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泛素—蛋白酶体系统( Ubiquitin -proteasomesystem,UPS)调节蛋白质的稳定性,在细胞内稳态中起着重要作用[ 1 ].UPS参与许多生理过程,如细胞分化、凋亡、自噬、血管生成以及DNA修复和抗原提呈过程等[2-3].
泛素通过与不同的酶形成共轭级联复合物,进而与靶蛋白连接并启动特异性降解.泛素—蛋白酶体系统包括E1泛素激活酶、E2泛素活化酶和E3泛素连接酶[4].其中,E3泛素连接酶决定靶蛋白的特异性识别,在泛素化降解途径中具有重要意义. 相似文献
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目的 通过小分子化合物组合将人胚胎成纤维细胞(HEFs)重编程为化学诱导神经前体细胞(ciNPCs)。方法 HEFs重编程为ciNPCs涉及两个阶段,第1阶段是小分子组合诱导阶段,常氧条件下,将HEFs在含有小分子化合物组合VCR(VPA,CHIR99021,Repsox)的KSR培养基中培养15 d,HEFs形态发生变化,形成致密细胞集落。第2阶段是特异性诱导ciNPCs,将形成的细胞集落胰酶消化后,低粘附板中悬浮培养,可以形成ciNPCs神经球。采用CM-DiI染料标记P3代ciNPCs,并将其移植于6-OHDA法制作的帕金森大鼠模型右脑内侧前脑束(MFB)区,检测ciNPCs在PD大鼠脑内微环境中的存活、迁移以及分化状况。结果 VCR组合诱导10 d细胞开始出现明显的聚集趋势,15 d时,形成致密的细胞集落。单层培养1×105/孔中大约形成40个克隆,且AP染色呈阳性。将细胞集落消化后,低粘附板中悬浮培养培养2 d,可见大量神经球形成,即为第1代ciNPCs(P1代)。ciNPC高表达神经前体细胞(NPCs)特异性标记物(Nestin、Pax6和Sox2),经体外神经特异性诱导分... 相似文献
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目的 探讨环指和色氨酸-天冬氨酸重复序列结构域2(RFWD2)差异表达对小鼠大脑皮层神经元树突发育及树突棘形成的功能效应。方法 利用免疫荧光鉴定RFWD2在小鼠全脑的定位及表达谱,通过RFWD2与神经元突触蛋白的共定位,明确其在神经元的细胞定位。通过电转染RFWD2-Myc过表达与shRNA载体,分析其对体外培养小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能的影响及作用机制。结果 RFWD2在小鼠大脑皮层与海马区均高表达,与突触形成具有明显的正相关性。RFWD2在神经元的突触前膜及后膜均有表达,与神经元树突的长度、分支数量与复杂性呈正相关。与对照组相比,RFWD2 过表达显著降低了神经元突触蛋白数量[突触小泡蛋白(SYN)4.5±1.2 vs 17.2±2.4/10 μm,P<0.01;突触后致密蛋白(PSD95):2.1±0.3 vs 8.5±1.3/10 μm,P<0.01];而RFWD2抑制表达显著增加了突触蛋白数量(SYN:19.6±2.6/10 μm,P<0.05;PSD95:11.5±1.1/10 μm,P<0.05)。与对照组和RFWD2过表达相比,RFWD2抑制表达降低了树突棘的数量(4.3±0.2 vs 6.2±0.5/10 μm,P< 0.05;4.3±0.2 vs 6.9±1.1/10 μm,P<0.01)。结论 RFWD2可通过Pea3家族成员与c-Jun的泛素化影响突触蛋白的表达,调控小鼠大脑皮层神经元树突发育、树突棘形成与突触功能效应,为后期作为靶点开展神经系统疾病的治疗奠定基础。 相似文献
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目的:以创新型人才培养为目标,对《蛋白质与酶工程》立体化教学进行初步的探索与实践。方法:对蚌埠医学院2013级生物科学专业开展《蛋白质与酶工程》课程的立体化教学,并将其教学效果与该专业2012级的传统教学方法进行对比分析。结果:立体化教学对2013级学生自主学习能力、创新思维能力和团队协作能力培养等方面的教学效果均明显优于2012级(P < 0.01),对教学资源丰富度、教学效果和学习质量考核的评价也明显优于2012级(P < 0.01)。结论:在教学效果上,尤其是在提高大学生的自主学习能力、实践应用能力和创新思维能力培养效果上,立体化教学明显优于传统教学,更有利于创新实用型生物医学人才的培养。 相似文献
