穿山甲属动物的DNA条形码及在穿山甲商品鉴定中的应用

目的:完善基于COI序列的DNA条形码鉴定法,用于穿山甲属动物及其商品药材的分子鉴定。方法:从穿山甲属动物及穿山甲常见混伪品原动物的鳞甲、肌肉组织或蹄甲中提取DNA,扩增COI序列并双向测序,对序列进行K2P遗传距离分析、Barcoding gap检验、单倍型分析、系统发育树的聚类分析、条形码间隙自动检索法(ABGD)(Automatic barcode gap discovery)划分。用建立的DNA条形码方法对收集的35份穿山甲商品进行鉴定。结果:COI序列扩增成功,对齐后序列长度为600 bp。遗传距离分析显示,种间差异大于种内差异,物种间具有一定遗传间隔;系统发育树的聚类分析和ABGD划分能够有效鉴别穿山甲及其混伪品。对35份甲片商品进行了准确鉴定;发现近来出现较多的印度穿山甲甲片,对其进行性状描述。结论:基于COI序列的DNA条形码是鉴定穿山甲的有效手段。