雷帕霉素减轻碘佛醇诱导的模型大鼠急性肾损伤

目的 探讨自噬在造影剂诱导的大鼠急性肾损伤(CI-AKI)中的作用,并探讨其可能机制。方法 将SD大鼠随机分为对照(control)组、CI-AKI模型(尾静脉注射造影剂碘佛醇;model)组、雷帕霉素(RAPA)组和羟基氯喹(HCQ)组。测定血清中尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)含量;HE染色检测肾脏组织病理学;透射电镜观察自噬超微结构;Western blot观察微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ、泛素结合蛋白p62及组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)蛋白表达;RT-qPCR观察HDAC4 mRNA表达。结果 与对照组相比,模型组、HCQ组中BUN、Scr含量及HDAC4表达升高(P<0.01),肾脏近端小管出现明显损伤,其中模型组中自噬小体和自噬溶酶体增加,伴随着LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,p62水平降低(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,RAPA组出现较多自噬小体和自噬溶酶体,伴随着LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高和p62、HDAC4表达下降(P<0.05,P<0.01)。而HCQ组自噬相关结构明显减少,伴随着LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p62表...     

加权重基因共表达网络分析识别慢性肾脏病 足细胞损伤关键节点基因MAGI 2

目的 通过加权基因共表达网络分析（WGCNA）识别慢性肾脏病（CKD）足细胞损伤相关的基 因模块与关键基因。方法 从基因表达综合数据库（GEO）中下载包含足细胞损伤体外模型及CKD 患者肾小 球组份的表达谱GSE66107、GSE93798、GSE30528、GSE32591 4 个数据集。利用R 软件包做数据预处理并选 取错误发现率（FDR）<0.05 及差异倍数≥ 1.5 作为差异表达基因（DEG）;结合数据集GSE993395（133 例 CKD 患者肾小球样本）用WGCNA 进行模块化分析并对模块内基因进行功能注释（GO）,根据GO 结果和 含有文献报道的足细胞标准基因（PSG ）情况确定足细胞损伤相关模块,根据模块内基因连接度（Kwithin） 挑选枢纽（hub ）基因;利用Cytoscape 软件及插件Cluego 构建足细胞损伤相关模块基因的加权共表达网络。 结果 4 个数据集共得到 趋势一致的DEG 7 957 个,其中15 个DEG 在4 个数据集中均有差异（coDEG）。 GSE993395 中包含的4 031 个DEG 被用于WGCNA 分析;最终得到12 个基因模块,其中green 模块包含最多的 coDEG 和PSG,进一步通过Kwithin 发现其中同时作为coDEG 和PSG 的MAGI 2 基因是其hub 基因之一。结论 WGCNA 表达网络分析方法是一个高效的系统生物学方法,应用该方法发现CKD 时关键节点基因MAGI 2 在 足细胞损伤中可能起到重要作用。     

B细胞易位基因2在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨B细胞易位基因2（BTG2）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及临床意义。方法:分析癌症基因组图谱（TCGA）数据库中BTG2 mRNA在ESCC组织及癌旁组织中的表达,受试者工作特征（ROC）曲线分析BTG2 mRNA表达量在预测ESCC患者疾病状态和放疗敏感性中的诊断价值;免疫组织化学检测我院184例ESCC患者癌组织标本BTG2蛋白表达,其中包括55例行根治性放疗术的ESCC患者,50例正常黏膜组织作为对照。分析BTG2蛋白表达情况与ESCC临床特征的关系。结果:与对照组比较,BTG2 mRNA在ESCC组织中表达下降（5.08±1.06 vs 5.91±1.29,t=2.387,P=0.019）,与放疗敏感组患者比较,BTG2 mRNA在放疗抵抗的ESCC患者癌组织中表达下降（3.82±0.97 vs 5.44±0.73,t=4.935,P＜0.001）,ROC结果显示BTG2 mRNA在鉴别放疗敏感与放疗抵抗患者时特异性为95.65%,敏感性为75%（AUC=0.902,P＜0.001）;免疫组织化学结果显示ESCC组织中BTG2阳性表达（103/184）低于正常黏膜组织（42/50）,差异有统计学意义（χ2=13.10,P＜0.001）;BTG2表达在放疗敏感和放疗抵抗组织中的阳性表达率分别为57.9%（22/38）和23.5%（4/17）,差异有统计学意义（χ2=5.565,P=0.018）;ESCC患者BTG2蛋白表达差异在不同性别、年龄、T分期及M分期中无统计学差异（P＞0.05）,与N分期（χ2=4.134,P=0.042）及临床分期（χ2=5.303,P=0.021）相关;单因素分析结果显示,肿瘤分级（HR=0.500,95%CI:0.317～0.790,P=0.003）、N分期（HR=0.275,95%CI:0.157～0.479,P=0.000）、M分期（HR=0.317,95%CI:0.151～0.665,P=0.002）、临床分期（HR=0.269,95%CI:0.167～0.434,P=0.000）及BTG2表达（HR=1.956,95%CI:1.242～3.079,P=0.003）与ESCC患者总生存（OS）有关;多因素分析结果显示,肿瘤分级（HR=0.613,95%CI:0.381～0.987,P=0.044）、N分期（HR=0.507,95%CI:0.259～0.991,P=0.047）、临床分期（HR=0.504,95%CI:0.278～0.916,P=0.025）及BTG2表达（HR=1.608,95%CI:1.011～2.558,P=0.045）影响ESCC患者的OS。结论:BTG2具有作为预测ESCC进展及放疗敏感性生物标记物的潜在价值,并且是影响ESCC患者总生存率的独立预后因素。     

