脾气虚证大鼠股四头肌线粒体自噬水平及AMPK/ULK1途径变化的研究

目的观察脾气虚证大鼠股四头肌线粒体自噬水平及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/UNC-51-类似自噬激活激酶1(ULK1)途径的变化,从线粒体方面研究"脾气虚四肢不用"的机制。方法运用饮食失节+劳倦法复制脾气虚证大鼠模型,随机分为对照组和脾气虚模型组(模型组),造模成功后取股四头肌,比色法检测三磷酸腺苷(ATP)含量;JC-1法检测线粒体膜电位(MMP);免疫荧光及印迹法(Western blot)法检测微管相关蛋白1轻链3-B (LC3 B)、选择性自噬接头蛋白(p62)表达水平及与线粒体共定位的量;Western blot法检测AMPKα及ULK1蛋白表达。结果与对照组比较,模型组股四头肌ATP、MMP下降(P0.05,P0.01);LC3B-II蛋白表达及与线粒体共定位增加(均P0.01)、p62蛋白表达及与线粒体共定位减少(均P0.01);p-AMPKα/AMPKα及p-ULK1/ULK1比值升高(均P0.01)。结论 "脾气虚四肢不用"可能与AMPK/ULK1途径激活所致的线粒体自噬水平提高不足有关。     

小柴胡汤化裁方对AD小鼠记忆认知能力及海马神经元形态的影响

目的:探讨小柴胡汤化裁方对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠记忆认知能力及海马形态学的影响.方法:选取SPF级小鼠60只,随机分成6组,除正常组外,其余各组应用脑立体定位仪定位海马组织并注射β淀粉样蛋白1-42(amyloidβ-protein 1-42,Aβ1-42)造模,中药组灌胃小柴...     

四君子汤对脾气虚证模型大鼠股四头肌线粒体自噬和细胞凋亡水平的影响＊

目的 通过观察不同浓度四君子汤治疗脾气虚证模型大鼠股四头肌线粒体自噬及细胞凋亡水平的变化，研究四君子汤治疗“脾气虚四肢不用”的机制。方法 50只雄性SPF级大鼠随机分为对照组（n = 10）和脾气虚证模型组（模型组，n = 40），饮食失节+劳倦法复制脾气虚证模型，造模成功后符合模型评价标准者纳入脾气虚证模型，将其分为盐水组（n = 10），四君子汤治疗低剂量组（低剂量组，n = 10），四君子汤治疗中剂量组（中剂量组，n = 10）和四君子汤治疗高剂量组（高剂量组，n = 10），连续给药15天。治疗结束后测定其抓力并取股四头肌，比色法检测三磷酸腺苷（Adenosine triphosphate，ATP）、线粒体膜电位（Mitochondrial membrane potential，MMP）和过氧化氢（Hydrogen peroxide，H₂O₂）水平；免疫印迹法（Western blot）法检测微管相关蛋白1轻链3-B（LC3 B）、选择性自噬接头蛋白（p62）、Bcl-2、Bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase3）、细胞色素c（Cyt-c）、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶（PARP）蛋白表达。结果 与对照组比较，盐水组大鼠抓力、体质量、股四头肌ATP和MMP水平下降（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001），H₂O₂水平升高（P < 0.05）；LC3B-II、Bax、Cyt-c，cleaved-Caspase3、PARP蛋白表达上调（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001），p62、Bcl-2表达下调（均P < 0.001）。与盐水组比较，中/高剂量组大鼠抓力升高（均P < 0.01），体质量未见差异（均P > 0.05）；ATP、MMP水平升高（P < 0.01或P < 0.001）、H₂O₂下降（P < 0.05或P < 0.01）；LC3B-II、Bax、Cyt-c，cleaved-Caspase3、cleaved-PARP表达下调（P < 0.05或P < 0.01或P < 0.001），p62、Bcl-2表达上调（P < 0.05或P < 0.01），低剂量组各指标未见差异（均P > 0.05）。与中剂量组比较，高剂量组H₂O₂水平下降（P < 0.05），Bax表达下调（P < 0.01），其余指标未见差异（均P > 0.05）。结论 四君子汤可能通过抑制过度线粒体自噬，维持适度自噬改善线粒体应激，降低细胞凋亡水平治疗脾气虚四肢不用。     

新时期中医药创新创业人才培养模式探究

创新创业教育是我国新时代人才发展战略,文章分析了目前我国大学生创新创业现状及中医院校学生创新创业面临的问题。根据现实情况,阐述了中医院校创新创业教育在新时期人才培养的模式转变：第一要创新传统双创人才培养模式（包括科教结合、临床带教综合模式和人工智能联合医案教学）,第二要开展“互联网+”人才培养模式,旨在深化中医药教育改革,加强学科渗透,培养符合时代特征的、素质全面的中医药创新创业人才。     

益气健脾汤联合二甲双胍激活PI3K/Akt/mTOR通路调控自噬对抗糖尿病肌萎缩

目的 围绕糖尿病模型大鼠比目鱼肌磷脂酰肌醇三激酶（Phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate3-kinase,PI3K）/丝氨酸-苏氨酸激酶（Serine-threonineproteinkinase,Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammaliantargetofrapamycin,mTOR）信号通路、线粒体生物发生、泛素-蛋白酶体途径（Ubiquitinproteasome system,UPS）和自噬,研究益气健脾汤协同二甲双胍改善糖尿病肌萎缩的机制。方法 随机选择6只雄性SPF级SD大鼠设为正常对照组（Control,C）,其余大鼠采用高脂饮食诱导联合链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）法复制糖尿病大鼠模型,模型复制成功后,随机分为模型对照组（Saline,S）、二甲双胍干预组（Metformin,M）及益气健脾汤联合二甲双胍干预组（Y+M）,每组6只。血糖仪检测大鼠空腹血糖（Fasting plasma glucose,FPG）;大/小鼠抓力仪检测大鼠抓力;麦胚凝集素（Wheat germ agglutinin,WGA）染色及...     

脾气虚大鼠胃黏膜细胞线粒体自噬相关蛋白表达的研究＊

目的 通过检测PTEN诱导激酶1（PTEN-induced putative kinase protein 1，PINK1）-Parkin通路及自噬相关蛋白表达，探讨脾气虚胃黏膜细胞线粒体损伤的可能机制。方法 16只雄性SD大鼠随机分为正常组和脾气虚证模型组（模型组），每组8只；透射电镜观察胃黏膜细胞线粒体形态，JC-1法测量其膜电位（ΔΨm）；比色法测定其ATP含量和呼吸链复合物（respiratory chain complex，RCC）I-IV活性；Western blot法检测其RCCV、PINK1、Parkin、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein light chain 3，LC3）-I和II及p62等表达。结果 与正常组比较，模型组胃黏膜细胞的线粒体嵴减少，ΔΨm和ATP水平下降，RCCI和IV活性降低，RCCV、PINK1、Parkin和LC3-II表达下降，但LC3-I和p62表达上升。结论 脾气虚胃黏膜细胞线粒体结构和功能损伤与PINK1-Parkin通路抑制所导致的线粒体自噬水平低下有关。