米非司酮对胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响及其机制

目的：考察米非司酮对单用或合并使用胰岛素和地塞米松诱导的胰岛素抵抗人脐静脉内皮细胞功能的影响,并初步探讨其作用机制。方法：1）将常规培养的人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,胰岛素（5×10^-6、5×10^-1和5×10^-8mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5和3×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6和1．5×10^-7mol·L^1）组。培养24或48h后,测定各组细胞葡萄糖消耗量,以考察人脐静脉内皮细胞胰岛素抵抗的形成情况,并通过胰岛素刺激和模型持续时间研究进一步验证造模效果。2）将人脐静脉内皮细胞随机分为正常对照组,米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6、1×10～×10^-7mol·L^1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-5mol·L^1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^1）组,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^1）组。分别加入不同浓度的药物培养24或48h,然后对各组细胞葡萄糖消耗量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位进行测定,以考察细胞功能状态变化。结果：1）胰岛素（5×10^-7mol·L^-1）作用24h可诱导人脐静脉内皮细胞发生胰岛素抵抗并可维持24h,地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）作用48h可诱导细胞的胰岛索抵抗并可维持36h,胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6molL^-1）共同作用48h可诱导细胞的胰岛素抵抗并可维持24h。2）地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组,以及胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5和1×10^-6mol·L^-1）组人脐静脉内皮细胞的葡萄糖摄取量、一氧化氮含量、一氧化氮合酶活性和抗超氧阴离子自由基活力单位分别显著高于地塞米松（3×10^-5mol·L^-1）组和胰岛素（2．5×10^-8mol·L^-1）＋地塞米松（1．5×10^-6mol·L^-1）组;胰岛素（5×10^-5mol·L^-1）＋米非司酮（1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol·L^-1）组细胞的上述指标则与胰岛素（5××10^-7mol·L^-1）组无显著性差异。结论：胰岛素、地塞米松单独使用及合用均可诱导人脐静脉内皮细胞出现胰岛素抵抗并持续一定时间;米非司酮可改善地塞米松及地塞米松＋胰岛素诱导的胰岛素抵抗内皮细胞的功能紊乱,而对胰岛素诱导的胰岛素抵抗无改善作用。     

甲状腺激素和肝脏胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素抵抗是指胰岛素的外周靶组织和细胞对内源性或外源性胰岛素的敏感性和反应性降低,导致生理剂量的胰岛素产生低于正常的生理效应,临床表现为高胰岛素血症、高血糖、高血压、高血脂等代谢紊乱。正常甲状腺功能状态是维持正常糖脂代谢和人体胰岛素敏感性的一个重要因素,甲状腺激素水平的改变对肝脏胰岛素抵抗形成有重要作用。本文就目前关于甲状腺激素与肝脏胰岛素抵抗的关系进行综述,以期为后续的研究进展提供较为系统的文献基础。     

大鼠2型糖尿病模型的肾损伤及其代谢组学研究

摘要：目的:使用高脂饮食联合链脲佐菌素（STZ）诱导建立大鼠2型糖尿病模型,应用病理学、生物化学、代谢组学等方法确认模型结果,探索2型糖尿病肾损伤的发病机制,研究肾损伤早期进程并探索可能的特异性生物标记物。方法:SD大鼠随机分成正常饮食组和高脂饮食组建模,实验结束后根据肾脏的组织病理学程度分组比较各类代谢相关指标。将血浆样品前处理后使用高效液相-四极杆飞行时间质谱（HPLC-QTOF/MS）检测内源性代谢产物,采用主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）等模型筛选潜在的生物标记物,并通过MetaboAnalyst 4.0对关键的代谢产物进行代谢通路分析。结果:根据肾小管空泡样变程度将肾小管病变分级后,病变程度与血糖、三酰甘油、尿素和肝胆固醇呈正相关,而与血总蛋白和肝三酰甘油大体为负相关。代谢组学结果表明,与病变程度强相关的代谢产物包括色氨酸、亚油酸、溶血性磷脂酰乙醇胺（LysoPE）、磷脂酰胆碱（PC）等。其中亚油酸作为诊断轻度病变及重度病变指标的灵敏度及特异性最理想,而LysoPE（0∶0/18∶0）、色氨酸、代谢物188.069 5和PC（O-16∶0/0∶0）次之。结论:LysoPE （0∶0/18∶0）及亚油酸在模型整个阶段并在轻度及重度病变组间存在明显的差异,可能是大鼠2型糖尿病模型早期诊断及其肾损伤病变程度的生物标记物。亚油酸代谢可能是最为关键的一条代谢通路,值得后续深入研究。     

