双参宁心胶囊对冠状动脉微循环障碍大鼠心脏功能及血流动力学的影响

目的 研究益气活血中药双参宁心胶囊对冠状动脉微循环障碍大鼠心脏血流动力学及心功能的影响。方法 大鼠随机分为6组,分别为假手术组,模型组,尼可地尔组（5 mg·kg^-1）,双参宁心胶囊高、中、低剂量（180,90,45 mg·kg^-1）组。动物按分组先给予相应药物7 d,末次给药后2 h进行模型制备。采用左心室注射内注射栓塞微球（40~120 μm,约1 000个微球）方法建立大鼠冠脉微循环障碍模型。造模术后24 h后超声心动图观察左室舒张末期内径（LVIDd）,左室收缩末期内径（LVIDs）,左室舒张末期容积（LVEDV）,左室收缩末期容积（LVESV）,每搏输出量（SV）,心输出量（CO）,左室射血分数（EF）,左室缩短率（FS）;心导管技术测定大鼠动脉收缩压（SBP）,舒张压（DBP）,左室峰压（LVSP）,左室舒张末压（LVEDP）,左室内压最大上升速率（LV+dp/dt_max）,左室内压最大下降速率（LV-dp/dt_max）,计算平均动脉（MAP）,体表标准Ⅱ导心电图计算心率（HR）;生化分析法检测肌酸激酶（CK）,肌酸激酶同工酶（CK-MB）和乳酸脱氢酶（LDH）活性;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清心肌肌钙蛋白T（cTnT）;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠心肌组半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）,B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）及Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达;2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色观察心肌梗死面积;苏木素-伊红（HE）染色观察心肌形态学改变。结果 与假手术组比较,模型组SV,CO,EF,FS显著降低（P<0.01）,LVIDs,LVEDV显著增加（P<0.01）;与模型组比较,双参宁心胶囊各剂量组可以增加EF（P<0.05,P<0.01）和FS（P<0.01）;180,90 mg·kg^-1剂量组明显降低LVIDs,LVESV,增加LVEDV,SV和CO（P<0.05,P<0.01）。与假手术组比较,模型组SBP,DBP,MAP,LVSP,LV+dp/dt_max及LV-dp/dt_max均显著降低（P<0.01）,HR差异无统计学意义。双参宁心胶囊各剂量组对大鼠血流动力学具有一定程度改善,较模型组增加大鼠SBP,DBP,MAP,LVSP,LV+dp/dt_max,LV-dp/dt_max及HR（P<0.05,P<0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠血清CK,LDH,CK-MB及cTnT明显升高（P<0.01）,与模型组比较,双参宁心胶囊有明显降低动物血清CK,LDH,CK-MB及cTnT的作用（P<0.05,P<0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠心肌Caspase-3蛋白表达显著升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达明显降低（P<0.05）。与模型组比较,双参宁心胶囊低剂量组心肌Caspase-3蛋白表达降低（P<0.05）;与模型组比较,双参宁心胶囊高剂量组显著增加大鼠心肌Bcl-2表达（P<0.01）。心肌TTC染色显示,与模型组比较,双参宁心胶囊各剂量组均能显著减少心肌梗死面积（P<0.01）。HE病理结果显示,双参宁心胶囊各剂量组心肌组织病理变化与模型组比较有不同程度的减轻。结论 益气活血中药双参宁心胶囊可以明显增加微球栓塞导致的冠脉微循环障碍的心脏功能,改善心脏血流动力学指标,减少心肌梗死面积,降低CK,LDH,CK-MB及cTnT等心肌损伤标志物水平,其作用机制与抑制心肌细胞凋亡起到保护心肌的作用有关。     

中药通过线粒体自噬保护缺血心肌的研究进展

缺血性心脏病是全球死亡率最高的疾病之一,人们迫切需要新的治疗方法和预防手段。一般情况下,心肌细胞依赖于线粒体氧化磷酸化所产生的三磷酸腺苷(ATP)来维持其舒缩功能和离子泵功能。细胞自噬是一种广泛存在于真核细胞内的程序性降解机制,是机体组织的一种自我防御机制和自我修复过程,也是细胞凋亡的一种方式,是维持人体细胞能量平衡的一种基本现象。线粒体自噬是细胞选择性自噬的一种,是受损线粒体利用自噬机制选择性清除受损的蛋白质和细胞器来维持细胞内环境稳定。线粒体自噬对于维持心肌细胞的稳态非常重要。随着现代生物学研究的深入,越来越多的中药或其提取物被证实可以通过自噬或者调节线粒体的功能来改善缺血/再灌注后的心肌细胞损伤。这更加启发着中医药工作者以线粒体为靶向寻找有效的治疗措施。基于以上背景,本文就线粒体自噬在缺血性心脏病中的作用以及中医药在该领域的干预研究进行综述。     

