LAIR-1/LAIR-2(CD305/CD306)与配体结合亲和力的比较

目的:LAIR-1/LAIR-2(CD305/306)与配体结合亲和力的比较。方法:应用不同浓度混合的LAIR-1和LAIR-2融合蛋白,同时或先后与配体表达细胞孵育后,用特异性LAIR-1或LAIR-2单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析,比较LAIR-1和LAIR-2融合蛋白与细胞结合的百分率的变化及相互竞争情况。结果:LAIR-1和LAIR-2膜型配体的分布较广泛,人和小鼠LAIR受体与配体的结合具有相互交叉的特点。LAIR-2能够明显阻断LAIR-1与其膜型配体的结合,而LAIR-1对LAIR-2与其配体的结合无影响。结论:LAIR-1和LAIR-2可能结合相同的膜型配体,但LAIR-2结合配体的亲和力明显高于LAIR-1结合的亲和力。此结果为深入探讨LAIR家族免疫调节的分子机制提供重要的实验依据。     

泛素水解酶22调控丝裂原活化蛋白激酶激酶6基因的转录活性

目的：克隆丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase 6,MKK6)基因启动子,研究泛 素水解酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)对MKK6转录活性的调控作用。方法：采用PCR扩增MKK6基因启动 子片段,并以该片段为模板对USP22结合位点进行定点突变,将野生型与突变型启动子片段定向插入荧光素酶表达 载体pGL3-Basic;用重组载体与内参质粒pRL-TK共转染HeLa细胞,行双荧光素酶活性检测以确定其转录活性;利用 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验观察USP22蛋白与MKK6启动子是否存在直接的结合;下 调USP22表达后,检测MKK6转录活性的变化。结果：成功扩增MKK6启动子及其突变体并构建荧光素酶表达载体; USP22结合位点的突变导致该启动子活性在HeLa细胞中明显降低(P<0.05);USP22与MKK6启动子在细胞中存在直接结 合;抑制USP22的表达导致MKK6转录水平明显下降(P<0.05)。结论：在HeLa细胞中,USP22有效地调控MKK6基因的 转录。     

小肠恶性间质瘤误诊为阑尾周围脓肿

1病例资料女,58岁。以右下腹疼痛不适半个月加重1天,伴恶心、呕吐数次入院。门诊B超检查示:阑尾区有一10 cm×12 cm低回声区,边界清,密度不均,诊断为阑尾周围脓肿。查体:体温38·7℃。右下腹麦氏点局部膨隆,可触及14 cm×12 cm的包块,界清,表面光滑,质韧,触压痛( )。血白细胞18·0×109/L,中性粒细胞0·856,淋巴细胞0·144,血红蛋白133 g/L。行手术探查,术中见右下腹有一12 cm×14 cm×16 cm大小包块,仔细探查为小肠肿瘤,距十二指肠悬韧带50 cm,见包块表面光滑,局部有破溃感染、化脓,附近肠系膜淋巴结大,2·0 cm×2·5 cm×4·0 cm大小,阑…     

管花肉苁蓉HPLC指纹图谱研究

目的:建立管花肉苁蓉的HPLC指纹图谱检测方法。方法:以松果菊苷和毛蕊花糖苷为对照,采用梯度洗脱HPLC法。色谱条件如T:GeminiC18柱(250×5mm,5.0um);流动相:甲醇:乙腈:0.4%磷酸水溶液梯度洗脱;检测波长334nm。结果:10个不同产地的管花肉苁蓉指纹图谱共标示出21个共有峰。结论:本方法的精密度、稳定性、重现性较好,可作为管花肉苁蓉鉴别、质量控制方法。     

四神丸对结肠炎诱发的小鼠结肠癌CD133蛋白表达的影响

目的观察四神丸对结肠炎性痛变后诱发结肠癌的化学预防作用和对CD133蛋白表达的影响。方法80只ICR小鼠,随机分为正常对照组、模型组、四神丸低剂量给药组和四神丸高剂量给药组四组。以40m／kg1,2-二甲肼（DMH）腹腔注射、20g/L右旋葡聚糖苷钠（Ⅸ固饮用水诱导小鼠结肠癌。低剂量给药组和高剂量给药组分别给予0．2ml四神丸浸膏剂（生药浓度分别为2g／ml、4g／m1）,共21周后,观察各组成瘤率和肿瘤数目,并通过免疫组化检测结肠组织CD133蛋白表达。结果与模型组相比,高、低剂量四神丸组可以明显降低成瘤率和肿瘤数量。高、低剂量四神丸组CD133蛋白表达量小于模型组,并有显著统计学意义（P〈O．01）,但高、低剂量组之间区别没有统计学意义。结论四神丸对小鼠结肠诱发的结肠癌有抑制作用;其原因可能与降低CD133蛋白表达,进而影响细胞分化有关。     

胚胎移植日血清雌激素下降幅度与IVF-ET妊娠结局的关系

目的 探讨胚胎移植日血清雌激素下降幅度与体外受精-胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的关系.方法 回顾性分析234例因输卵管因素不孕接受控制性超排卵的IVF-ET新鲜周期,于注射人绒毛膜促性腺激素（HCG）日和胚胎移植（ET）日分别测定血清雌激素（E2）水平,根据ET日E2水平下降幅度分为A、B、C、D、E、F组：A组,E2下降幅度＜30%;B组,E2下降幅度30%~40%;C组E2下降幅度40%~50%;D组E2下降幅度50%~60%,E组E2下降幅度60%~70%,F组E2下降幅度≥70%,比较各组间临床妊娠率和胚胎移植率差异.结果 ET日E2水平呈不同程度的下降,当下降幅度≥40%时,临床妊娠率及胚胎种植率均明显降低,差异具有显著性（P＜0.05）.结论 在IVF新鲜周期中,ET日血清E2下降幅度可预测妊娠结局,推测雌激素水平迅速下降可能损害子宫内膜的容受性并影响妊娠率,黄体期适当补充雌激素可能有利于妊娠结局.     

