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目的选育高产头孢菌素C产生菌。方法分别以紫外线和加热灭活头孢菌素C产生菌Cephalosporium acremonium 18-U5和Cephalosporium acremonium 18-M6原生质体,并将两种灭活的原生质体经PEG4000融合,从融合株中筛选头孢菌素C高产菌株。结果获得高产头孢菌素C的顶头孢霉融合株Cephalosporium acremonium F20,发酵单位达4 655 mg.L-1。与双亲菌株相比分别提高了42.4%和34.9%。结论非对称灭活原生质体融合法选育头孢菌素C高产菌株的方法值得推广。 相似文献
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[摘要] 目的:探讨ezrin 增强子敲除对食管癌Eca-109 细胞ezrin 基因表达、细胞增殖和迁移的影响。方法:将靶向ezrin 增强子上、下游的CRISPR/Cas9 重组质粒共转染食管癌Eca-109 细胞,经嘌呤霉素筛选,获得敲除ezrin 增强子的细胞株Eca-C2。用qPCR和Western blotting 分别检测敲除ezrin 增强子的Eca-C2 细胞中ezrin mRNA和蛋白的表达,用蛋白芯片技术检测MAPK通路相关蛋白的表达,用WST-1 法和细胞划痕愈合实验分别检测ezrin 增强子敲除对Eca-C2 细胞增殖和迁移能力的影响。结果:成功构建稳定敲除ezrin 增强子的食管癌细胞株Eca-C2;与对照细胞相比,ezrin 增强子敲除细胞ezrin mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(均P<0.05)。Eca-C2 细胞中17 种被检测的MAPK通路相关蛋白中有9 种(AKT、CREB、GSK3b、MKK6、mTOR、P38、P53、P70S6K和RSK1)表达下调,ezrin 增强子敲除后细胞的增殖和迁移能力受到明显抑制(均P<0.05)。结论:在人食管癌Eca-109 细胞中,敲除ezrin增强子可明显抑制细胞的增殖和迁移。 相似文献
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