四君子汤调控肝癌癌旁组织NF-κB p65的O-GlcNAc糖基化修饰抑制肝细胞癌进展的机制

目的 探究四君子汤通过调控肝癌癌旁组织核因子-κB p65（NF-κB p65）的O-连接的β-N-乙酰葡糖胺（O-GlcNAc）糖基化修饰,干预肝癌发展的分子机制。方法 建立原位肝癌小鼠模型,将24只C57BL/6小鼠,随机分为4组,每组6只,分别为正常组、模型组、四君子汤低剂量组（10 g·kg^-1）、四君子汤高剂量组（25 g·kg^-1）,通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝癌癌旁组织中O-GlcNAc糖基化水平和p65的磷酸化修饰水平;免疫沉淀法（IP）检测p65的O-GlcNAc糖基化修饰水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测癌旁组织中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、血管内皮生长因子A（VEGFA）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9） mRNA表达水平;观察各组小鼠肿瘤数量,称量肝脏质量;检测各组小鼠的旷场运动情况和抓力,分析小鼠的气盛衰度。结果 与正常组小鼠肝组织比较,模型组小鼠癌旁组织中O-GlcNAc糖基化水平显著下降（P<0.01）;p65的O-GlcNAc糖基化修饰水平显著下降（P<0.01）;p65的磷酸化水平显著升高（P<0.01）;IL-6、TNF-α、TGF-β₁、VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA水平显著升高（P<0.01）;肝脏质量显著升高（P<0.01）;小鼠抓力、旷场水平跨格数和垂直站立次数显著下降（P<0.01）,气盛衰度显著下降（P<0.01）。与模型组小鼠比较,四君子汤低剂量组和四君子汤高剂量组小鼠癌旁组织中O-GlcNAc糖基化水平明显升高（P<0.05, P<0.01）;p65的O-GlcNAc糖基化修饰水平明显上调（P<0.05,P<0.01）;p65的磷酸化水平显著下降（P<0.01）;四君子汤低剂量组IL-6、TGF-β₁、VEGFA mRNA水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;四君子汤高剂量组中IL-6、TNF-α、TGF-β₁、VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA水平显著降低（P<0.01）,直径>3 mm肿瘤数量显著减少（P<0.01）,小鼠肝脏质量明显降低（P<0.05）,小鼠抓力、旷场水平跨格数和垂直站立次数明显升高（P<0.05,P<0.01）,气盛衰度显著升高（P<0.01）。结论 四君子汤可以抑制小鼠原位肝癌的进展,该作用可能是通过增加肝癌癌旁组织中O-GlcNAc糖基化水平,增加癌旁组织中p65的O-GlcNAc糖基化修饰,抑制p65的磷酸化修饰,最终抑制下游IL-6、TNF-α、TGF-β₁、VEGFA、MMP-2、MMP-9的表达而实现。     

科研案例中德育素材融合至“实验中医学”教学的实践与评价

目的　评价科研案例隐含的德育素材融合至“实验中医学”教学的效果。方法　挖掘以往“实验中医学”教学中科研案例隐含的德育素材,并将其巧妙融入课程专业知识的教学中。设计调查问卷,从“通过案例讲解引申出其中潜在的人文精神的形式可好,是否有助于提高对科学探索的兴趣,对今后的学习、生活和工作态度是否有所触动”“科学家的感人事迹触动学生的10项具体内容及认可度”等方面对教学效果进行评价。结果　肯定授课形式,且认为此形式有助于提高科学探索兴趣的学生均占到95.8%,认为所融入的人文精神对今后学习、生活和工作有所触动的学生占87.5%;对科学家感人事迹触动学生的10项内容持肯定态度的学生占77.1%~89.6%,其中肯定比例最低和最高的分别为“甘于寂寞、默默耕耘、无私奉献的精神”和“尊重他人及其科研成果,同时又具有挑战科研权威的勇气”。结论　将科研案例隐含的德育素材融入“实验中医学”教学的形式和效果均较好,基本达到了教学目标,但仍有提升的空间。     

