iTRAQ串联质谱筛选尾吊小鼠感染空间诱变大肠杆菌后脾脏差异表达蛋白

目的应用同重同位素标记相对与绝对定量技术(iTRAQ),联合液相色谱串联质谱(LC-MS/MS),检测经空间诱变大肠杆菌(T1-13)感染尾吊模拟失重小鼠后,其脾脏组织中的差异蛋白,并探讨其生物学意义。方法 C57BL/6小鼠尾吊模拟失重后以空间诱变大肠杆菌灌胃建立感染模型,采用iTRAQ结合LC-MS/MS技术筛选脾脏组织差异表达蛋白,并对差异蛋白进行GO、pathway富集分析和STRING蛋白互作分析。结果共鉴定出2589个蛋白,尾吊组与对照组相比筛选出378个差异表达蛋白。尾吊染菌后与对照组相比,共筛选出452个差异表达蛋白,STRING蛋白互作网络中有286个差异蛋白间存在相互作用,这些差异蛋白经KEGG分析共得到32条存在显著性的通路,主要为氧化磷酸化通路,代谢通路、蛋白消化和吸收通路、蛋白酶体通路。结论成功筛选出了模拟失重后空间诱变大肠杆菌感染脾脏组织差异表达蛋白,这些差异蛋白可能通过调控代谢通路、不同环境下微生物代谢、颉氨酸/亮氨酸/异亮氨酸降解、溶酶体、碳代谢、吞噬体、丙酸代谢、蛋白酶体参与失重条件下免疫和炎症反应的发生。     

张会川治疗肺间质纤维化经验

介绍张会川治疗肺间质纤维化的经验。PF早期多营卫失和,肺失宣降;中期多痰瘀互结,中气不足;后期多气阴两亏,气虚血瘀;临证分为肺失宣降型,痰瘀互结型,气虚血瘀型;针对不同时期的病因病机分期辨证采用补气与化瘀并用的方法,病证结合,提高肺间质纤维化患者的生活质量,最终改善患者的肺功能,达到治疗的效果。     

改良外剥内扎楔形切除整形术加消痔灵注射术治疗环状混合痔临床研究

目的 探析消痔灵注射术加改良外剥内扎楔形切除整形术治疗环状混合痔的临床效果。方法 选取2019年1月至2020年12月在中国中医科学院广安门医院进行治疗的环状混合痔患者61例,采用随机数字表法分为观察组30例（采用消痔灵注射联合改良外剥内扎楔形切除整形术）和对照组31例（采用吻合器痔上黏膜环切术联合外剥内扎术）。比较两组术后创面愈合时间、术后静息压、术后第3天疼痛程度、术后第3天疼痛时间、术后第4天水肿、肛门坠胀和痔核残留情况。结果 两组患者创面愈合时间、术后静息压差异无显著性（P>0.05）,观察组在第3天疼痛程度、第3天疼痛时间、术后第4天水肿、肛门坠胀、痔核残留方面优于对照组,差异有显著性（P<0.05）。结论 环状混合痔患者采用消痔灵注射术加改良外剥内扎楔形切除整形术治疗临床效果确切,可缩短创面愈合时间,减少并发症的发生,具有安全、可靠的特点。     

尾吊对空间诱变肺炎克雷伯菌感染小鼠炎症反应的增强作用

目的 探索空间诱变肺炎克雷伯菌(T16-169菌)感染尾吊模拟失重小鼠后炎症反应变化.方法 尾吊小鼠模拟失重生理效应;C57BL/6小鼠随机分为对照、对照染菌、尾吊及尾吊染菌4组,采用RT-qPCR法和xMAP技术分别检测小鼠肺组织中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β 的mRNA表达量及血浆中炎症因子浓度,HE染色光镜下观察肺组织病理变化.结果 肺组织RT-qPCR及血浆炎症因子xMAP检测结果显示,与对照组相比,对照染菌及尾吊染菌组小鼠肺组织及血浆中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β 的表达均显著升高,且尾吊染菌组最为显著(P<0.01或P<0.001);肺组织病理结果显示,对照染菌组和尾吊染菌组小鼠肺组织均出现不同程度的损伤,以尾吊染菌组的损伤最为严重.结论 空间诱变肺炎克雷伯菌感染尾吊小鼠可显著升高血浆及肺组织中炎症因子表达,导致更严重的肺组织受损,提示尾吊模拟失重感染空间诱变肺炎克雷伯菌可致机体的炎症反应增强.     

