益气逐瘀解毒颗粒调控 MMPs/TIMPs 平衡抗大鼠肝纤维化作用研究

目的:探讨益气逐瘀解毒颗粒对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用及机制。方法:将SD雄性大鼠给予CCl4橄榄油混合液进行皮下注射7周,制备肝纤维化大鼠模型,随机分为益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组、阳性对照组、模型组、空白组,给予相应治疗,5周后处死大鼠,检测外周血生化指标,逆转录-定量PCR法和蛋白印迹法分别检测大鼠肝组织中基质蛋白酶1 (Matrix metalloproteinase1, MMP-1)、MMP-2、MMP-9、MMP-13及基质蛋白酶抑制因子1 (tissue Inhibitor of metalloproteinases1,TIMP-1)表达水平,肝组织苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin staining, HE染色)、MASSON染色检测肝纤维化程度。结果:治疗后与空白组比较,模型组的ALT、AST无显著性差异(P 0.05),MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达显著降低(P 0.05),TIMP-1基因表达显著升高(P 0.05),肝纤维化半定量计分(SSS)评分显著升高(P 0.01);与模型组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13基因表达明显升高(P 0.05),中剂量组MMP-9、MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),低剂量组MMP-13基因表达明显增高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组MMP-2、MMP-9蛋白表达量无显著性差异(P 0.05),高、中剂量组MMP-13蛋白表达量显著升高(P 0.05),各剂量组TIMP-1蛋白表达量均显著下降(P 0.05),以低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),各药物干预组SSS评分显著降低(P 0.01);与阳性对照组比较,益气逐瘀解毒颗粒各剂量组ALT、AST无显著性差异(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高剂量组MMP-2基因表达明显升高(P 0.05),高、中剂量组TIMP-1基因表达明显降低(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中剂量组MMP-13蛋白表达显著升高(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒各剂量组TIMP-1蛋白表达显著降低(P 0.05),低剂量组下降尤为显著,优于高、中剂量组(P 0.05),益气逐瘀解毒颗粒高、中、低剂量组SSS评分显著降低(P 0.01)。结论:调控MMPs/TIMPs平衡可能是益气逐瘀解毒颗粒抗肝维化的作用机制之一,其通过升高MMP-13、降低TIMP-1表达水平,调控MMPs/TIMPs平衡,促进过度沉积的细胞外基质(Extracelluar matrix,ECM)降解,改善CCl4诱导肝纤维化大鼠模型的肝脏功能,从而改善其肝纤维化程度。     

基于microRNAs调控的轻度慢性乙型肝炎炎症活动的分子机制研究

目的 研究从microRNAs角度揭示轻度慢性乙型肝炎炎症活动的分子机制.方法 将符合标准的病例分为轻度慢性乙型肝炎组与慢性HBV携带者组,借助Agilent Human microRNA 8×60 k微阵列芯片检测血浆中microRNAs表达谱,求得两组间的差异表达microRNAs谱(P＜0.05),借助microRNAs生物信息学分析软件预测其靶基因并对靶基因进行GO功能富集分析和pathway分析.结果 两组间的差异表达microRNAs共65条(P＜0.05),38条上调,27条下调;GO分析及pathway分析得到其功能主要涉及细胞增殖、生物黏附、生物合成过程的正/负调控、大分子生物合成过程中的正/负调控、蛋白氨基酸的磷酸化、RNA的生物合成过程、Wnt信号通路、MAPK信号通路、Notch信号传导途径、Hedgehog信号通路、T细胞受体信号通路、TGF-β信号通路、mTOR信号通路、趋化因子信号通路JAK-STAT信号通路、钙离子信号通路等.结论 轻度慢性乙型肝炎炎症活动受特异性microRNAs调控,其涉及多个生命过程及通路.     

