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目的 构建与糖基化磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidyl inositol,GPI)锚定序列相连的bcr/abl真核表达质粒,并检测其在COS-7细胞中基因和膜蛋白的表达.方法 以编码慢性粒细胞白血病bcr/abl融合蛋白全长序列的migP210质粒为模板,通过PCR扩增获得654 bp的bcr/abl融合基因片段,双酶切后定向插入真核表达载体pBudCF4.1中,经鉴定获得重组质粒pBB.同时用RT-PCR扩增人外周血淋巴细胞CD24分子中的GPI获得约243 bp的锚定序列,双酶切后克隆人pBB质粒中与ber/abl基因下游羧基端相连,获得重组质粒pBBG.在多聚阳离子介导下将pBBG质粒转染COS-7细胞,采用RT-PCR和Western blot检测bcr/abl融合基因和蛋白的表达.结果 经酶切和测序鉴定证实,由GPI锚定连接的ber/abl融合基因插入片段正确;RT-PCR检测到转染细胞中有bcr/abl融合基因,Western blot检测到转染细胞膜上有hcr/abl融合蛋白的表达.结论 成功构建由GPI锚定修饰的bcr/abl重组质粒pBBG,并能在COS-7细胞膜上表达出bcr/abl融合蛋白. 相似文献
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bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病样模型的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:构建bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病(CML)样模型,为深入研究CML发病机制和治疗奠定基础.方法:bcr-abl逆转录病毒Mig210载体经Phoenix-Ampe细胞包装后,取上清液感染5-FU处理后的BALB/c雄性小鼠骨髓细胞,再经尾静脉移植入经致死剂量γ射线(900cGy)照射的同种雌性受体鼠中.用形态学、RT-PCR和Western Blot鉴定小鼠成模情况.结果:小鼠移植8~9 wk后,外周血白细胞达2×1010~3×1010/L(为对照鼠的5~8倍),外周血涂片幼稚细胞达到0.10~0.20;骨髓粒系细胞显著增高,易见幼稚细胞,肝脾也可见白血病细胞浸润;移植4~5wk后在受体鼠骨髓和脾脏检出bcr-abl融合基因,8~9 wk后在肝脏亦检测出bcr-abl融合基因,同时在骨髓和脾脏也检测到bcr-abl融合蛋白.建模成功的小鼠3~5 Ino后相继死亡.结论:成功建立bcr-abl逆转录病毒介导的小鼠CML模型,可用于后续CML信号通路和治疗机制的研究. 相似文献
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部队是一个特殊的集体,部队干部的身体状况直接关系到我军战斗力好坏。部队医务工作长期与病人接触,属于乙型肝炎感染的高危人群,为了解这一人群的乙型肝炎感染情况,作对某部队医院的804名干部体检结果中HBsAg和HBsAb检测情况进行了统计分析,并与非医疗单位的部队干部和部队战士作一比较,现报告如下。 相似文献
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目的对不同孕期的妊娠妇女血常规检测结果进行分析,为临床诊断建立参考区间提供实验室数据。方法将3 222例正常妊娠妇女按照孕周不同分为孕早期、孕中期和孕晚期,分别对3个孕期的孕妇进行红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(HCT)、白细胞(WBC)、中性粒细胞百分比(N%)、淋巴细胞百分比(L%)的测定和统计分析,并与作为对照组的355例非孕健康育龄妇女的相应检测项目进行比较。结果正常妊娠者在不同孕期RBC、Hb、HCT水平均比对照组妇女低,在孕中期下降达孕期最低水平(P0.05),不同孕期之间比较差异有统计学意义(P0.05)。正常妊娠者WBC、N%均比对照组高,而L%则比对照组低(P0.05)。不同孕期之间WBC参数比较差异也有统计学意义(P0.05)。正常妊娠者血小板(PLT)计数较对照组降低,正常妊娠者在孕晚期达到最低值(P0.05)。结论建立正常妊娠妇女的血常规参数参考区间,有利于对妊娠贫血、感染、妊娠高血压综合征等疾病的诊断。 相似文献
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目的探讨癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和鳞状细胞癌抗原(SCC)辅助诊断肺癌的临床应用。方法用化学发光免疫分析法测定133例肺癌和169例良性疾病患者血清CEA、NSE和SCC水平。评价它们对肺癌的诊断价值。结果单项CEA、NSE和SCC检测的诊断灵敏度、诊断特异性、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比分别为49.6%、89.3%、78.6%、69.3%、4.8和0.56,41.4%、91.1%、78.6%、66.4%、4.7和0.64,39.8%、92.3%、80.3%、66.1%、5.2和0.65。二项联合平行试验的诊断灵敏度约60%,特异性大于85%。三项联合平行试验的诊断灵敏度为71.4%,特异性为85%。结论 CEA、NSE和SCC联合平行试验可明显提高对肺癌的诊断灵敏度,有利于肺癌的早期诊断。 相似文献
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