反相高效液相色谱法分析纤溶酶纯度的方法研究

目的 建立纤溶酶反相高效液相色谱纯度测定方法。方法 采用SHISEIDO CAPCELL PAK C₁₈ SG300（250 mm×4.6 mm，5 μm），以0.1%三氟乙酸溶液-乙腈（95：5）为流动相A，以0.08%三氟乙酸溶液-乙腈（20：80）为流动相B，进行梯度洗脱，体积流量为0.7 mL·min^-1，检测波长280 nm，柱温40℃。参照2020年版《中国药典》四部9101药品质量标准分析方法验证指导原则进行专属性、检测限、耐用性考察。应用所建立的方法和分子排阻色谱法对3批样品纯度进行检测。结果 建立的反相色谱法专属性强，检测限为0.01%，耐用性强。对3批样品进行检测，质量分数在93.5%~96.9%，结果准确。结论 建立反相色谱法测定纤溶酶纯度，分辨率更高、重现性更好，可进行更好的质量控制。     

淡紫青霉ACCC31890对纤细薯蓣皂苷的生物转化

摘 要 目的：研究淡紫青霉菌对纤细薯蓣皂苷的生物转化,分离鉴定转化产物并进行药理活性探讨。方法: 使用硅胶柱色谱和半制备液相色谱分离转化产物,依据质谱(MS）、核磁共振(NMR)波谱分析进行结构鉴定,并对产物进行了体外抗炎活性的研究。结果: 从转化粗提物中分离得到三个依次脱糖基产物,分别为5R-spirost-5-ene-3-ol-O-β-D-Glucopyranoside (1→3)-β-D-Glucopyranosyl（1）,延龄草苷（2）和薯蓣皂苷元（3）,转化率分别为1%,1%,45%;体外抗炎活性研究表明三种转化产物对LPS刺激巨噬细胞分泌NO,IL-6和MCP-1具有不同程度的抑制作用,其抗炎活性随着糖链的逐步水解有所增加,以终产物薯蓣皂苷元的抗炎活性最强。结论:淡紫青霉菌转化纤细薯蓣皂苷得到薯蓣皂苷元的产率较高,糖基的数量对甾体皂苷类化合物抗炎活性有着一定的影响。     

基于UPLC-MS/MS同时测定款冬花中吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物的含量

目的:建立一种同时测定15个吡咯里西啶生物碱(pyrrolidine alkaloids,PAs)及其氮氧化物的超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC/MS/MS),完成15批不同来源的款冬花样品的含量测定。从而初步了解不同来源款冬花中PAs的分布现状,为药材的安全合理使用提供相关参考。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(3. 0 mm×150 mm,1. 8μm),流动相为含0. 05%甲酸和2. 5 mmol·L-1甲酸铵的水溶液(A)以及含0. 05%甲酸和2. 5 mmol·L-1甲酸铵的甲醇(B),梯度洗脱,流速0. 4 m L·min-1,进样量2μL,柱温40℃。采用Agilent 1290-6470 QQQ型超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪,离子化模式为ESI+,多反应监测模式(MRM)。利用外标法计算药材样品中所测成分的含量,通过计算不同成分的相对标准偏差(RSD)对样品间的差异进行分析。结果:建立的测定方法灵敏度高,分离度良好,方法学考察结果良好。样品测定结果表明,15批药材均含有PAs及其氮氧化物,且所含PAs种类基本相同。克氏千里光碱(senkirkine)是款冬花中最主要的PAs类成分。药材款冬花中不同PAs的含量与分布有较大差异。结论:款冬花中普遍含有吡咯里西啶生物碱及其氮氧化物,且以具有显著肝毒性的克氏千里光碱为其中最主要种类。针对PAs的含量测定为确保款冬药材的用药安全提供了有效的保证。     

刺囊酸微生物转化菌株的初步筛选

目的从自然界选出不同类型的菌种,并筛选可以转化刺囊酸的菌株。方法用微生物对刺囊酸进行转化,筛选出能转化刺囊酸的菌种,采用薄层色谱法(thin layer chromatography,TLC)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测转化反应的发生。结果从12株不同的菌种中,共筛选出4株菌株具有转化刺囊酸能力的菌株,TLC和HPLC结果显示不同菌株对刺囊酸的转化方式不一样。结论内生菌、梨形卷枝霉、总状毛霉、冬虫夏草的4个菌株具有转化刺囊酸的能力,这些转化产物可为新药研发提供更具价值的先导化合物。     

紫外可见分光光度法测定马齿苋中总酚酸的含量

目的:建立马齿苋中总酚酸的含量测定方法。方法:利用紫外可见分光光度法测定马齿苋中总酚酸的含量。结果:本实验建立了总酚酸的标准曲线,分别以阿魏酸和对香豆酸为指标,测得马齿苋中总酚酸平均含量分别为1.36%、9.11%,RSD=1.60%(n=6)。结论:建立了马齿苋中总酚酸含量测定方法,该法简单、快捷,重现性好,可用于马齿苋的质量控制和定量分析。     

注射用前列地尔干乳剂中甲氧基苯胺值测定方法的建立

目的 建立注射用前列地尔干乳剂中甲氧基苯胺值的测定方法.方法 样品以三氟乙酸破乳,用异辛烷溶解,60℃下水浴旋蒸15 min;残渣以异丙醇-异辛烷(2:8,V/V)溶解,与4-甲氧基苯胺反应,于350 nm波长处测定吸光度,并计算甲氧基苯胺值.结果 甲氧基苯胺质量浓度在0.6～2.4μg/mL范围内与吸光度线性关系良好...