扶正化瘀方对骨髓移植肝纤维化小鼠骨髓细胞肝脏迁移的影响

目的: 探讨扶正化瘀方(FZHY)对肝纤维化小鼠骨髓细胞肝脏归巢的作用。 方法: BABL/C雌性受鼠性别交叉法骨髓移植模型基础上,四氯化碳(CCl₄)诱导肝纤维化模型;成模后,治疗组以FZHY方4.6 g ·kg^-1 ·d^-1 ig 4周。 PCR,病理及肝功能检测成模情况;通过FISH法标记Y染色体,观察雌性受鼠肝脏内骨髓源性细胞含量;Western blot法检测雌性受鼠肝组织基质细胞衍生因子-1(SDF-1)蛋白相对表达量。 结果: 与模型组比较,FZHY组小鼠,肝组织损伤明显减轻。FISH法标记Y染色体观察显示,FZHY组小鼠较模型组肝内骨髓源性细胞减少(P<0.05)。Western blot结果,FZHY组小鼠较模型组肝脏SDF-1蛋白相对表达量明显减少(P<0.01)。 结论: 在肝脏损伤时,FZHY可能通过抑制肝内SDF-1蛋白的表达来阻止骨髓源性细胞迁移入肝,从而一定程度上抑制骨髓源性细胞入肝后促进肝纤维化。     

以科研案例为引导的《实验中医学》教学改革实践与思考

实验中医学作为中医学新兴发展的一门学科,其教、学、研工作对培养中医药创新型人才起着重要作用。随着国家中医药事业快速发展及其新的定位要求,结合当前大学生认知特点,研究者对《实验中医学》教材进行了修订与再版,其中突出特色是采用科研案例引导相关知识点,并应用至上海中医药大学2013级"5+3"培养模式下的本科生授课中。课后问卷调查显示,学生认为以科研案例为引导的教学,既有助于培养自身采用当代实验方法研究和发展中医药的素质与能力,又可普及当代中医药研究的重大成果,还有利于增强自身对中医药现代化研究的责任感。研究者建议在普通高等中医药院校推广开设《实验中医学》课程。     

以科研案例为引导的《实验中医学》教学改革与实践

实验中医学作为中医学新兴发展的一门学科，对培养中医药创新型人才发挥重要的作用。近年来，随着国家中医药的快速发展及其新的定位要求，结合当前大学生新的认知特点，我们对《实验中医学》教材进行了修订与再版，突出特色是采用科研案例引导相关知识点，并在我校2013级“5+3”八年制本科生中授课。经问卷调查，学生反馈以科研案例为引导的教学既有助于培养学生采用当代实验方法研究和发展中医药的素质和能力，又普及当代中医药研究的重大成果，有助于增强大学生对中医药现代化研究的责任感。建议在普通高等中医药院校开设《实验中医学》课程。     

任务驱动教学法在大学生“科创中阶训练”课程中的应用

在上海新型冠状病毒肺炎严重时期，我校全部课程转为在线授课。据此，我们在中医学九年制屠呦呦班大二学生中尝试采用任务驱动教学法开展“科创中阶训练”课程的在线教学，即教师提出问题(任务)——学生完成任务——师生交流讨论——教师总结的教学形式，取得了较好的效果。调查问卷显示，86.67%的学生认可这种教学形式，66.67%的学生觉得教学内容和进度安排合理；几乎所有的学生认为该课程对激发科研兴趣、形成科研思维、提升科研相关能力、形成创新和开拓精神、促进团队协作等方面具有较大帮助。针对部分学生反映课程安排比较紧、自主探索学习时间偏长的问题，后期将进行相应的优化和改进。     

中医学综合实验课PBL/案例教学的调查报告

为评估中医学综合实验课程中PBL/案例教学法教学内容改革的成果,在课程结束后,向学生发放调查问卷,了解他们对教学质量的评价情况。结果表明,在收回的23份问卷中,100%的学生认为PBL/案例教学有助于提高批判性阅读的能力,培养对知识融会贯通的能力,培养提出问题、归纳问题、解决问题的能力,同时肯定了导师的引导作用,并对成绩考核方法予以认可;96%的学生认为有助于提高对知识融会贯通的能力及主动获取知识的能力;91%的学生认为有助于激发好奇心、调动主观能动性、培养创新和实验设计能力、培养团队学习的能力,但不认可PBL/案例教学形式,并认为教学条件尚不能很好满足教学的要求;表示喜欢本课程PBL/案例教学内容的学生占总人数87%;83%的学生表示提高了他们对中医药实验研发重要性的认识。