小鼠吗啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应模型的建立

目的建立稳定的小鼠吗啡依赖纳洛酮催促戒断跳跃反应模型。方法小鼠连续皮下注射吗啡,以纳洛酮催促戒断跳跃反应为指标,调整吗啡给予天数(5,6,7,10d)、吗啡累积剂量(360,560,640,945,1100,1105,1200mg/kg)、每日给予吗啡的频数[一天二次(bid),一天三次(tid)]、纳洛酮催促紧前给予吗啡与否、以及纳洛酮剂量(10,20mg/kg),建立四个造模方案包括八个子方案。结果方案A、B2、C2吗啡组小鼠跳跃反应率未达100%;方案B1、C1、D2、D3、D4吗啡组小鼠跳跃次数变异系数较大。方案D1采用小鼠连续皮下注射倍增剂量的吗啡,tid×6d,每日每次剂量分别为5,10,20,40,80,160mg/kg;第7天皮下注射吗啡160mg/kg,3h后腹腔注射纳洛酮10mg/kg,吗啡组小鼠可产生显著的跳跃反应,与对照组比较差异有显著性(P<0.01),且变异系数小(CV为0.22),该方案吗啡依赖小鼠跳跃反应次数适度,离散度小。结论选用方案D1可建立稳定的小鼠戒断跳跃反应模型。     

免疫毒素的研究进展

免疫毒素是一组人工构建的具有特异性细胞杀伤能力的杂合分子,由毒性部分、载体部分和靶向部分三部分组成。毒性部分可以是植物、动物、微生物来源的细胞毒素,靶向部分可以是单克隆抗体或细胞因子。免疫毒素的制备有化学交联法和基因工程融合法。免疫毒素与其他抗肿瘤药物相比,具有毒性强和特异性高的优点,在肿瘤治疗中显示出巨大的应用前景。本文主要简述免疫毒素的组成及制备。     

八棱丝瓜蛋白2对B16细胞的诱导分化作用

目的测定八棱丝瓜蛋白2（LF-2）对小鼠黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用.方法以MTT法测定LF-2对B16细胞的增殖抑制作用,以形态学、黑色素含量及细胞周期变化为指标,观察LF-2诱导B16细胞分化的作用.结果LF-2对B16细胞具有明显的增殖抑制作用,并使B16细胞停滞于G1期;细胞生长缓慢,平铺不重叠,甚至形成网状结构,呈正常上皮样细胞分化,细胞质内细胞器丰富,黑色素小体明显增多;黑色素含量显著增加.结论LF-2对B16细胞具有明显的诱导分化作用.     

一种简易的实验性阿尔茨海默病大鼠模型

目的：建立大鼠阿尔茨海默病（AD）动物模型。方法：大鼠海马背侧微量注射0.4mmol/Lokadaicacid(OA)0.5μl，每两天一次，连续三次。海巴背侧首次微量注射15天后，测试各组大鼠空间学习记忆能力；行为检测结束后，断头取脑，Bielshchowsky染色观察各组大鼠海马组织特征性病理变化。结果：海马背侧微量注射OA可显著损害大鼠空间学习记忆能力，诱发大鼠海马组织神经原纤维聚集、融合及神经纤维缠结（NFT）、老年斑（SP）的形成。结论：海马背侧多次微量注射OA可建立大鼠AD模型。     

抗人肝癌噬菌体抗体库的构建及初步筛选

目的构建抗人肝癌的噬菌体抗体库并对该库进行初步筛选。方法以RT-PCR法从经Bel7404细胞免疫的BALB／C小鼠脾淋巴细胞扩增免疫球蛋白的Fd段及k链基因,克隆到表达载体pCOMB3H-SS中并将抗体Fab段表达于单链噬菌体表面,构建噬菌体抗体库;以Bel7404细胞为抗原对所建噬菌体抗体库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的亲和筛选。结果建成了容量为2×106cfu的噬菌体抗体库,在亲和筛选过程中,噬菌体收获率逐轮得到提高,第4轮为第一轮的246倍,含Fab基因的克隆比率也由25％增到83％,表明特异性噬菌体抗体得到了富集。结论噬菌体抗体库技术系高效筛选体系,为肿瘤单抗的制备提供了有效的新途径。     

体外药敏试验在乳腺癌中的应用

目的探讨目前临床应用的化疗药物对乳腺癌的敏感性。方法用MTT法对多柔比星、紫杉醇、氟尿嘧啶、长春瑞滨、顺铂、甲氨蝶呤、丝裂霉素、吉西他滨8种用于乳腺癌的化疗药物的敏感性进行测试。结果紫杉醇与氟尿嘧啶之间无差别,而与其他药物比较均存在显著性差异(P均<0.05);氟尿嘧啶、多柔比星、长春瑞滨、环磷酰胺之间无显著性差异,而它们与丝裂霉素及甲氨蝶呤相比存在显著性差异(P均<0.05)。结论 MTT法检测药物敏感性简便易行,对乳腺癌的临床治疗药物选择具有重要参考价值。     

冈田酸诱导SH-SY5Y细胞tau蛋白的过度磷酸化

目的 观察冈田酸（0A）对SH—SY5Y细胞tau蛋白磷酸化的影响。方法 MTT比色法观察OA对SH—SY5Y细胞代谢率的影响，免疫细胞化学法和蛋白免疫印迹法观察OA对SH—SY5Y细胞磷酸化tau蛋白水平的影响。结果 40nmol／LOA孵育SH—SY5Y细胞24h可显著降低细胞代谢率，其效应随着OA浓度的增加和孵育时间的延长而增强。OA作用于细胞3～48h，蛋白免疫印迹显示Ser-396位点磷酸化tau蛋白水平逐步升高，24h达高峰，之后下降。免疫细胞化学法显示，OA作用于细胞24h，Ser-396位点磷酸化tau蛋白水平较对照组细胞增强。结论 OA增强SH—SY5Y细胞tau蛋白Ser-396位点磷酸化水平。     

抗人Ig轻链系列单克隆抗体的研制：1.抗人λ轻链亚型／亚群单克…

采用ＤＥＡＥ５２提取的多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者尿本周蛋白为免疫原，应用鼠－鼠杂交瘤技术，建立４株能分泌抗人λ轻链单克隆抗体细胞株，经鉴定，为抗人游离λ轻链亚型／亚群抗原决定族单克隆抗体细胞株。