增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响

目的 研究乙型肝炎病毒（HBV）自身增强子I（enhancerI，ENHI）对HBV DNA疫苗免疫应答的影响。方法 采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原（HBsAg）和HBsA-ENHI基因片段，重组到载体VR1012中，构建两种HBV DNA疫苗，转染CADS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB／c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果 转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHI的HBV DNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高，两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异；免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞（CTL），两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHI可使HBV DNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加，对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB／C小鼠引起的免疫应答无明显影响。     

增强子Ⅰ对乙型肝炎病毒DNA疫苗免疫应答的影响

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)自身增强子Ⅰ(enhancerⅠ,ENHⅠ)对HBVDNA疫苗免疫应答的影响。方法采用PCR法以HBVadr亚型全基因DNA序列为模板分别扩增表面抗原(HBsAg)和HBsAg-ENHⅠ基因片段,重组到载体VR1012中,构建两种HBVDNA疫苗,转染COS-7细胞及HepG2细胞并免疫BALB/c小鼠。采用蛋白印迹、ELISA、ELISPOT等方法检测其在COS-7和HepG2细胞内的表达及小鼠的体液及细胞免疫应答效果。结果转染的HepG2和COS-7细胞均表达HBsAg;连接ENHⅠ的HBVDNA疫苗转染HepG2细胞后HBsAg表达量明显升高,两种疫苗转染COS-7细胞表达HBsAg无明显差异;免疫小鼠后第2周产生HBsAb及HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),两种疫苗免疫产生的HBsAb及HBsAg特异性CTL无明显差异。结论ENHⅠ可使HBVDNA疫苗转染HepG2细胞表达HBsAg明显增加,对转染COS-7细胞表达HBsAg及接种BALB/c小鼠引起的免疫应答无明显影响。     

大专生计算机实验课带教初探

医学大专生已具有一定的实践能力和较强的分析能力,带教大专生的计算机实验应有别于带教中专生,若再采取灌输式的传统教学方法,不仅不能调动他们的学习主动性和积极性,同时,还会束缚和窒息他们的思维能力和创造能力。因此,对大专生进行计算机的实验带教,更新教学方法已势在必行。 一、采用演示式,学导式教学方法,培     

急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒序列的研究

目的:研究急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒序列。方法:提取急性乙型肝炎患者血清中HBV DNA,扩增其表面抗原序列,测序并相互比较。结果:测定5例急性乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒均为adw亚型,其中3例同源性>99%。结论:adw亚型HBV感染后较多为急性病变,由于病毒变异少,机体有可能清除HBV。     

斑疹伤寒群立克次体groEL基因荧光定量聚合酶链反应方法的建立及临床病例检测分析

目的 基于斑疹伤寒群立克次体热休克蛋白groEL基因,建立一种敏感、特异、快速检测斑疹伤寒群立克次体荧光定量PCR技术.方法 通过GenBank分析比较斑疹伤寒群立克次体与其他立克次体成员groEL基因,选择斑疹伤寒群立克次体两个种即普氏立克次体及莫氏立克次体保守序列设计MGB探针及引物并进行方法学评估.同时用本法及普...     

水痘后并发败血症、脑膜炎、脑脓肿1例报告

患者 男,13岁,因水疱疹7d,发热2d,意识不清1d于2005年2月12日入院。患水痘后第5天发热．体温最高40C,弛张热型,伴左眼红肿、疼痛,血常规WBC16．9x109／L,N0．92。先后给予左氧氟沙星、头孢唑啉、阿齐霉素、地塞米松等治疗,体温不降。第7天出现烦躁、嗜睡．疑“肾病综合征出血热”转来我院。     

