腺病毒介导MDA-7/IL-24选择性杀伤肝癌 细胞HepG2的研究

目的 ：观察MDA-7/IL-24基因对肝癌的选择性杀伤作用，为肝癌的基因治疗提供理论基础。 方法 ：将携带人MDA-7/IL-24基因的腺病毒Ad.mda-7感染人正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2;用RT-PCR法观察MDA-7/IL-24基因的表达;ELISA方法检测细胞培养上清液中MDA-7/IL-24蛋白的浓度;4甲基偶氮唑蓝染色法（MTT）及Hoechst染色观察MDA-7/IL-24对肝癌细胞的生长抑制和杀伤作用;Annexin-V和PI双染后流式细胞仪检测2种细胞的凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期。 结果 ：复制缺陷型腺病毒能介导外源基因MDA-7/IL-24在肝癌细胞株HepG2和正常细胞L02中的高效表达;细胞培养上清液中有MDA-7/IL-24蛋白的表达; MDA-7/IL-24能明显抑制肝癌细胞生长并可促进肝癌细胞的凋亡;MDA-7/IL-24阻滞肝癌细胞于G2/M期，能选择性杀伤肝癌细胞而对正常的肝细胞无阻滞作用和毒性作用。结论 ：复制缺陷型重组腺病毒载体Ad.mda-7能介导MDA-7/IL-24基因在人肝癌细胞中高效表达，促使细胞增殖阻滞及诱导肿瘤细胞凋亡，选择性地杀伤肝癌细胞HepG2，而对正常肝细胞L02无任何毒性作用。     

头孢哌酮-帮巴坦2:1新配比在预防消化道肿瘤手术感染中的应用

目的比较头孢哌酮-舒巴坦2l与1l两种配此在消化道肿瘤手术预防感染方面的临床疗效.方法80例需接受消化道肿瘤手术病人随机分入试验组和对照组各40例.试验组头孢哌酮-舒巴坦21,3.0g bid,7天;对照组头孢哌酮-舒巴坦11,4.0 g bid,7天.均术前30分钟开始用药,此后规则用药.结果试验组有效率85%(34/40),对照组有效率77.5%(3l/40),P＞0.05.试验组不良反应发生率为5%,对照组不良反应发生率为7.5%.结论国产头孢哌酮-舒巴坦21制剂与ll配比产品对消化道肿瘤手术预防感染有相似疗效.但结合疗效、安全性与药理特点等综合考虑,国产头孢哌酮-舒巴坦21制剂是更为适宜的预防消化道肿瘤手术感染用药.     

心脏及胸内大血管损伤的抢救体会

回顾了1979年～1991年间收治的10例心脏及胸内大血管损伤的病人,结合临床抢救及治疗实践,就有关问题进行总结分析。本组开放性损伤7例,闭合伤3例。8例痊愈,2例死亡。作者认为:强调速诊快治、对伤情有充分的估计和积极的手术治疗是抢救成功的关键。同时对大出血、心包填塞及心肌挫伤进行了讨论。     

肝组织多药耐药基因高表达与结肠癌肝转移的相关性研究

目的　探索早期检测肝组织多药性耐药基因对结肠癌肝转移的预测价值。方法　取裸鼠 4 0只 ,用人结肠癌SW4 80细胞系制作裸鼠原位结肠癌肝转移模型。模型建立的第 10天肝活检取左右肝叶各2mm3 组织 ,用实时荧光定量PCR方法检测多药耐药基因 (multidrugresistancegene,mdr- 1mRNA)的表达 ;模型建立的第 5周观察裸鼠肝脏是否形成肉眼转移灶。结果　经实时荧光定量RT -PCR检测肝活检组织mdr- 1基因 ,在存活的 36只裸鼠中 2 2例高表达 ,平均CT值 (Cyclethreshold ,即反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数 )为 2 5 90 1,平均拷贝数为 4 2 7× 10 7/ugRNA ,并高表达的 2 2只裸鼠均有肉眼肝转移灶形成 (10 0 % ) ;mdr - 1基因低表达 (平均CT值 33 36 8,平均拷贝数 2 11× 10 5)及无表达的 14只裸鼠中 ,仅 1例形成肉眼肝转移灶 (7 1% ) ,其余 13例均无肉眼肝转移灶形成 (P <0 0 1)。结论　结肠癌肝活检肿瘤细胞mdr- 1mRNA基因高表达与异时的肝转移灶形成有明显的相关性 ,提示检测结肠癌肝组织多药性耐药基因的高表达可以预测异时的肝转移灶形成。     

残胃癌病因学研究及其进展

1922年Balfour率先提出残胃癌是指胃良性病变行胃大部切除术后5年残胃发生的恶性肿瘤。有学者将胃癌行胃大部切除术后10年残胃基础上发生的胃恶性肿瘤也划归残胃癌。残胃是公认的癌前状态，近年研究表明，残胃癌的总发病率远较普通胃癌发病率高。Otorlando报告残胃癌发病发生率为0．55％～8．9％，国内的报道为0．3％～13．3％。     