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目的 探讨猪诱导多能干细胞(iPSCs)体外定向分化为GABA能神经元前体的方法体系。方法 猪iPSCs诱导分化为GABA能神经元前体遵循两个阶段,第1阶段,猪iPSCs悬浮培养,第3天时形成类胚体,采用神经诱导培养基NIM(SB431542、DMH1、FGF2)继续诱导,第12天分化为原始神经上皮细胞。第2阶段,使用含Pur、B27的NIM培养基悬浮培养形成神经球,至第21天时形成GABA能神经元前体。CM-DiI标记后,定向移植帕金森(PD)模型大鼠黑质纹状体,检测其在宿主脑内存活、迁移及分化状况。结果 猪iPSCs在饲养层细胞上稳定传代,表达多能性标记OCT4、Nanog、SSEA1和TRA-160,并且核型分析显示没有其他物种来源细胞污染。第12天经诱导分化获得原始神经上皮细胞能够形成玫瑰花环结构,并表达其表面标记物(PAX6、SOX2 和 Nestin)与神经微管蛋白标志物 Tuj1。第 21 天诱导细胞高表达 GABA 能神经元前体的表面特异性抗原NKX2.1和前脑标志物FOXG1。移植8周后,体内可分化为GABA能神经元与多巴胺能神经元,明显改善PD大鼠运动行为。结论 结合无血清培养基筛选法逐步定向诱导猪iPSCs高效分化为前脑GABA能神经元前体,移植后能够显著改善PD大鼠的运动功能障碍,为诱导GABA能神经元前体移植治疗神经损伤疾病奠定基础。 相似文献
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基于医学院校生物科学专业的特色,分别构建了专业基础课程类的人体结构与功能学课程群和专业主干课程类的生化与分子生物学课程群,并结合实际详细阐述了课程群建设内容及优化措施,目的在于通过课程群的建设来促进生物科学特色专业建设. 相似文献
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目的:探讨As2O3在诱导小鼠乳腺癌细胞MA-891凋亡过程中的作用,以及对端粒酶及其亚单位mTERT mRNA活性表达的影响,为进一步进行小鼠体内实验提供理论和实验依据。方法:以小鼠乳腺癌细胞株MA-891为研究对象,将不同浓度的As2O3与MA-891细胞共培养不同时间后,MTT法检测As2O3对MA-891细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测As2O3对MA-891细胞凋亡的影响;TRAP-PAGE-银染法检测As2O3作用后MA-891细胞中端粒酶活性的改变;RT-PCR检测As2O3对MA-891细胞鼠端粒酶逆转录酶(mTERT)的影响。结果:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长,24,48 h的半数生长抑制浓度(IC50)分别为9.68,5.50μmol.L-1。5,10,20μmol.L-1的As2O3诱导MA-891细胞24 h后,细胞凋亡率依次为30.21%,48.26%,57.43%。5,10,20μmol.L-1的As2O3作用MA-891细胞24,48 h后,端粒酶活性显著下降,抑制程度呈明显的时间和浓度依赖性;银染条带也显示出相同结果。RT-PCR产物显示mTERT mRNA表达显著下降并呈时间和浓度依赖关系。结论:As2O3能显著抑制MA-891细胞生长、诱导细胞凋亡,可能是通过抑制细胞端粒酶及其亚单位端粒酶逆转录酶的活性而发挥作用。 相似文献
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根据医学院校生物科学专业的办学特色,结合细胞生物学领域的最新研究进展,将细胞生物学与相关医学课程进行整合,优化更新教学内容、改革教学方法和考核方式,形成具有医学特色的细胞生物学教学模式,提高学生知识应用能力和实践能力,为医学院校生物科学专业开展细胞生物学教学提供参考. 相似文献