三角叶凤毛菊中的三萜化合物

目的:研究三角叶凤毛菊Saussurea deltoidea(DC.)Schulz-Bip.中具有抗肿瘤活性的三萜类化学成分。方法:利用正/反相硅胶柱色谱色谱、凝胶分子筛色谱、HPLC等色谱学方法分离、纯化化合物,运用波谱学方法鉴定化合物结构。结果:从三角叶凤毛菊乙酸乙酯萃取部位分离鉴定出7个三萜类化合物,其结构分别为:taraxast-20-ene-3β,3-O-diol(1),3β-hydroxy-11-oxo-ursan-12-ene(2),3β-hydroxy-taraxast-20-ene-30-aldehyde(3),21α-hydroxy-taraxasterol(4),ursan-9(11),12-diene-3β-ol(5),ursan-9(11),12-diene-3β-O-acetate(6),3β-hydroxy-9(11),12-diene-oleanol(7)。结论:7个三萜类化合物都是首次从该植物中分离得到。     

mTIGIT-mLumin跨膜融合蛋白慢病毒载体和真核表达载体的构建及体外的稳定表达

目的: 构建以mLumin荧光蛋白为指示系统的小鼠T细胞免疫球蛋白和结构域蛋白(mouse T cell Ig and ITIM domin,mTIGIT)胞外区真核表达载体,并表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。方法: 分别设计mTIGIT和mLumin的特异性引物,通过PCR技术扩增两个目的基因序列,经酶切、连接,克隆至plenti-puro和pcDNA3.1载体。将构建的plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体进行病毒包装并感染HEK-293T细胞,而pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达质粒转染非洲绿猴肾成纤维Cos7细胞,利用两种表达载体的药物抗性进行筛选感染或转染的细胞,检测融合蛋白的表达情况。结果： 通过PCR顺利扩增获得mTIGIT和mLumin,经酶切、连接插入至载体,基因测序结果证实克隆的mTIGIT和mLumin片段序列正确,并成功正确插入到plenti-puro载体和pcDNA3.1载体中;荧光显微镜和共聚焦显微镜观察显示,转染的HEK-293T细胞和Cos7细胞经过筛选能够稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。 结论： 成功构建plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体和pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达载体,且能够在目的细胞中稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。     

三角叶凤毛菊中类异戊二烯和苯丙素类化学成分

目的:研究菊科药用植物三角叶凤毛菊Saussurea deltoidea的化学成分.方法:利用正/反相硅胶柱层析色谱、凝胶分子筛色谱、HPLC等色谱方法进行化合物的分离,利用波谱学方法鉴定化合物结构.结果:从三角叶凤毛菊中分离出10个化合物,其结构分别鉴定为(3R,6R,7E)-3-hydroxy-4,7 -megastigmadien-9 -one(1),(3S,5R,6S,7E)-5,6-epoxy-3-hydroxy-7-megastigmen-9-one (2),3 -h ydroxy-β-damascone(3),S-(+)-dehydrovomifoliol(4),megastigman-5 -ene-3β,9R-diol(5),coniferaldehyde(6),β-hydroxypropiovanillone (7),3-hydroxy-1- (4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-1-propanone (8),dihydrosyringenin(9),4-[(1S)-3-hydroxy-1-methoxypropyl]-2,6-dimenthoxyphenol( 10).结论:化合物1～10均是首次从该植物中分离得到.     

上皮卵巢癌细胞系LncRNAs、mRNAs表达谱基因芯片分析

目的通过基因芯片分析上皮卵巢癌细胞系中差异表达的Lnc RNAs、m RNAs表达谱,为研究上皮卵巢癌相关Lnc RNAs的功能提供实验依据。方法采用基因芯片分析上皮卵巢癌细胞系A2780、HO8910、SKOV3与卵巢上皮细胞系HOSEpi C中Lnc RNAs和m RNAs的表达差异;对差异表达的m RNAs进行KEGG通路富集分析;用q RT-PCR在上皮卵巢癌细胞系及卵巢上皮细胞系中验证差异明显的6条Lnc RNAs的表达水平。结果基因芯片结果发现在3个肿瘤细胞系中上调的Lnc RNAs有227条,下调的有483条;3个上皮卵巢癌细胞系中差异表达的m RNAs主要富集在PI3K-AKT、m TOR及TNF-α等肿瘤相关通路中(P0.05);PTPRG-AS1、CCNT2-AS1、XLOC_009869、LINC01138在上皮卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、和OVCR3中表达上调(P0.05);RP11-252P19.2、RP11-744I24.2在上皮卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、HO8910、OVCR3和3AO中表达下调(P0.05)。结论基因芯片筛选出在上皮卵巢癌细胞系中差异表达的Lnc RNAs和m RNAs,差异表达m RNAs与PI3K-AKT、m TOR及TNF-α等肿瘤通路有关,有望为卵巢癌的诊断及治疗提供新的靶点。     