叶酸封端的聚（碳酸酯-co-乙二醇)嵌段

在不添加催化剂的情况下,通过聚乙二醇单甲醚（mPEG）引发5,5-二甲基-1,3-二噁烷-2-酮（DTC）本体开环聚合,得到了生物可降解脂肪族聚（碳酸酯-co-乙二醇）（DMP）两亲性嵌段共聚物。将其与叶酸（FA）反应,合成了末端含有叶酸的生物可降解两亲性嵌段共聚物（FA-DMP）。所得聚合物结构经傅里叶变换红外光谱（FT-IR）、核磁共振谱（1H-NMR）、紫外光谱（UV-Vis）、凝胶渗透色谱（GPC）表征。利用聚合物FA-DMP的两亲性结构特点,采用透析法制备了其聚合物胶束。结果表明,在不添加任何催化剂的情况下,利用mPEG的端羟基可成功引发DTC开环聚合,且通过改变投料比可调控DMP嵌段共聚物的分子量;FA DMP聚合物可形成具有一定纳米尺寸的胶束,且其粒径与聚合物的亲水-疏水链链长有关。     

多黏菌素B抗炎作用机制的研究

目的观察多黏菌素B(PMB)和内毒素(LPS)共同处理大鼠肺泡巨噬细胞(PAM)后对核因子-κB(NF-κB)信号通路的变化。方法分离、培养大鼠PAM,分为正常对照组、LPS刺激组及PMB干预组。采用原位杂交(ISN)技术、凝胶电泳迁移率改变(EMSA)及ELISA法,检测刺激后0、15、30、60、120和240min各时相点PAM中IKK-βmRNA及IκB-α的表达、NF-κB的活性和TNF-α的含量。结果LPS刺激组IKK-βmRNA的水平在刺激后15min出现升高,30min达高峰,60min后逐渐下降;IκB-α的水平的变化趋势在各时相点与IKK-βmRNA刚好相反;NF-κB活性的峰值相出现在60min,15min出现升高,120min后逐渐下降;TNF-α的含量峰值相出现在60min,30min出现升高,120~240min后恢复至刺激前水平。PMB干预组NF-κB的活性与TNF-α的含量虽较刺激前和正常对照组升高,但均显著低于LPS刺激组(P<0.01)。IκB-α水平的最低值显著高于LPS刺激组(P<0.01);而IKK-βmRNA的峰值则显著低于LPS刺激组(P<0.01)。结论LPS能诱导PAM中的IKK-β激活、IκB-α降解和NF-κB活化,并促进TNF-α释放。而PMB则能抑制LPS诱导的IKK-β激活、IκB-α降解、NF-κB活化和TNF-α释放。     

金口宝对兔口腔溃疡模型的影响

目的 探讨金口宝对兔口腔溃疡的治疗效果及其作用机制.方法 在60只实验用SPF级新西兰大白兔中随机抓取6只作为溃疡模型的鉴定,其余随机等分为3组:对照组(NC组)、生理盐水药膜组(NS组)、金口宝药膜组(JK组).用40％的冰醋酸溶液烧灼兔口腔颊膜复制口腔溃疡模型.观察在造模当天及给药的第3、5、7天兔口腔溃疡的变化情况,利用逆转录PCR检测兔口腔颊部黏膜组织中表皮生长因子(EGF)水平,使用HE染色观察兔口腔溃疡局部病理组织学变化.结果 与NS组比较,在给药的第3、5、7天JK组可以显著减小溃疡面积(P＜0.01).与NC组比较,NS组、JK组兔口腔颊部黏膜组织中EGF水平明显升高(P＜0.01),但JK组EGF水平较NS组升高快,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).在给药的第3、5、7天,兔口腔溃疡HE染色切片显示,JK组较NS组炎症细胞明显减少,成纤维细胞明显增生,上皮增生情况良好.结论 金口宝可以明显改善兔口腔溃疡症状并促进溃疡愈合,金口宝可能是通过调节口腔溃疡时EGF水平而增强口腔溃疡的修复能力.     

pCDM8-GFP报告载体的构建及鉴定

1　实验资料　ｐＤＭ 8 ＰＢＬｃＤＮＡ文库由Ｊａｃｋｓｏｎ博士惠赠 ,ｐＥＧＦＰ Ｎ3真核表达载体购自Ｃｌｏｎｔｅｃｈ公司 .ＮｏｔＩ、ＨｉｎｄⅢ和Ｔ4ＤＮＡ连接酶购自大连宝生物公司 .ＣＯＳ7细胞为本室冻存。ｐＣＤＭ8 ＧＦＰ载体的构建方法参照文献 .提取 ｐＣＤＭ8 Ｘ(Ｘ表示载体中插入的未知ｃＤＮＡ片段 )和 ｐＥＧＦＰ Ｎ3质粒 ,分别用ＮｏｔＩ和ＨｉｎｄⅢ进行双酶切 ,回收酶切片段 ,用Ｔ4连接酶进行连接 ,转化感受态宿主菌。挑单菌落培养 ,提取质粒用ＮｏｔＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切进行阳性克隆鉴定 .提取重组ｐＣＤＭ8 ＧＦＰ载…