肉苁蓉苯乙醇苷对ALD小鼠肠道黏膜屏障和肠道菌群的影响

目的 探讨肉苁蓉苯乙醇苷（CHPhGs）对酒精性肝病（ALD）小鼠肠道黏膜屏障和肠道菌群影响。方法 将36只C57BL/6N雌性小鼠,随机分为正常组、正常给药组、模型组和CHPhGs低、中、高剂量组（175、350、700 mg·kg^-1）,每组6只。采用利伯-德卡利（Lieber-Decarli）乙醇液体饲料建立ALD小鼠模型。正常给药组和CHPhGs低、中、高剂量组按相应剂量每天灌胃给予CHPhGs。生化仪检测血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、脂多糖（LPS）、脂多糖结合蛋白（LBP）、D-乳酸（D-LA）和二胺氧化酶（DAO）水平,肝脏LBP水平;比色法检测肝脏中TG和TC水平;肝脏行油红O和苏木素-伊红（HE）染色;电镜观察空肠上皮细胞微观结构;空肠和结肠道行HE和阿利新蓝-过碘酸-雪夫（AB-PAS）染色,及黏蛋白2（Muc2）免疫组化。收集正常组、正常给药组、模型组和CHPhGs高剂量组肠道内容物,进行测序。结果 ALD模型建立成功,与正常组比较,模型组血清中ALT、AST和TG水平,以及肝脏TG和TC水平均明显升高（P<0.05）;病理结果提示,与正常组比较,模型组肝脏细胞出现了明显的脂肪变性。与模型组比较,CHPhGs低、中、高剂量组的血清中TG和肝脏TG和TC水平均明显降低（P<0.05）;CHPhGs高剂量组血清中ALT、AST、TNF-α、IL-1β、LPS和LBP明显降低（P<0.05）;CHPhGs高剂量组脂肪变性肝细胞数量明显减少,空肠上皮细胞微绒毛结构基本完整,结肠Muc2表达减少,肠道菌群出现了明显改变（P<0.05）。与正常组比较,异杆菌（Allobaculum）在模型组出现了显著上调（P<0.01）;与模型组比较,嗜黏蛋白阿克曼菌（Akkermansia）在CHPhGs高剂量组中明显上调（P<0.05）。Akkermansia与Allobaculum的丰度呈负相关（r=-0.701,P<0.01）。结论 CHPhGs对ALD的肠道屏障损伤有改善作用,可能是通过调节肠道有益菌Akkermansia和潜在有害菌Allobaculum的丰度和结构,影响肠道黏液稳态来发挥作用。