白藜芦醇对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞氧化应激损伤的保护作用

目的 探讨白藜芦醇(RSV)对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)引起的足细胞氧化应激损伤的保护作用及可能机制.方法 将小鼠肾脏足细胞系MPC5分为空白对照组(A组)、PAN处理组(B组)和PAN+RSV处理组(C组).采用台盼蓝染色法和流式细胞术分别检测足细胞活力和凋亡情况,共聚焦显微镜下观察细胞骨架排列情况,DCFH-DA染色检测足细胞内活性氧(ROS)含量,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,羟胺法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量.结果 与A组相比,B组小鼠足细胞活力、SOD和GSH-Px活性降低(P＜0.05),足细胞凋亡以及ROS、LDH和MDA含量增加(P＜0.05),足细胞骨架出现紊乱、重组和降解,并向边缘聚集;而C组经RSV干预后各项观察指标均得到有效改善(P＜0.05).结论 RSV可以部分逆转PAN诱导的足细胞损伤,其保护作用可能与抑制氧化应激、改善线粒体功能障碍相关.     

循环微小RNA-188-5p在冠状动脉造影术后对比剂肾病的预测价值

目的 观察冠状动脉（冠脉）造影术后循环微小RNA-188-5p(miR-188-5p)的变化,探讨其在对比剂肾病（CIN）发生中的预测价值。方法 从GEO数据库获得GSE81400和GSE130796表达矩阵并分析miR-188-5p在CIN大鼠血浆及肾脏中的表达;选取2020年6月至2020年12月于南京医科大学第一附属医院心血管内科行冠脉造影术后并发CIN患者作为CIN组,另按1:3比例纳入同时期无并发CIN的患者作为对照组,实时荧光定量PCR检测冠脉造影术前及术后12 h患者循环miR-188-5p表达,分析其临床意义。结果 分析GEO数据库中数据集显示CIN大鼠血浆中（1.116±0.034 vs. 1.00±0.031,P=0.005）及肾脏中[（GSE81400:1.860±0.309 vs. 1.00±0.051）,P=0.003;(GSE130796:2.360±0.317 vs. 1.00±0.497),P=0.031]的miR-188-5p表达高于对照组;共纳入CIN患者42例及非CIN患者126例,两组患者性别、血肌酐（SCr）值、血尿素氮（BUN）、药物使用情况...     

小檗碱通过调节KEAP1/Nrf2/FOXO3A信号通路减轻造影剂肾病

目的 探讨小檗碱减轻造影剂肾病(CIN)的作用及其可能机制。方法 30只SD大鼠随机均分为对照组(A组)、小檗碱组(B组)、CIN模型组(C组)、小檗碱治疗组(D组)和阿托伐他汀治疗组(E组)。检测大鼠SCr和BUN水平，HE染色评估肾小管损伤情况，测定肾脏组织中谷胱甘肽(GSH)含量，透射电子显微镜下观察小鼠肾脏组织线粒体损伤，TUNEL染色评估肾脏细胞凋亡情况，Western blot法检测Bcl-2、谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、Kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)、核因子2相关因子2(Nrf2)和叉头蛋白O3A(FOXO3A)蛋白表达，免疫组织化学染色检测SLC7A11、GPX4、Nrf2和FOXO3A的表达。结果 C组SCr和BUN水平、肾脏细胞凋亡、肾小管损伤组织学评分高于A组和B组(P<0.01);而D组和E组SCr和BUN水平、肾脏细胞凋亡、肾小管损伤组织学评分低于C组(P<0.05或P<0.01)。HE染色结果显示，C组肾小管闭塞，并伴随大量肾小管结构破坏和溶解，细胞内可见空泡样变性；D组肾小管结构较...