中药调控线粒体自噬治疗缺血性心脏病的物质基础和潜在用药规律研究

目的 运用网络药理学和数据挖掘方法,分别建立潜在和临床常用的通过调控线粒体自噬治疗缺血性心脏病中药的数据库,归纳分析药物的物质基础及潜在用药规律,为新药研发提供参考。方法 通过检索京都基因与基因组百科全书（KEGG）、GeneCards、OMIM和DrugBank基因库获取线粒体自噬和缺血性心脏病交集靶点,通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选出可作用于靶点的化合物和中药,运用Cytoscape软件建立靶点-化合物-中药网络,建立调控线粒体自噬防治缺血性心脏病的潜在中药数据库;同时结合中国知网和万方数据库建立调控线粒体自噬治疗缺血性心脏病的临床常用中药数据库。确定潜在和常用高频药物的性味归经和类别,对比分析其用药规律。结果 网络药理学结果提示,表没食子儿茶素没食子酸酯、槲皮素、汉黄芩素、白藜芦醇、染料木素、丹参酮Ⅱ_A可能是中药调控线粒体自噬治疗缺血性心脏病的主要小分子物质,潜在中药有甘草、丹参、鸡血藤、黄芪、黄芩、人参等;数据挖掘结果提示,临床常用中药有丹参、黄芪、川芎、当归、红花、人参等。综合2个数据库得到的高频中药,分析得到用药靶向多集中于补气、活血调经、温经止痛、止咳平喘等,药味均以苦、甘为主,药性以寒、温居多,主要归肝、心、肺经。结论 中药调控线粒体自噬治疗缺血性心脏病的小分子物质可能为表没食子儿茶素没食子酸酯、槲皮素、汉黄芩素等,潜在药物为丹参、黄芪、人参等。     

急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的建立及评价

目的：通过比较采用腹腔注射脂多糖（LPS）、结扎冠状动脉及两者不同组合方式建立急性冠脉综合征瘀毒互结证大鼠模型的可行性。方法：将225只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、单纯结扎冠脉组、先注射LPS(5 mg·kg)组（结扎冠脉前24 h注射LPS）、后注射LPS(5 mg·kg)组（结扎冠脉后10 min注射LPS）。各组分别于造模后3、24、72 h进行各项指标的检测,对模型的建立进行综合评价。观察各组大鼠的一般状态与中医证候宏观评价指标舌象、脉象,采用心电图、超声心动图评价心功能,伊文思蓝/2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法测定心肌缺血、梗死面积,生化法或酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清肌酸激酶同工酶（CK-MB）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌钙蛋白T(cTnT)含量及白细胞介素（IL）-1β、IL-6的变化,血细胞分析仪测定白细胞数,检测凝血四项、血小板聚集率、血液流变学等凝血评价指标,苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织。结果：造模3 h后,与假手术组比较,单纯结扎冠脉组大鼠舌面R、G、B值显著下降（P<0.01）,舌下络脉色泽显著变紫（P...     

双参宁心胶囊通过调控线粒体ATP敏感性钾通道减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的:观察双参宁心胶囊通过调控线粒体三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道来减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法:成年雄性SD大鼠56只,随机分为假手术组(sham),模型组(model),双参宁心组(SSNX)给予SSNX 90 mg·kg-1,线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)通道抑制剂组(SSNX+5-HD),给予SSNX 90 mg·kg-1和5-HD 5 mg·kg-1;每组各14只。除假手术组外其余3组均阻断冠状动脉左前降支(LAD)45 min,分别于再灌注后3 h后处死,氯化2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)染色观察心肌缺血和梗死面积,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤程度。试剂盒检测血清乳酸盐脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的活性。透射电镜下观察心肌细胞线粒体及线粒体自噬超微结构变化,荧光探针法检测心肌细胞中线粒体膜电位水平的变化。结果:与sham组比较,model组心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率明显增大,心肌组织排列紊乱,疏松,个别心肌纤维断裂,心肌细胞坏死,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著升高(P0. 01),线粒体膜电位显著降低(P0. 01),透射电镜观察线粒体结构破坏明显。与model组比较,SSNX组心肌组织排列有序,少数区域细胞水肿轻度变性,心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著降低,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著降低(P0. 01),线粒体膜电位升高(P0. 01),SSNX+5-HD组心肌组织排列轻度无序,部分区域细胞水肿轻度变性,心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著降低,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著降低(P0. 01),线粒体膜电位升高(P0. 01)。而SSNX+5-HD组较SSNX组,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著升高(P0. 01),心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著增大,线粒体膜电位有所降低(P0. 05)。结论:双参宁心胶囊通过开放线粒体ATP敏感性钾通道来保护大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

补阳还五汤调控急性心肌梗死大鼠血小板自噬保护缺血心肌的作用机制研究

该研究探究补阳还五汤对急性心肌梗死后血小板活化及差异基因表达的影响。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药阿司匹林组和补阳还五汤组,预给药14 d,灌胃剂量为补阳还五汤1.6 g·kg^-1·d^-1,阿司匹林0.1 g·kg^-1·d^-1。采用冠状动脉左前降支高位结扎方法构建急性心肌梗死模型,检测指标包括心肌梗死面积、心功能、心肌组织病理、末梢血流灌注量、血小板聚集率、血小板膜糖蛋白CD62p表达、血小板转录组学及差异基因表达量。结果显示与假手术组比较,模型组射血分数和心输出量显著降低,末梢血液流量减少,血小板聚集率增加,CD62p表达增多,血小板处于活化状态。同时血清TXB₂含量上升,6-keto-PGF1α含量下降。与模型组比较,补阳还五汤增加射血分数和每搏输出量,改善足底和尾部血液循环和心肌细胞排列,减少心肌梗死面积和炎性浸润,降低血小板聚集率和CD62p表达,减少血清TXB₂含量,增加6-keto-PGF1α含量。血小板转录组测序结果发现,补阳还五...