miR-486-5p通过负向调控AMPK/Sirt1信号通路参与肝细胞性肝癌细胞增殖

目的:探究miR-486-5p在肝细胞性肝癌(HCC)中的变化及其调节HCC细胞系增殖的可能机制。方法:q-PCR法检测98例健康人血浆和87例HCC患者组织与血浆miR-486-5p含量,并采用Pearson相关性分析其与甲胎蛋白(AFP)升高的相关性,同时检测人HCC癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B、Huh-7、MS751和正常肝细胞LO2细胞及转染0,25,50,100μmol/L miR-486-5p类似物(miR-486-5p mimic) 24 h后LO2、MHCC97、HepG2和Huh-7细胞的miR-486-5p含量;CCK-8法检测转染miR-486-5p类似物2,12,24,48,72 h的LO2、MHCC97、HepG2和Huh-7细胞的增殖率;Western Blot检测Cyclin D1、Cyclin E1、CDK4、CDK6、p-AMPK、AMPK和Sirt1蛋白表达量;qPCR检测转染CCND1、CCNE、CDK4、CDK6 mRNA表达量。结果:HCC患者癌组织miR-486-5p含量明显低于癌旁组织,血浆中miR-486-5p含量明显低于正常人;HCC患者癌组织和血浆中miR-486-5p含量与血浆AFP含量呈显著负相关性,相关系数分别为-0. 1554和-0. 2228(P<0. 001);除Huh-7细胞外,人HCC癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B和MS751细胞中miR-486-5p含量明显低于LO2细胞(P<0. 05);相比于阴性对照类似物(NC)处理组,0至100μmol/L的miR-486-5p类似物处理LO2和Huh-7细胞24 h组的miR-486-5p水平均没有明显的变化(P>0. 05),50μmol/L和100μmol/L的miR-486-5p类似物处理24 h的MHCC97和HepG2细胞,相比于NC处理组,其miR-486-5p水平均显著增加(P<0. 05);miR-486-5p类似物处理LO2组的增殖率相比于NC和Control组无明显的变化。相比于NC和Control组,miR-486-5p类似物处理HepG2和MHCC97细胞24 h的增殖率相比于2 h的显著降低,分别为(77. 70±7. 53)%和(86. 61±1. 08)%。且具有时间依赖性。而miR-486-5p类似物处理Huh-7细胞48 h组增殖率为(84. 79±2. 33)%,明显低于2 h组;miR-486-5p类似物转染HepG2和MHCC97细胞24 h的Cyclin D1、Cyclin E、CDK6蛋白与mRNA表达量明显低于NC组(P<0. 05),HepG2的miR-486-5p类似物处理CDK4相比于NC组无明显变化(P>0. 05),MHCC97的miR-486-5p类似物组CDK4相比于NC组明显降低(P<0. 05)。p-AMPK与Sirt1蛋白水平均明显低于NC组。结论:过表达miR-486-5p通过下调p-AMPK/Sirt1通路阻断HCC肿瘤细胞细胞周期,并抑制癌细胞增殖。     

携带mda-7基因的复制缺陷型腺病毒通过促进线粒体释放促凋亡蛋白杀伤肝癌细胞

目的 探讨黑色素瘤分化相关基因7/白介素24(mda-7/IL-24)基因选择性杀伤肝癌细胞的机制.方法 应用携带mda-7基因的复制缺陷型腺病毒Ad.mda-7感染正常肝细胞L02和肝癌细胞HepG2.通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、酶联免疫吸附实验(ELISA)及Western blot方法,观察mda-7/IL-24基因的表达;应用Hoeehst染色和流式细胞仪观察mda-7/IL-24对肝癌细胞的杀伤作用;采用RT-PCR和Western blot方法,观察Bcl-2家族和caspase-9基因表达的变化,分离不同感染时点细胞内线粒体和胞浆蛋白,并检测线粒体释放促凋亡蛋白细胞色素C(Cyt-C)和Smac/DIABLO的变化过程.结果 Ad.mda-7能介导mda-7/IL-24在两种细胞株中的高效表达.能选择性杀伤肝癌细胞,感染24 h后,HepG2细胞凋亡率为24.0%±4.6%,而对正常的肝细胞没有影响.RT-PCR和亚细胞蛋白的分析结果显示,胞浆内Bel-2和Bcl-xL的表达在HepG2细胞中明显下降,而在L02细胞中的表达无变化,Bax在肝癌细胞中的表达明显增强,Bak的表达无变化;Ad.mda-7能促进细胞线粒体释放cyt-C和Smac/DIABLO蛋白,并促进caspase-9的表达.结论 Ad.mda-7能选择性杀伤肝癌细胞HepG2,通过促进线粒体促凋亡蛋白的释放而诱导肝癌细胞凋亡.     

心脏直视手术同期射频消融迷宫术治疗心房纤颤的早中期效果

目的 探讨外科直视射频消融(RF)治疗心房颤动(AF)的方法及疗效.方法 收治40例永久性AF合并风湿性心脏病病人,分成两组,A组(22例)和B组(18例).A组病人接受二尖瓣手术和单极冲洗式射频消融改良迷宫术治疗AF手术,B组病人单纯实行二尖瓣手术.两组病人基本特征无差别.结果 随访12个月后A组窦性心律为19例(86.4%),B组为2例(11.1%)(P<0.01).A组转为窦性心律的病人中有17例(89.5%)心脏多普勒显示左心房存在收缩功能,左心房较术前缩小.结论 单极冲洗式射频消融治疗AF是一种简易、安全、有效的方法.     

超声误诊先天性胆囊缺如1例报道

先天性胆囊缺如（gallbladderagenesis，GBA）系胆囊的先天性发育畸形，是人胚胎发育过程中肝憩室的尾部（又称囊部）发育不全，从而引起无胆囊、无胆囊管或实体胆囊等，其发生率极低，     

ICU内气道开放患者院内感染的调查分析及防治

目的探讨ICU内气道开放患者院感现状及防治措施。方法对890例气道开放患者追踪调查。结果入住ICU的气道开放患者的院内感染率从标本培养的阳性率来看,其住院时间越长,感染率越高,特别是60⁸0岁组,患者痰阳性率高达为51.21%,尿培养阳性率14.29%,导管培养阳性率9.12%,血培养阳性率8.25%。结论通过综合调查分析,提高院感认识与防治。