红花注射液疑似致敏蛋白的初步研究

目的:研究红花注射液致敏反应相关蛋白。方法:收集有/无致敏性红花注射液各3批,经离子交换树脂梯度洗脱富集其中的总蛋白,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法分离蛋白并初步分析其差异。结果:40 k D和26 k D处,有致敏性红花注射液各有1个颜色较深、轮廓清晰的蛋白条带;10~17 k D处,无致敏性红花注射液有1个颜色较深、轮廓清晰的蛋白条带。结论:40 k D和26 k D处的蛋白可能是红花注射液致敏的原因之一,而17 k D处的蛋白可能不会引起过敏反应。致敏蛋白的分子结构及含量限度等仍需进一步研究。     

基于超高效液相质谱联用和多重质量亏损过滤技术研究儿茶素的体外代谢产物

目的：采用超高效液相质谱联用和多重质量亏损过滤技术（MMDF）研究儿茶素在大鼠肝微粒体中的代谢产物。方法：体外培育大鼠肝微粒体代谢模型,采用UPLC-LTQ-Orbitrap和MMDF鉴定儿茶素的体外代谢产物。结果：通过高分辨质谱数据,保留时间和碎片离子,在肝微粒体中共鉴定7个新的代谢产物,主要为羟基化和葡萄糖结合物。并首次推测了儿茶素在肝微粒体中的代谢途径。结论：采用UPLC-LTQ-Orbitrap和质量亏损过滤技术快速,准确,灵敏的鉴定了儿茶素在体外的代谢产物研究,丰富了儿茶素的代谢产物种类,为儿茶素的新药研发,提供理论基础。     

还阳参醇提物止咳祛痰平喘及抗炎作用的实验研究

目的 探讨还阳参醇提物对实验动物的止咳、祛痰、平喘及抗炎作用。方法 分别采用氨水引咳法、气管酚红排泄法、组织胺致喘息法观察还阳参醇提物的止咳、祛痰、平喘作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀和蛋清致大鼠足趾肿胀法观察还阳参醇提物抗急性炎症的作用;气管内注入脂多糖法建立大鼠慢性支气管炎模型,观察受试物对模型大鼠肺组织的病理学改变。结果 还阳参醇提物能显著减少小鼠的咳嗽次数、增加小鼠气道酚红排泄量、延长组织胺所致豚鼠喘息的潜伏期、可减轻蛋清所致的大鼠足趾肿胀度,与对照组比较差异具有显著性（P＜0.05或0.01）;还阳参醇提物能减轻慢性支气管炎大鼠黏膜上皮细胞的坏死和脱落,抑制黏膜层和黏膜下层炎性细胞浸润。结论 还阳参醇提物有明确的止咳、祛痰、平喘及抗炎作用,对慢性支气管炎大鼠模型的支气管黏膜有保护作用。     

还阳参药材最佳采收期研究

目的 确定还阳参药材的最佳采收月份.方法 从绿原酸含量,多糖含量以及浸出物含量等方面比较不同时间采集的还阳参药材的差异.结果 不同采收期绿原酸含量、多糖含量、浸出物含量存在差异.结论 确定6月份为还阳参药材的最佳采收季节.     

HPLC法测定还阳参药材中绿原酸

目的 建立高效液相色谱法测定还阳参药材中绿原酸的方法。方法 采用Sino Chrom DDS-BP色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液（13∶87）,体积流量1.0 mL/min,检测波长327 nm,柱温25 ℃。结果 绿原酸进样量在0.046～0.644 μg与峰面积呈良好的线性关系（r＝1）,样品平均加样回收率为101.9%,RSD值为1.22%（n＝6）;检出限和定量限分别为0.01 ng和0.04 ng。结论 此方法简便、准确、重复性好,可用于还阳参药材的质量控制。     

通关藤总皂苷提取工艺及抗肿瘤活性研究

目的:优化通关藤总皂苷的提取纯化工艺,测定通关藤总皂苷的抗肿瘤活性。方法:采用正交试验,以总皂苷收率作为指标优化通关藤总皂苷的最佳提取工艺;采用动态吸附实验,分别考察了5种不同型号的大孔树脂(D101,AB-8,ZTC-1,NKA-9,D3520)对通关藤总皂苷的吸附和解吸性能,并以吸附量、洗脱量为考察指标,对通关藤总皂苷的纯化工艺进行了筛选,以通关藤苷A为对照,采用紫外分光光度法测定通关藤总皂苷的含量;采用MTT法检测通关藤总皂苷的抗肿瘤活性。结果:通关藤总皂苷的最佳提取工艺为:加入10倍量70%乙醇,加热回流提取3次,每次2 h。ZTC-1具有最佳吸附与解析参数,最佳纯化工艺为:取通关藤粗提取物,加相当于生药量15倍的蒸馏水溶解,离心,取上清液,通过ZTC-1树脂柱,依次用水、50%乙醇洗脱至无色,弃去,再用70%乙醇洗脱1.5 BV,收集洗脱液,减压浓缩至无醇味,冷冻干燥,即得通关藤总皂苷。通关藤总皂苷对人肝癌细胞Hepg2具有抑制作用,高浓度组与空白对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)。当提取物浓度大于0.312 mg/mL时,人肝癌细胞Hepg2的增殖即受到抑制,且随着药物剂量的增大其差异更为显著。结论:所得提取纯化工艺简单可行,具有很好的应用前景,为通关藤总皂苷的深度开发提供依据。     