附子对免疫性肝损伤模型大鼠的影响及代谢组学研究

目的探讨附子对急性免疫性肝损伤动物模型的干预和保护作用。方法将50只SD大鼠随机分为5组：正常组10只,模型组10只（采用卡介苗联合脂多糖法建立免疫性肝损伤的大鼠模型）,低、中、高剂量治疗组各10只（治疗组采用附片免煎剂进行干预）。取大鼠血清观察ALT、AST、TBIL的改变情况,取肝组织进行病理组织学检查、代谢组学检测。结果各用药组均能明显降低免疫性肝损伤大鼠的ALT、AST、TBIL,与模型组比较有显著性差异（P〈0．05）。病理组织学检查,各用药组均能减轻肝组织的损伤。代谢组学检测表明附子免煎剂能减轻肝损伤所造成的小分子代谢物的改变。结论中药附子免煎剂能够减轻免疫性肝损伤大鼠的肝损害,具有一定的保肝降酶作用。     

基于TLR4-IRF3-IFN通路的清热利湿活血方治疗HBV转基因小鼠抗HBV作用机制研究

目的:观察清热利湿活血方治疗HBV转基因小鼠抗乙肝病毒(HBV)及其机制作用。方法:HBV转基因小鼠随机分4组,苦参素组小鼠给予同体积含150mg/kg·d苦参素混悬液,清热利湿活血方组小鼠分别给予同体积含7、2g/kg·d混悬液,5周后,常规HE染色观察肝组织病理变化;ELISA法检测血清及肝组织中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg);ELISA法检测血清干扰素α(IFNα)、干扰素β(IFNβ);定量PCR法检测血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)及肝组织中HBVDNA、Toll样受体4(TLR4)mRNA、干扰素调控因子3(IRF3)mRNA表达;Western bloting法检测肝组织TLR4、IRF3蛋白表达。结果:7g/kg·d清热利湿活血方可以减轻肝细胞轻度脂肪变性、肝细胞轻度水肿及Kuffer细胞增生等病理改变,可以显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBsAg、HBVDNA水平;清热利湿活血方(7g/kg·d)显著增强小鼠TLR4mRNA、IRF3mRNA及蛋白表达;清热利湿活血方(7g/kg·d)可显著升高血清IFNα、IFNβ。结论:清热利湿活血方具有抗HBV作用,其机制与激活TLR4-IRF3-IFN信号通路有关。     

小儿烫伤并发十二指肠穿孔一例

患儿男 ,2岁。因热液烫伤 5 0ｈ入院 ,院外未行补液。查体 :体温不升 ,脉搏 :15 6次 /ｍｉｎ ,呼吸 :2 8次 /ｍｉｎ。面色苍白 ,四肢冷 ,口干 ,尿量 7ｍｌ/ｈ ,反应差。创面分布于面、颈、胸及双上肢。血Ｎａ :12 3ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｋ :45 7ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｃｌ-:92ｍｍｏｌ/Ｌ ,Ｈｂ :12 6 ｇ/Ｌ。诊断 :(1) 18%ＴＢＳＡⅡ度烫伤 (2 )低血容量性休克。立即补液抗休克 ,抗感染 ,预防性使用甲氰咪胍 0 .2 ｇ静脉滴注 2次 /ｄ ,休克得以纠正。入院第 3天 ,呕吐淡红色血性胃内容物约 10 0ｍｌ,黑便及暗红色血便 4次 ,共约 5 0 0 ｇ ,并出现腹胀但腹…     

血塞通致过敏反应2例

血塞通注射液在临床应用于脑梗死,脑血管病后遗症,眼前房出血等。无明显毒副反应未见报道有过敏反应发生。本人曾遇到2例,现报道如下,希引起同道注意。例1:患者女,47岁,因右侧肢体麻木,言语笨拙5ｄ就诊,体检:Ｂｐ240/16.0ＫＰａ,神清,右侧肢体痛,温觉迟钝,心、肺、腹无异常。即用血塞通(昆明制药股份有限公司制造)400ｍｇ加入5%葡萄糖500ｍｌ静滴,05ｈ后出现全身瘙痒、大片风团,立即停药;静注糖酸钙、地塞米松等抗过敏治疗,皮疹消退。例2:患者女,42岁,因言语笨拙,舌体麻木3ｄ余就诊,体检:Ｂｐ21.0/12.0ＫＰａ,神清、伸舌居中,无震颤及萎缩,…     

PEDF、END 在UUO 肾组织的表达及ADSCs 对其的影响

目的 动态观察大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）肾组织中色素上皮衍生因子（PEDF）及内皮抑素（END）的变化,以及脂肪干细胞（ADSCs）对其的影响。方法 复制UUO 动物模型,以ADSCs 进行干预,选取UUO 术后第3、7 和14 天为时间点,观察大鼠在UUO 后肾损伤及纤维化的进程,以及PEDF 和END蛋白的表达变化。结果 肾损伤、纤维化程度及PEDF 的表达随梗阻时间延长而加重或增加。END 在术后先增加后降低,但仍高于对照组。ADSCs 干预在各个时间点均能使END 和PEDF 的表达降低。结论 UUO后PEDF 和END 蛋白表达上调可能是梗阻后微血管损伤、血管生成调节异常介导的微血管闭塞产生的重要机制之一。ADSCs 干预可通过抑制PEDF 和END 的表达,促进损伤血管的修复和新生血管的生成。     

