血竭素高氯酸盐抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞中SGK1和FN的表达

目的:观察血竭素高氯酸盐(dracorhodin perchlorate,DP)对高糖环境下培养的人肾小球系膜细胞(human me-sangial cells,HMC)中血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(serum and glucocorticoid induced protein kinase1,SGK1)和纤连蛋白(fibronectin,FN)的抑制作用,探讨其防治糖尿病肾病肾脏纤维化的作用与机制。方法:将体外培养的HMC分为正常糖组(NG,5.5mmol.L-1D-葡萄糖)、正常糖+DP低剂量组(NG+LDP,5.5mmol.L-1D-葡萄糖+7.5μmol.L-1DP)、正常糖+DP高剂量组(NG+HDP,5.5mmol.L-1D-葡萄糖+15μmol.L-1DP)、高糖组(HG,25mmol.L-1D-葡萄糖)、高糖+DP低剂量组(HG+LDP,25mmol.L-1D-葡萄糖+7.5μmol.L-1DP)、高糖+DP高剂量组(HG+HDP,25mmol.L-1D-葡萄糖+15μmol.L-1DP),作用24h后,采用real-time PCR法检测各组细胞中SGK1,FN mRNA的水平,并采用间接免疫荧光和Westernblot方法检测细胞中SGK1和FN蛋白的表达。结果:在正常糖组HMC中有基础量的SGK1,FN mRNA及蛋白的表达,经7.5μmol.L-1的DP作用24h后,SGK1和FN mRNA水平及蛋白与NG组相比无明显差异,但经15μmol.L-1的DP作用24h后,SGK1和FN mRNA水平及蛋白较NG组明显下降;与NG组相比较,HG组中HMC中的SGK1,FN mRNA及蛋白水平显著性增加(P0.01);与HG组相比较,HG+LDP组和HG+HDP组中,HMC的SGK1,FN的mRNA及蛋白水平显著性下降(P0.01)。结论:血竭素高氯酸盐抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞中SGK1和FN的表达,这可能是其防治DN肾纤维化作用的部分机制。     

肾炎康对阿霉素肾病大鼠结缔组织生长因子和纤维连结蛋白表达的影响

目的观察肾炎康袋泡剂对阿霉素肾病大鼠的治疗作用,并研究其作用机制。方法随机选取10只大鼠为空白对照组,剩余大鼠采用一次性尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素肾病模型,并随机分为肾病模型组、肾炎康组、泼尼松组,每组10只,肾病模型组予以生理盐水连续灌胃给药8周,肾炎康组和泼尼松组分别予以肾炎康袋泡剂煎液和泼尼松连续灌胃给药8周。收集末次给药后24 h尿液检测尿蛋白水平;取动脉血检测肾功能指标(血清肌酐、尿素和尿酸);取肾脏组织进行病理学染色并计算肾小球硬化指数;采用免疫组织化学染色法检测肾组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和纤维连结蛋白(fibronectin,FN)蛋白表达水平;采用qPCR法检测肾组织中CTGF和FN的mRNA相对表达水平。结果肾炎康干预治疗能够显著降低阿霉素肾病大鼠的血清中肌酐、尿素、尿酸水平和尿蛋白水平(P0.05);肾炎康能够显著改善阿霉素肾病大鼠肾脏的病理结构,抑制肾纤维化水平(P0.05),并显著降低肾病大鼠肾小球硬化指数(P0.05)。此外,肾炎康能够显著抑制肾病大鼠肾脏组织中CTGF、FN蛋白和mRNA表达水平(P0.05)。对于阿霉素肾病大鼠,肾炎康整体改善效果弱于泼尼松,但治疗效果仍然明显。结论肾炎康袋泡剂对阿霉素肾病大鼠有确切的治疗和改善作用,其作用可能是通过调控CTGF和FN表达进而抑制阿霉素肾病大鼠肾纤维化来实现的。     

白花丹素抑制肾小球系膜细胞增殖及促纤维化相关因子的表达

目 的：探讨白花丹素对人肾小球系膜细胞株HMC细胞增殖及TGFβ1、CTGF、FN表达的影响。 方 法： 1 μmol/L~10 μmol/L白花丹素分别处理HMC细胞后,MTT法检测细胞增殖活性;RT-PCR和细胞免疫荧光法分别检测TGFβ1、CTGF、FN mRNA和蛋白的表达。 结 果：1 μmol/L~10 μmol/L白花丹素作用后,HMC细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制,TGFβ1、CTGF、FN mRNA和蛋白的表达下降。 结 论： 白花丹素通过降低HMC细胞TGFβ1、CTGF、FN的表达,抑制HMC细胞增殖。     

壮医药线点灸联合甲氨蝶呤对佐剂关节炎大鼠NF-κB/IκB信号通路的影响

目的:从分子生物学角度探究壮医药线点灸联合甲氨蝶呤对佐剂关节炎大鼠NF-κB/IκB信号通路的影响,为壮医药线点灸联合甲氨蝶呤治疗类风湿性关节炎(RA)提供理论依据。方法:建立佐剂关节炎大鼠模型,并分为正常对照组(NC)、关节炎模型组(RA)、甲氨蝶呤组(MTX)和壮医药线点灸联合甲氨蝶呤组(CT)。观察并评估大鼠关节炎指数; ELISA法检测各组大鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量; qPCR和Western blotting法检测滑膜组织中P65、I-k Bα、TNF-α、IL-1β和COX-2的表达。结果:与RA组相比,MTX组和CT组均能显著降低关节炎指数(P 0. 05),且CT组显著低于MTX组(P 0. 05);与RA组相比,MTX组和CT组大鼠血清中TNF-α和IL-1β含量均显著下降(P 0. 05),其中CT组下降更为显著(P 0. 05 VS MTX); MTX组和CT组大鼠关节滑膜组织中P65、TNF-α、IL-1β和COX-2的mRNA和蛋白表达显著下调(P 0. 05 VS RA),I-k Bα显著上调(P 0. 05 VS RA),且MTX组和CT组相比差异亦具有显著性差异(P 0. 05)。结论:壮医药线点灸联合甲氨蝶呤干预能够显著改善大鼠关节炎症状,且其作用机制可能是通过调控NF-κB/IκB信号通路,从而抑制炎症因子释放和环氧化酶的表达来实现的。     

异甘草酸镁对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:探讨异甘草酸镁(MgIC)对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用.方法:60只成年雄性昆明小鼠随机分成正常对照组、模型对照组、MgIG小剂量治疗组、MgIG大剂量治疗组.正常对照组每天予0.4 mL生理盐水灌胃,其余3组予56°白酒16 mL/(kg·d)连续灌胃10d造成急性酒精性肝损伤模型.正常对照组和模型对照组在灌胃前30 min予0.25 mL生理盐水腹腔注射,MgIG小剂量治疗组和MgIG大剂量治疗组灌胃前预防性给予MgIG[剂量分别为15、45mL/(kg·d)].第10天处死小鼠,通过检测死亡率、死亡时间、肝功能生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)]的变化及肝组织病理变化评价MgIC对急性酒精肝损伤的保护作用.结果:MgIG能降低急性酒精性肝损伤小鼠的死亡率、延长动物存活时间,降低模型对照组、MgIG小剂量治疗组、MgIG大剂量治疗组小鼠血清中AST及ALT的含量,改善肝脏病理变化.结论:MgIG对小鼠急性酒精性肝损伤有一定的保护作用.