金水宝胶囊生产过程中质量控制方法的建立

目的:完善金水宝胶囊生产过程中的质量控制体系,为该制剂的后续研究与应用提供实验依据。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),腺苷、鸟苷、尿苷含量测定的色谱条件为流动相甲醇(A)-0.1%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~14 min,100%~99%B;14~19 min,99%~89%B;19~39 min,89%~85%B),流速0.4 m L·min^-1,柱温30℃,进样量10μL,检测波长260 nm。麦角甾醇含量测定的色谱条件为流动相甲醇-水(98∶2),流速1 m L·min^-1,柱温25℃,进样量10μL,检测波长283 nm。结果:发酵虫草菌粉不同生产阶段样品的指纹图谱中主要色谱峰差异性较小。腺苷、鸟苷、尿苷的线性关系良好(R2均>0.999);三者的加样回收率分别为106.06%,101.25%,105.88%,RSD均<3.0%。于2016-2018年各抽取的20批样品中腺苷、麦角甾醇的含量均符合2015年版《中国药典》的要求,鸟苷、尿苷的质量分别为0.97~1.36,0.67~1.38 mg/粒。结论:市面所售金水宝胶囊质量较为稳定。建立的方法可用于检测金水宝胶囊的质量,且操作简便、稳定可靠,可为发酵虫草菌粉类产品的检测提供参考。     

发酵虫草菌粉中微量元素含量的测定

目的: 对发酵虫草菌粉中微量元素的含量进行分析评价,为制定发酵虫草菌粉中微量元素质量标准提供参考依据。方法: 采用原子吸收火焰法对发酵虫草菌粉中锌、铁、锰、铜、铅微量元素的含量进行分析。结果: 发酵虫草菌粉中微量元素的含量顺序依次为Fe>Mn>Zn>Cu>Pb。各元素方法线性关系良好,相关系数均>0.999 4;重复性试验RSD为0.54%~0.86%;回收率为96.05%~101.71%,RSD为0.32%~1.91%。结论: 该方法简单,精密度、灵敏度高,结果可靠。发酵虫草菌粉中微量元素含量均符合世界卫生组织对重金属限量的要求。     

蝙蝠蛾拟青霉及金水宝胶囊的DNA条形码鉴定

目的:由于传统方法对发酵菌丝体鉴定困难,采用DNA条形码技术对金水宝胶囊原料菌种蝙蝠蛾拟青霉及相关产品进行快速鉴定。方法:采用内转录间隔区(ITS)序列对收集的蝙蝠蛾拟青霉及其易混淆物种共8种168份样品进行条形码鉴定,并基于ITS序列设计蝙蝠蛾拟青霉特异引物对相关产品进行快速鉴定。结果:44份不同来源蝙蝠蛾拟青霉的ITS序列长度均为499 bp,无变异位点。基于ITS序列可对蝙蝠蛾拟青霉及其7种易混伪品进行区别;通过ITS序列设计的蝙蝠蛾拟青霉特异性引物(ITS-BF/ITS-BR)可特异扩增得到长度102 bp的短片段,采用该片段可快速鉴别蝙蝠蛾拟青霉与其他虫草菌,并可区分市场上相关产品。结论:通过ITS序列及特异性引物可以实现蝙蝠蛾拟青霉及其相关产品的快速鉴定,为金水宝胶囊的生产及质量控制提供参考。     

小诺霉素产生菌斜面传代遗传稳定性及倒种效果评价

小诺霉素障碍突变株在斜面上经连续传代,变异菌落增加,产孢子能力明显下降,但产量和组份的变化不大,在液体培养中,以发酵液连续接种对产量和组份影响也不大,能保持一定的遗传稳定性。根据小诺霉素菌种的特点,在发酵工业生产上采用了倒种技术,并运用方差分析和Duncan多范围检验法的方法,分析了正常罐、母罐、子罐发酵效价的差异,表明正常罐和母罐并不显著,子罐与正常罐、子罐与母罐差异显著(α=0.05),但不是极显著(α=0.01),子罐的发酵效价高于两者,证明在小诺霉素发酵生产中用倒种的效果是好的。     

甘油果糖注射液细菌内毒素检查法的研究

甘油果糖注射液为脱水药,用于各种原因引起的急慢性颅内压增高、脑水肿等。该品种收载于国家药品标准中,标准中规定的检查项是热原检查。细菌内毒素检查法以其操作简单、准确、快速、成本低而逐渐取代热原检查法,本文通过实验探讨以细菌内毒素检查取代热原检查甘油果糖注射液的     

发酵虫草菌粉(Cs-4)对糖尿病肾脏疾病大鼠肾功能的保护作用及初步机制

目的:探讨发酵虫草菌粉(Cs-4)对糖尿病肾脏疾病大鼠肾功能的保护作用及初步机制.方法:采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(40 mg· kg-)的方法复制糖尿病肾脏疾病大鼠模型.将所有模型大鼠随机分为模型组、Cs-4低(300 mg·kg-1)、中(600 mg·kg-1)、高剂量组(1 200 mg·kg-...