岗梅黄酮类化合物提取工艺与抗氧化性研究

目的:研究微波辅助提取岗梅黄酮类化合物的最佳提取工艺条件,初步鉴别其种类,探究其体外抗氧化性。方法:在单因素试验的基础上,采用正交试验筛选微波辅助提取岗梅黄酮类化合物的最佳工艺条件,通过颜色反应初步鉴别其种类;采用水杨酸法、邻苯三酚自氧化法和硫代硫酸钠滴定法研究其抗氧化性。结果:微波辅助提取岗梅黄酮类化合物的最佳工艺条件为乙醇浓度90%、固液比1∶40、浸提温度70℃、浸提时间1h、微波功率640W、微波时间50s,在此条件下,岗梅黄酮类化合物的提取率为2.75%。通过颜色反应初步鉴别岗梅提取液中含有异黄酮、查尔酮、橙酮、儿茶素类化合物以及黄酮醇等成分。结论:岗梅乙醇提取物对羟自由基、超氧阴离子自由基和油脂具有明显的清除作用。岗梅黄酮类化合物具良好的抗氧化性,值得开发利用。     

褐藻素通过调控Nrf2/Keap1通路缓解糖尿病大鼠心肌肥大

目的 探索褐藻素（FX）对糖尿病心肌病的保护效应和作用机制。方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,进行分组：糖尿病组（DM）、褐藻素干预糖尿病组（DM+FX）和二甲双胍干预糖尿病组（DM+Met）,另取正常大鼠给予正常喂养作为正常组（Con）。造模成功后连续12周每日灌胃给药,褐藻素组每日给予200 mg/kg褐藻素灌胃,二甲双胍组每日给予230 mg/kg灌胃,糖尿病组同步灌胃生理盐水。HE染色观察各组大鼠心脏细胞肥大情况;Western blot法检测大鼠心脏中纤维化蛋白TGF-β1和FN蛋白表达水平。H9C2细胞分为3组：正常糖组（NG,5.5 mmol/L葡萄糖）、高糖组（HG,45 mmol/L葡萄糖）和褐藻素干预高糖组（HG+1 μmol/L FX）。FITC标记的鬼笔环肽检测大鼠心肌细胞H9C2表面积变化;qRT-PCR法测定各组细胞肥大因子ANP、BNP和β-MHC基因表达变化;Western blot法检测各组大鼠心脏组织和H9C2细胞中Nrf2、Keap1、HO-1、SOD1蛋白表达水平;DCFH-DA探针检测细胞内活性氧水平变化。结果 褐藻素改善糖尿病大鼠心肌纤维化和心肌细胞肥大,同时上调心脏组织中Nrf2和HO-1蛋白表达,抑制Keap1蛋白表达（P<0.05）。褐藻素可抑制高糖诱导H9C2心肌细胞表面积增加,降低ANP、BNP和β-MHC的mRNA表达水平（P<0.05）。褐藻素可促进高糖诱导的H9C2细胞中Nrf2入核,上调下游靶蛋白SOD1和HO-1蛋白表达（P<0.05）来增强细胞抗氧化能力,降低细胞内活性氧的水平。结论 褐藻素具有良好的抗糖尿病心肌纤维化和心肌细胞肥大作用,同时上调Nrf2信号通路并促进下游抗氧化蛋白SOD1和HO-1的表达,降低活性氧水平。