内毒素耐受状态小鼠对大肠埃希菌敏感性及促炎细胞因子水平变化的研究

目的:研究内毒素耐受状态对大肠埃希菌的敏感性及促炎细胞因子水平的变化。方法:采用小剂量LPS(1mg/kg)连续腹腔注射5d并在第6天尾静脉注射大剂量LPS(50mg/kg)建立小鼠内毒素耐受模型。观察小鼠7d存活率或采用ELISA法检测注射大剂量LPS后6、12h血清中TNF-α、IL-6水平。然后,采用不同浓度的大肠埃希菌攻击耐受小鼠,观察小鼠7d存活率;或采用血培养方法检测血液中细菌数量,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6水平。结果:大剂量LPS攻击组(攻击组)小鼠存活率为0%,LPS耐受组(耐受组)小鼠存活率为100%;耐受组小鼠血清TNF-α、IL-6水平较攻击组显著降低(P<0.01)。5.0×108 CFU/kg大肠埃希菌可导致正常小鼠100%死亡,但是仅1.0×107 CFU/kg大肠埃希菌就可导致耐受组小鼠100%死亡;耐受组给予大肠埃希菌低、高剂量组小鼠血液中细菌数量远远高于相应的正常小鼠大肠埃希菌低或高剂量组(P<0.01),而血清中TNF-α、IL-6水平则远远低于相应的大肠埃希菌低或高剂量组(P<0.01)。结论:连续腹腔注射小剂量LPS 5d后并在第6天尾静脉注射大剂量LPS可成功建立LPS耐受模型;与正常对照组小鼠比较,较低数量的大肠埃希菌就可导致耐受组小鼠死亡,说明内毒素耐受小鼠对大肠埃希菌的敏感性较正常小鼠明显增高,其机制可能与内毒素耐受后促炎细胞因子水平降低、机体抵抗力降低有关。     

澳洲茄边碱诱导胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的机制研究

目的 探讨澳洲茄边碱（SM）对胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的影响及作用机制。方法 用SM(0,2,4,6,8μmol/L)处理细胞24 h,即溶剂对照组和SM 1组、2组、3组、4组。采用CCK-8法和克隆形成实验分别检测细胞活力和增殖能力,并计算细胞存活率和克隆形成率;采用Annexin V-FITC/PI双染色法及流式细胞术检测细胞凋亡情况,并计算细胞凋亡率;采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测凋亡相关蛋白表达水平;采用2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）和JC-1荧光探针分别检测U251细胞中活性氧水平和线粒体膜电位。结果 与溶剂对照组比较,U251细胞存活率和克隆形成率随SM浓度的增加均呈降低趋势（P <0.05）,细胞凋亡率呈升高趋势（P <0.01）;经SM处理后,细胞剪切多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶、剪切胱天蛋白酶3蛋白表达水平及细胞内活性氧水平均呈升高趋势（P <0.05）,线粒体膜电位呈降低趋势（P <0.01）。结论 SM可能通过激活线粒体介导的细胞凋亡通路,从而抑制胶质母细胞瘤U251细胞活性。     

青蒿琥酯的药代动力学以及相关药理作用研究进展

青蒿琥酯(artesunate, AS),是一种青蒿素的衍生物,作为全新结构抗疟药,具有高效、速效、低毒、不易产生耐受等特点,当前全球用于轻微到严重的疟疾感染的基础治疗。越来越多的研究报告显示AS与其活性代谢产物二氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)除抗疟以外具有多种生物活性,吸引研究者对其新药理作用的进一步研究以期老药新用。然而对于AS的药物动力学特征的全面了解,将有利于AS的新药理作用的深度开发以及临床应用。因此,该文综述了AS的吸收、分布、代谢、排泄的体内过程,以及目前临床应用AS经静脉给药、肌肉注射、口服以及直肠给药等不同给药途径后AS和活性代谢物DHA的药代动力学特征;比较了AS在健康志愿者、疟疾患者、特殊人群(儿童、妇女)等不同人群中的AS和DHA的体内过程和药代动力学参数。同时,也综述了AS和活性代谢物DHA在抗肿瘤、抗炎、抗脓毒症、抗血管生成、抗纤维化以及免疫调节等方面的药理作用新进展,旨在为进一步合理开发利用AS及其代谢产物提供一定的理论依据。     

藜芦胺对人胶质母细胞瘤细胞U251增殖的影响及机制

目的 探究藜芦胺（VTM）对人胶质母细胞瘤（GBM）细胞U251增殖的影响及其潜在机制。方法 借助网络药理学方法，筛选VTM干预GBM的铁死亡相关交集靶点，并进行基因本体、京都基因和基因组百科全书富集分析。以U251细胞为对象，采用CCK-8法、细胞克隆形成实验、细胞形态变化观察、2′，7′-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法、FerroOrange荧光探针法、Western blot实验对VTM抑制U251细胞增殖的作用及可能机制进行验证。结果 共筛选出VTM干预GBM的铁死亡相关交集靶点462个，富集于氧化应激、细胞凋亡等生物学过程，胞质囊泡、线粒体膜等细胞成分，影响二价铁离子（Fe2+）结合、DNA转录过程等分子功能，以及铁死亡、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路等。40、60、80、100、120、140μmol/L的VTM均可显著降低细胞存活率（P<0.01）;40、80、120μmol/L的VTM可使细胞萎缩、细胞核破碎，可显著抑制其克隆形成，显著提高其活性氧（ROS）、Fe2+水平，并可不同程度地上调核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶...