断体地龙促进创伤愈合活性成分筛选研究

目的:从断体地龙提取液中筛选其促进创伤愈合的活性成分。方法:采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析对断体地龙提取液进行分离纯化,通过CCK-8法测定不同洗脱液对NIH3T3细胞增殖的作用,筛选活性较强的组分。结果:离子交换层析梯度洗脱后得到5个洗脱峰。在一定浓度范围内,五种成分对NIH3T3细胞均有促进增殖作用,细胞增殖率随着蛋白浓度增大呈依赖上升趋势。当蛋白浓度为1.5μg/m L时,各组细胞增殖率均达到最大值,其中3号洗脱液作用的细胞增殖率最大。结论:断体地龙提取液经离子交换层析后得到的3号洗脱液促进NIH3T3细胞增殖作用最强,表明其可能含有促进创伤愈合的潜在活性成分,有待进一步研究。     

百合地黄汤对失眠模型大鼠行为学及不同脑区单胺类神经递质的影响

目的：研究百合地黄汤对失眠模型大鼠行为学及大鼠皮层、脑干和海马组织中多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）的影响,探讨百合地黄汤治疗失眠的作用机制。方法：采用腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA,0.4 g·kg-1）复制失眠模型大鼠,将造模成功的大鼠随机分为模型组、地西泮组（0.92 mg·kg-1）、百合地黄汤高剂量组（28 g·kg-1）和百合地黄汤低剂量组（7 g·kg-1）,另设空白组,连续给药7天,采用旷场实验测定行为学评分,翻正反射实验评价百合地黄汤对大鼠睡眠的影响,高效液相色谱电化学检测法（HPLC-ECD）检测大鼠皮层、脑干和海马中DA和5-HT的含量。结果：百合地黄汤可以降低失眠模型大鼠的中央格停留时间、修饰次数和粪便颗粒数（P < 0.05）,缩短睡眠潜伏期并延长睡眠持续时间（P < 0.05）,大脑皮层、脑干和海马中5-HT含量明显升高（P < 0.05）,大鼠皮层中DA含量显著降低（P < 0.05）;与模型组相比,P < 0.05。结论：百合地黄汤可改善失眠模型大鼠行为学和睡眠,对DA和5-HT的调节作用可能是其治疗失眠的作用机制。     

断体地龙成分分离及促进创伤愈合活性研究

目的:研究断体三天的地龙提取液(DL3)对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3)增殖作用的影响。方法:制备断体三天的地龙提取液,盐析后得到四个组分(简称为S1、S2、S3、S4),以给药后成纤维细胞的增殖率为筛选指标,采用CCK-8试剂盒测定成纤维细胞的增殖率,观察不同组分对成纤维细胞增殖作用的影响,筛选出活性最强的组分。结果:在一定范围内,细胞增殖率随着蛋白浓度的增加呈依赖上升趋势。当蛋白浓度在6~8μg/m L之间时,各组间细胞增殖率均达到最大值,分别为113.62%、108.58%、117.03%和111.26%,其中S3对成纤维细胞增殖的促进作用最强。结论:断体再生期的地龙含有促进成纤维细胞增殖的活性组分,为进一步研究断体地龙中促进创伤愈合的物质奠定基础。