芪参颗粒的HPLC指纹图谱与多成分定量测定研究

目的建立芪参颗粒的HPLC指纹图谱分析方法,并对其中的主要成分进行同时定量分析,为芪参颗粒的质量控制提供依据。方法采用HPLC法,用Agilent Eclipse plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长254 nm,柱温30℃。建立10批芪参颗粒样品的HPLC指纹图谱,并进行相似度评价;通过与各组方药味的比对,对共有峰进行归属,通过LC-Q TOF-MS对所有共有峰进行鉴定,并对通过对照品比对确认的9个共有峰进行定量测定。结果 10批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.991;对标定的18个共有峰进行归属和鉴定,发现1、2、8、14、18号峰来自黄芪,3～7、9～11号峰来自金银花,12、13、15、16号峰来自丹参,17、18号峰来自甘草;通过对照品的指认,发现4号峰为绿原酸、8号峰为毛蕊异黄酮葡萄糖苷、9号峰为异绿原酸B、10号峰为异绿原酸A、14号峰为芒柄花苷、15号峰为丹酚酸B、16号峰为丹酚酸A、17号峰为甘草酸及18号峰为芒柄花素,并对这9种成分进行了定量测定,测定结果分别为6.676～10.213、0.628～0.963、1.018～1.886、1.082～1.972、0.477～0.790、11.327～17.788、0.519～0.908、2.000～3.638、0.010～0.016mg/g。结论建立的芪参颗粒HPLC指纹图谱和9个指标成分的同时定量测定方法专属性强,简便、可靠,重复性好,可为芪参颗粒质量控制和评价提供参考。     

丹荷颗粒25种特征性成分LC-MS测定及制剂一致性分析

目的 建立高效液相色谱-三重串联四级杆质谱（HPLC-MS/MS）联用同时测定丹荷颗粒中25种特征性成分（没食子酸、丹参素、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、芦丁、虎杖苷、金丝桃苷、紫云英苷、柚皮苷、橙皮苷、迷迭香酸、白藜芦醇、丹酚酸B、槲皮素、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、异鼠李素、大黄素、乌药碱、荷叶碱、隐丹参酮、丹参酮I、去氢荷叶碱、丹参酮II_A）含量的方法，并对其制剂批次间的一致性进行分析。方法 HPLC采用Agilent Rapid Resolution HD C₁₈色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.8 μm），流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液；质谱采用动态多反应监测（dMRM）扫描模式。对25种特征性成分进行含量测定。结果 建立的HPLC-MS/MS方法在10 min内完成了25种特征性成分的同时定量分析，定量限分别为异鼠李素、乌药碱、去氢荷叶碱0.025 ng/mL、大黄素、丹参酮I 0.050 ng/mL，大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷0.200 ng/mL，没食子酸、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、芦丁、金丝桃苷、紫云英苷、白藜芦醇、槲皮素、荷叶碱、丹参酮II_A 0.250 ng/mL，儿茶素、迷迭香酸、隐丹参酮0.500 ng/mL，丹参素、橙皮苷、丹酚酸B 1.000 ng/mL，虎杖苷2.000 ng/mL，柚皮苷5.000 ng/mL；且25种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（r>0.990 1），平均加样回收率85.16%~113.46%，RSD为2.01%~8.80%。此外，该方法较为全面地囊括了丹荷颗粒中君臣佐使药材的主要成分，25种成分总量为31.49 mg/g，其中丹酚酸B（9.44 mg/g）及橙皮苷（7.60 mg/g）质量分数最高，异鼠李素（0.79 μg/g）质量分数最低。经箱线图（Box-plot）分析，10个不同批次丹荷颗粒制剂中25种成分质量分数波动范围（P值）在75% < P < 125%；以及统计方法分析，25种成分质量分数的RSD在2.58%~13.10%；以上结果表明10批丹荷颗粒制剂间成分含量一致性合格。结论 所建立的分析方法快速、灵敏度高，结果真实可靠，能够为丹荷颗粒制剂的质量控制和制剂一致性分析提供科学方法及依据。     

清霾饮对北京地区PM2.5致肺损伤小鼠的免疫调节作用研究

目的:探讨清霾饮对北京地区PM2.5大气暴露下小鼠的免疫调节作用。方法:采用鼻滴入PM2.5溶液的方法建立模型,将ICR小鼠随机分为生理盐水组、模型组、利巴韦林组、清肺化痰丸组、清霾饮中、高剂量组、清霾饮预防组。观察各组小鼠肺组织病理变化并运用双抗夹心酶联免疫吸附法比较TNF-α、IL-2、SIL-2R变化。结果:模型组小鼠肺匀浆中TNF-α水平和SIL-2R水平低于生理盐水组,IL-2水平高于生理盐水组,差异均有统计学意义(P0.01)。清霾饮中、高剂量组小鼠肺匀浆中TNF-α水平和SIL-2R水平均高于模型组,IL-2水平低于模型组,差异均有统计学意义(P0.01)。且各指标随干预剂量的升高其影响幅度增加。结论:清霾饮对PM2.5染毒小鼠具有一定的免疫调节作用。