15038－2006中关于葡萄酒、果酒通用甲醇含量检测的品红－亚硫酸法作为检测方法,对收集的10个自酿葡萄酒样品及3个市售葡萄酒样品进行测定。结果：10个自酿葡萄酒样本中有2个其甲醇含量超过国家标准中规定的0.04g／100ml,而市售3个葡萄酒样本中甲醇含量均不超过国家标准中的规定含量,且其甲醇含量皆远低于所有10个自酿葡萄酒样品。结论：自酿葡萄酒质量参差不齐,其甲醇含量存在超过国家标准规定限度的可能,相比于饮用市售葡萄酒,饮用自酿葡萄酒存在一定的健康风险。     

不同生长年限仿野生铁皮石斛醇提物的抗肿瘤活性比较

目的研究不同生长年限的仿野生铁皮石斛醇提物(EIWD)对人肝癌细胞(HepG2)、宫颈癌细胞(Hela)的抗肿瘤活性。方法以体外培养的HepG2、Hela为对象,MTT法检测细胞活性、荧光染色法检测细胞凋亡形态、流式细胞仪检测细胞凋亡率,比较各EIWD对HepG2、Hela的抗肿瘤活性。结果 1,2,3年生EIWD对HepG2、Hela具有明显的抑制作用(P0.01),对Hela的抑制作用有明显的时间和浓度的依赖性;Hoechest 33258荧光染色法可见EIWD可诱导肿瘤细胞呈典型的凋亡形态,细胞核皱缩、破碎,显亮蓝色荧光;流式细胞仪检测显示EIWD可提高肿瘤细胞的凋亡率。结论不同生长年限的EIWD对HepG2、Hela有抗增殖作用,其中对Hela抗肿瘤活性作用较明显,且生长期限较长的EIWD活性作用较强;可使肿瘤细胞出现典型的凋亡形态,具有促进凋亡作用。     

铁皮石斛种质资源DNA身份证的构建及遗传相似性分析

该研究利用中国中医科学院中药资源中心筛选出的4对简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)引物对铁皮石斛主产区9个产地29个居群的铁皮石斛样品进行检测,4对SSR引物分别扩增出5,7,4,3条多态性带,根据不同居群的SSR指纹图谱构建DNA身份证。聚类分析可将来自29个居群样本分成四大类,且表现出较好的地域相关性,其中来自云南、贵州、四川的铁皮石斛样品聚为一类,来自安徽和广西的铁皮石斛单独聚为一类,来自广东丹霞、浙江永康、浙江乐清及泰宁的样品聚为一类。采用PopG ene(version 1. 32)软件包对29个铁皮石斛居群进行遗传相似性分析,相似系数变异在0. 403 4～1. 0。基于遗传相似系数可将不同居群铁皮石斛的遗传一致性分成A,B,C共3个等级,地理位置相近或生长地貌相似的居群遗传相似性系数较高,表明其遗传背景较为一致。本研究为铁皮石斛的品种鉴别及优良品种选育提供参考信息。