黄芩素对大鼠心肌缺血和乳鼠心肌细胞损伤的影响(英文)

目的:研究黄芩素对冠脉结扎引起的大鼠心肌缺血损伤及H2O2诱导的乳鼠心肌细胞氧化损伤或Na2S2O4诱导的缺氧/复氧损伤的影响和相关机制。方法:连续灌胃给予大鼠黄芩素7d,最后一次给药后进行冠脉结扎手术,记录结扎前后的心电图,6h后处死大鼠,TTC染色法评估心肌梗死比重,并测定血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量。体外实验中乳鼠心肌细胞与黄芩素共培养3d后用H2O2诱导氧化损伤或用Na2S2O4诱导的缺氧/复氧损伤,MTT法测定细胞活力并测定培养液上清LDH活性。结果:与假手术组相比,冠脉结扎后大鼠心肌梗死率、血清CK、LDH活性和MDA含量明显增加,SOD活性则显著下降;H2O2及缺氧/复氧可造成心肌细胞活力的下降和LDH的释放。与模型组相比,黄芩素的预治疗能有效地抑制缺血引起的大鼠J点抬高,显著降低心肌梗死率,减少血清中CK、LDH活性及MDA含量,但剂量依赖性地降低血清SOD活性。黄芩素的预适应亦可明显地抑制H2O2诱导的心肌细胞活力下降和LDH释放;而对于缺氧/复氧损伤,缺氧时黄芩素的存在与否可影响其心肌保护作用。结论:黄芩素对体内缺血或...     

米非司酮对胰岛素抵抗的HepG2细胞的作用及其机制

以糖消耗量为评价指标,筛选由不同浓度的胰岛素(Ins 0,1,0.1,0.01 μmol/L)与地塞米松单用或合用24 h诱导的HepG₂细胞最佳胰岛素抵抗模型,考察该抵抗模型持续时间,并探讨糖皮质激素受体拮抗剂米非司酮对胰岛素抵抗细胞的作用及机制。建立最佳抵抗模型后给予米非司酮或比格列酮作用24 h,测定细胞的糖消耗量、胞内葡萄糖、糖原、ATP及游离脂肪酸含量,半定量RT-PCR法测定胰岛素受体(InsR)-mRNA和糖皮质激素受体(GR)-mRNA的表达。结果显示胰岛素（0.1 μmol/L）和地塞米松（0.3 μmol/L）合用24 h组为最佳胰岛素抵抗模型组,且其抵抗状态至少可以持续36 h;模型组细胞糖消耗量、胞内糖、糖原、ATP含量以及InsR-mRNA表达显著低于正常细胞,而 FFA浓度与GR-mRNA表达明显增高;0.2 mmol/L的比格列酮与200 μmol/L及20 μmol/L的米非司酮可明显改善胰岛素抵抗细胞,而2 μmol/L的米非司酮对胰岛素抵抗细胞无影响。结果表明：米非司酮通过调节糖脂代谢及胰岛素受体和糖皮质激素受体表达水平而改善胰岛素抵抗。     

饮食模式对大鼠糖尿病早期肾脏病变的影响及其机制

目的：使用不同饮食模式联合链脲佐菌素（STZ）诱导建立大鼠糖尿病模型，确认模型结果并探索饮食模式对大鼠糖尿病早期肾脏病变的影响及其可能的机制。方法：将147只SD大鼠分别以正常饮食（维持饲料且自由摄食，n=25）、控制饮食（维持饲料但减量20%,n=25）和高脂饮食（高脂饲料且自由摄食，n=97）分组喂养后注射低剂量STZ，以空腹血糖是否达到糖尿病造模标准再分为未成模大鼠和成模大鼠，追踪动物的摄食、饮水和体重，通过组织病理学分析各组大鼠肾脏病变，采集各阶段的血浆样品并检测内源性代谢产物进而开展代谢组学分析。结果：不同饮食模式联合低剂量STZ可不同程度诱发大鼠糖尿病早期肾脏病变，主要表现为肾小管空泡变性，累及部分近曲小管和远曲小管。高脂饮食组的糖尿病成模率（89.2%）和肾脏病变率均最高（造模前期7/10，造模后期57/59），控制饮食组肾脏病变率最低（造模前期0/12，造模后期3/13）。相比正常饮食组，控制饮食组能量代谢和糖异生作用有关的代谢产物[如L-肉毒碱，不饱和脂肪酸二十四碳四烯酸（24:4n-6），氨基酸及其衍生物L-胱硫醚、4-氯-L-苏氨酸、L-酪氨酸等]有显著差异（P&...