回转模拟失重下RAW264.7巨噬细胞环状RNAs差异表达分析

目的探索回转模拟失重对RAW264.7巨噬细胞环状RNA(circRNA)表达谱的影响。方法RAW264.7细胞分为对照组(Con)和回转模拟失重组(Clino),Clino组以细胞回转器回转培养72h。采用Arraystar环状RNA芯片检测两组巨噬细胞circRNAs表达谱变化,筛选部分差异表达circRNAs,以qRT-PCR技术进行验证。结果与对照组相比,回转模拟失重组有60个circRNAs表达发生显著变化(差异倍数log2FC1.5或-1.5,P0.05),其中上调34个,下调26个。qRT-PCR结果显示,circR003780,circR015248,circR015947及circR011728差异表达情况与芯片结果一致,差异具有统计学意义。结论回转模拟失重可改变RAW264.7巨噬细胞内circRNAs的表达模式,差异表达circRNAs可能通过调控巨噬细胞基本生理功能参与航天飞行导致的免疫功能改变。     

模拟失重下氧化应激对EA.hy926细胞miRNA表达谱的影响及生物信息学分析

目的探索模拟失重条件下EA.hy926细胞氧化应激后microRNAs(miRNAs)表达谱的变化及生物学意义。方法 EA.hy926细胞分为对照组(Con组)、对照氧化应激组(Con+H2O2)、模拟失重组(MG组)和模拟失重后氧化应激组(MG+H2O2),采用Illumina HiSeq 2500平台开展miRNAs测序并筛选差异表达miRNAs。筛选出的miRNAs以qRT-PCR进行验证,对验证具有显著差异表达的miRNAs进行靶基因预测、靶基因Gene Ontology(GO)功能富集分析、KEGG信号通路分析以及STRING蛋白互作分析。结果模拟失重下氧化应激导致EA.hy926细胞内miRNAs表达谱发生改变。qRT-PCR结果显示,与Con+H2O2组相比,MG+H2O2组细胞内hsa-miR-29b-3p、hsa-miR-200c-3p表达增加,与miRNA测序结果一致。GO及KEGG通路显著性富集分析结果显示,hsa-miR-29b-3p靶基因显著富集于细胞外基质等生物学过程及局部黏附信号通路,hsa-miR-200c-3p靶基因显著富集于调控细胞代谢过程等生物学过程及miRNA癌症通路等信号通路。蛋白互作分析结果表明,hsa-miR-29b-3p靶基因中COL家族蛋白处于互作关键位置,hsa-miR-200c-3p靶基因中RHOA处于互作关键位置。结论模拟失重下氧化应激可导致EA.hy926细胞miRNAs表达出现显著差异,其中hsa-miR-29b-3p和hsa-miR-200c-3p可通过对靶基因及其信号通路调节对内皮细胞功能发挥调控作用。     

模拟失重下空间诱变菌感染巨噬细胞炎症相关microRNAs的筛选及生物信息学分析

目的探索模拟失重下空间诱变大肠杆菌(T1-13)感染巨噬细胞RAW264.7后差异表达的microRNAs(miRNAs)及其意义。方法采用第二代测序技术检测模拟失重染菌组与对照组巨噬细胞miRNAs差异表达,通过生物信息学预测差异miRNAs的靶基因,并对靶基因进行GO功能富集分析、KEGG信号通路分析以及STRING蛋白互作分析。结果模拟失重染菌组与对照组间筛选出33个差异miRNAs,下调23个,上调10个。这些miRNAs互补结合的靶基因参与了MAPK通路、WNT通路、轴突导向以及TGF-β等信号通路,其中关键下调的靶基因是MAPK9,MAPK14,MAP3K7,MAP3K14,PIK3CA,PIK3CB,PIK3CD,MYC,JUN,SMAD4;关键上调的靶基因是AKT3,MAPK8,MAPK9,MAPK10,MAP2K1,PIK3CD。结论模拟失重下空间诱变大肠杆菌感染巨噬细胞后miRNAs表达出现显著差异,这些miRNAs可能通过调控MAPK,WNT以及TGF-β等通路参与失重条件下炎症反应的发生。