内皮型一氧化氮合酶在慢性乙型肝炎肝组织中的表达

目的研究内皮型一氧化氮合酶(endothelium-type nitric oxide synthase,eNOS)在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及其与病理改变的关系。方法应用免疫组化法观察了41例慢性乙型肝炎患者肝组织中eNOS的变化。结果 eNOS见于肝细胞,窦内皮细胞,枯否细胞,血管内皮细胞,单个核细胞,及增生的卵圆细胞,呈胞浆型,细颗粒型,粗颗粒型及胞膜型分布,以肝细胞为主,在炎症病变活动区相对集中。并发现其表达随肝组织病变活动程度增加而增强,与炎症程度的相关系数为0.5327(P<0.05),与纤维化程度无明显相关性。结论 eNOS与慢性乙肝肝组织病理改变密切相关。     

传染病医院医院感染病原菌及耐药分析

目的研究传染病医院医院感染的主要病原菌及药敏情况。方法对解放军第302医院2005年12月~2008年12月医院感染的临床资料进行回顾性分析。结果1832例医院感染革兰阴性菌为主,发生率最高为大肠埃希菌,约占所有菌株的31.8%,对多种抗菌药物耐药,其次为肺炎克雷伯菌,占12.3%;革兰阳性菌中表皮葡萄球菌占4.9%,金黄色葡萄球菌占4.0%;真菌中白色假丝酵母菌最常见,占9.9%。结论大肠埃希菌是传染病医院医院感染的主要病原菌,且对多种抗菌药物耐药。     

肝癌干细胞分离及其细胞生物学特性

背景：正常干细胞和肿瘤干细胞在基因表达和依赖的细胞信号通路上应该存在不同,如何发现能选择性杀伤肿瘤干细胞的治疗手段是一个仍然需要大量研究的课题。 目的：分离人肝癌细胞系肿瘤干细胞MHCC97,分析其细胞生物学特性。 方法：采用流式细胞技术在人高转移肝癌细胞系MHCC97中筛选肿瘤干细胞,分离正常人肝脏干细胞CD133^-CD34^- MHCC97和人肝癌细胞系肿瘤干细胞CD133⁺CD34⁺ MHCC97,分别检测其表型、生长曲线、细胞周期和多系分化能力。 结果与结论：人肝癌细胞系CD133⁺CD34⁺ MHCC97肿瘤干细胞的表型为CD133⁺CD34⁺ ,人肝癌细胞系CD133⁺CD34⁺ MHCC97具有与CD133^-CD34^- MHCC97相似的细胞曲线和生长周期,可以向上皮和内皮细胞分化,并表达相应特异性的分子标志。提示人肝癌细胞系中CD133⁺CD34⁺MHCC97细胞具有肿瘤干细胞的特性,可以向内皮和上皮细胞分化,同时具有肿瘤干细胞的生物学特性,是肿瘤复发转移的根源,也是临床治疗的靶点。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

内皮型一氧化氮合成酶及其mRNA在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及意义

目的 研究内皮型一氧化氮合成酶（Endothelial nitric nitric oxide synthase,eNOS）及其mRNA在慢性乙型肝炎（Chronic hepatitisB,CHB）肝组织中的表达及与肝组织病变的关系和临床意义。方法 采用免疫组化及核酸原位杂交等技术对48例CHB肝组织中eNOS的表达进行了观察和分析,同时研究了eNOS对CHB肝组织中转化生长因子－β受体I（Transforming growth factor-β receptorⅠ,TGF-βRⅠ)的表达的影响。结果 eNOS主要表达于肝细胞、窦内皮细胞及血管内皮细胞,以肝细胞为主。连续切片观察,eNOSmRNA的表达与其酶蛋白的表达在阳性细胞数量及分布上基本一致。随CHB肝组织炎症程度和纤维化程度的加重,eNOS表达增强（r＝0．6855,P＜0．55;r＝0．4828,P＜0．05）。随eNOS表达上调,患者PA及血清ALB下降（F=3．1401,P＜0．05;F＝9．1714,P＜0．01）。CHB肝组织内eNOS的表达与TGF－βRⅠ的表达呈明显正相关（r＝0．7781,P＜05）。结论 eNOS可能通过影响TGFβRⅠ在肝组织中的表达,参与CHB肝组织病理损伤过程。