损伤性肾匀浆体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞转分化效果及可能机制的研究

目的：利用损伤性肾匀浆体外模拟急性肾损伤的微环境,探讨骨髓间充质干细胞（BM SC ）诱导转分化及其可能机制。方法将体外培养的BM SC用10％大鼠缺血再灌注损伤肾匀浆上清液进行培养。7 d后从形态学改变、18型角蛋白（CK‐18）、肝细胞生长因子（HGF）、骨形态发生蛋白‐7（ BM P‐7）的相应表达水平。结果损伤肾匀浆诱导7 d后,骨髓间充质干细胞形态发生明显变化,并检测到CK‐18阳性表达;同时被诱导的HGF和BMP‐7表达水平明显升高。结论损伤肾匀浆可诱导BMSC部分向肾小管上皮样细胞转分化,其可能机制是BMSC可能以旁分泌的形式产生了 HGF和BMP‐7等“肾脏保护因子”。     

HH胶囊治疗HBV转基因小鼠的抗HBV机制分析

目的:观察HH胶囊的抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)疗效及作用机制。方法:采用大连依利特ODS-BP C18色谱柱研究HH胶囊的HPLC指纹图谱。HBV转基因小鼠随机分4组,苦参素组小鼠按150 mg·kg~(-1)·d~(-1)给予苦参素混悬液,高、低剂量HH胶囊组小鼠分别按7,2 g·kg~(-1)·d~(-1)给予HH混悬液,模型组给予等体积的生理盐水,5周后,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBs Ag),干扰素α(interferonα,IFN-α),干扰素β(interferonβ,IFN-β)及肝组织HBs Ag,常规苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化,实时荧光定量聚合酶链式方应(q PCR)法检测血清及肝组织乙肝病毒的脱氧核糖核酸(hepatitis B virus DNA,HBVDNA)。结果:标定14个特征峰构成HH胶囊的指纹图谱,其中1号峰为没食子酸,8号峰为柯里拉京,9号峰为虎杖苷,10号峰为鞣花酸,13号峰为甘草酸,14号峰为齐墩果酸。与模型组比较,高剂量HH胶囊可以明显降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBs Ag,HBVDNA水平,差异具有统计学意义(P0.01),与苦参素组比较差异无统计学意义;高剂量HH胶囊可显著升高小鼠IFN-α,IFN-β,差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。结论:HH胶囊具有确切的抗HBV作用,可能与升高IFN-α,IFN-β有关。     

黄虎方对HBV转基因小鼠病毒复制及TKB1-IRF7-IFNα/β通路的影响

目的 观察黄虎方(HH方)治疗HBV转基因小鼠抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)疗效及其作用机制。方法 HBV转基因小鼠随机分为4组,苦参素组小鼠给予含150mg/(kg·d)苦参素混悬液,高、低剂量HH方组小鼠分别给予含7g/(kg·d)、2g/(kg·d) HH混悬液,均为每日1次灌胃,共5周,Elisa法检测血清及肝组织中乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen, HBsAg),Elisa法检测血清干扰素α(interferon-α, IFNα)、干扰素β(interferon-β, IFNβ),定量PCR法检测血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(hepatitis B virus DNA, HBVDNA)及肝组织中HBVDNA、TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1, TKB1)mRNA、干扰素调控因子7(interferon regulatory factor 7, IRF7) mRNA表达。Western Bloting检测肝组织中TKB1、IRF7蛋白表达。结果 高剂量HH方(7g/(kg·d))可以显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBsAg、HBVDNA水平,差异具有统计学意义(P<0.01, P<0.05),与苦参素组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量HH方显著增强小鼠TKB1 mRNA、IRF7 mRNA及蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.01, P<0.05)。高剂量HH方可显著升高血清IFNα、IFNβ,差异有统计学意义(P＜0.01, P＜0.05)。 结论 HH方具有一定抗HBV作用,推测可能与影响TKB1、IRF7的mRNA和蛋白表达进而促进IFNα /β分泌有关。