还阳参醇提物止咳祛痰平喘及抗炎作用的实验研究

目的探讨还阳参醇提物对实验动物的止咳、祛痰、平喘及抗炎作用。方法分别采用氨水引咳法、气管酚红排泄法、组织胺致喘息法观察还阳参醇提物的止咳、祛痰、平喘作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀和蛋清致大鼠足趾肿胀法观察还阳参醇提物抗急性炎症的作用;气管内注入脂多糖法建立大鼠慢性支气管炎模型,观察受试物对模型大鼠肺组织的病理学改变。结果还阳参醇提物能显著减少小鼠的咳嗽次数、增加小鼠气道酚红排泄量、延长组织胺所致豚鼠喘息的潜伏期、可减轻蛋清所致的大鼠足趾肿胀度,与对照组比较差异具有显著性（P〈0.05或0.01）;还阳参醇提物能减轻慢性支气管炎大鼠黏膜上皮细胞的坏死和脱落,抑制黏膜层和黏膜下层炎性细胞浸润。结论还阳参醇提物有明确的止咳、祛痰、平喘及抗炎作用,对慢性支气管炎大鼠模型的支气管黏膜有保护作用。     

还阳参醇提物止咳祛痰平喘及抗炎作用的实验研究

目的 探讨还阳参醇提物对实验动物的止咳、祛痰、平喘及抗炎作用。方法 分别采用氨水引咳法、气管酚红排泄法、组织胺致喘息法观察还阳参醇提物的止咳、祛痰、平喘作用;采用二甲苯致小鼠耳肿胀和蛋清致大鼠足趾肿胀法观察还阳参醇提物抗急性炎症的作用;气管内注入脂多糖法建立大鼠慢性支气管炎模型,观察受试物对模型大鼠肺组织的病理学改变。结果 还阳参醇提物能显著减少小鼠的咳嗽次数、增加小鼠气道酚红排泄量、延长组织胺所致豚鼠喘息的潜伏期、可减轻蛋清所致的大鼠足趾肿胀度,与对照组比较差异具有显著性（P＜0.05或0.01）;还阳参醇提物能减轻慢性支气管炎大鼠黏膜上皮细胞的坏死和脱落,抑制黏膜层和黏膜下层炎性细胞浸润。结论 还阳参醇提物有明确的止咳、祛痰、平喘及抗炎作用,对慢性支气管炎大鼠模型的支气管黏膜有保护作用。     

Plackett-Burman试验联合响应面试验优选XDA-7型大孔树脂纯化白子菜总多糖的工艺条件

目的:优选XDA-7型大孔吸附树脂纯化白子菜总多糖的条件,为该有效部分的充分利用提供参考。方法:采用Plackett-Burman试验筛选影响总多糖纯化工艺的显著性因素,以总多糖保留率及蛋白质去除率为因变量,上样量、流速、洗脱体积、径高比、上样液质量浓度及p H为自变量,通过响应面试验优选白子菜总多糖的纯化条件。结果:上样量、流速和洗脱体积为影响总多糖纯化效果的显著性因素,在上样量0.93 g·g-1(生药材-树脂),流速1.36 m L·min-1,洗脱剂用量4.3 BV的条件下,白子菜总多糖保留率93.08%,蛋白质去除率49.13%。二者与预测值的相对误差分别为3.49%,2.09%。结论:XDA-7型大孔吸附树脂能较好地保留总多糖、去除蛋白质,适用于白子菜总多糖的纯化处理。     

HPLC法测定还阳参药材中绿原酸

目的建立高效液相色谱法测定还阳参药材中绿原酸的方法。方法采用Sino Chrom DDS-BP色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液(13:87),体积流量1.0mL/min,检测波长327nm,柱温25℃。结果绿原酸进样量在0.046～0.644μg与峰面积呈良好的线性关系(r=1),样品平均加样回收率为101.9%,RSD值为1.22%(n=6);检出限和定量限分别为0.01ng和0.04ng。结论此方法简便、准确、重复性好,可用于还阳参药材的质量控制。