mLumin转染人肝癌HepG2细胞系的建立

目的:建立mLumin+的HepG2细胞系,为进一步建立肿瘤模型和小动物荧光成像观察奠定基础.方法:采用磷酸钙法,将pcDNA3.0-mLumin质粒转染至人肝癌细胞系HepG2,经G418筛选扩增后通过PCR检测mLumin基因在转染的肝癌细胞HepG2中的表达情况,同时应用荧光显微镜及流式细胞仪检测mLumin+的...     

水朝阳旋覆花的花中化学成分研究

目的:研究水朝阳旋覆花(Inula helianthus-aquaticaC.Y.Wu ex Ling)的花中倍半萜类成分。方法:运用正/反相硅胶柱色谱、Sephadex HL-20凝胶色谱、HPLC等色谱方法分离纯化化合物,MS,NMR等波谱学方法鉴定化合物结构。结果:从水朝阳旋覆花的花中分离鉴定出7个化合物:inuchinenolide B(1),8-epi-florilenalin-2-O-acetate(2),neogaillardin(3),tomentosin(4),atractyligenin(5),β-谷甾醇(6),β-hydroxypropiovanillone(7)。结论:所有化合物均为首次从该植物的花中分离得到。     

调节因子X5及其复合物的研究进展

调节因子X5(regulatory factor X5,RFX5)是在人体广泛表达的DNA结合蛋白,它通过结合RFXB和RFXAP形成RFX复合物,主要功能是转录调控主要组织相容性复合体MHCⅡ类基因。研究发现,RFX5还具有转录调控非MHC类靶基因的功能,尤其是与肿瘤相关的研究提示,RFX5可能在免疫系统和肿瘤进程中发挥重要的跨界分子作用。该文综述了RFX5及其组成RFX复合物的生物学特性,以及在裸淋巴细胞综合征、动脉粥样硬化和肿瘤等疾病中RFX5转录调控靶基因的研究进展。     

新生儿呼吸窘迫综合征患儿外周血CD24及炎症因子mRNA表达水平及其意义

目的检测新生儿呼吸窘迫综合症(NRDS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD24和炎症因子(TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-17A)mRNA的表达水平,并探讨其在NRDS诊断及预后中的意义。方法采集30例NRDS患儿治疗前后和30例健康新生儿外周血标本,分离PBMC,用实时定量PCR检测CD24、TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-17A mRNA表达水平。结果与健康新生儿比较,NRDS患儿CD24 mRNA水平明显升高(P0.01),而TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-17A mRNA水平差异无统计学意义(P均0.05)。与治疗前相比,治疗后NRDS患儿外周血PBMC中IL-6、MCP-1和TNF-αmRNA表达水平无明显变化(P0.05),但CD24有下降趋势,而IL-17A呈上升趋势,差异均有统计学意义(P均0.01)。结论 CD24可能成为NRDS诊断及预后评估的分子标志物。     

水朝阳旋覆花中的7个倍半萜内酯

目的:研究水朝阳旋覆花Inula helianthus-aquatica花序中的化学成分。方法:运用正/反相硅胶柱色谱、SephadexHL-20凝胶色谱、HPLC等色谱方法分离纯化化合物,利用MS,NMR等波谱学技术鉴定化合物结构。结果:从水朝阳旋覆花的花中分离鉴定出7个倍半萜内酯化合物:芳香堆心菊素(1),8-表-堆心菊内酯(2),水朝阳内酯(3),6-表-去乙酰基异薄菊灵(4),天名精内酯(5),2,3-二氢芳香堆芯菊素(6),二氢锦菊素(7)。结论:化合物12,,4,5为首次从该植物中分离得到。