黄芪升麻柴胡治疗实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的量效关系及免疫学机制研究

目的：探讨益气升提法治疗实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠中黄芪的最佳剂量,以及免疫机制。方法：采用Rα97.116免疫Lewis大鼠构建EAMG,随机分为佐剂对照组、模型对照组、益气升提黄芪低剂量组、益气升提黄芪中剂量组、益气升提黄芪高剂量组。观察大鼠抓力、体质量、低频重复电刺激（RNS）衰减率,检测血清AChR-Ab、IFN-γ、TGF-β、IL-6、IL-17含量及外周血淋巴细胞CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg比例,将EAMG大鼠临床表现与实验室检测指标综合汇总,进行综合评分,评价各组治疗效果。结果：治疗后,低中高三剂量益气升提组大鼠EAMG综合评分分别为82,58,88分（满分100分）,各组大鼠体质量回升,抓力回升,RNS衰减率显著降低（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,血清AChR-Ab、IFN-γ、IL-6、IL-17含量显著下降,TGF-β含量显著升高（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,外周血淋巴细胞CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg比例显著升高（P<0.05）。结论：益气升提法对EAMG大鼠具有明确治疗效果,黄芪高剂量组疗效最优,不同剂量黄芪配伍升麻柴胡对MG细胞因子网络的影响各不相同。益气升提法治疗EAMG的机制可能是通过升高TGF-β含量,降低IFN-γ、IL-6、IL-17含量,提高CD4⁺CD25⁺FoxP3⁺Treg比例,降低血清AChR-Ab含量,从而减少神经肌肉接头处AchR损害。     

B10细胞在益气升提法治疗EAMG大鼠中的作用

摘 要：目的 观察在实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）中，用益气升提法对其治疗的效果及分析 B10细胞的作用和免疫机制。方法 将48只Lewis大鼠随机分成6组：阳性药物对照组、益气升提低剂量组、 益气升提中剂量组、益气升提高剂量组、佐剂对照组和模型对照组。用Rα97-116免疫大鼠建立EAMG模 型。在实验中对大鼠体重，临床表现，低频重复电刺激（RNS）衰减率进行观察。检测血清中乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）、白介素10（IL-10）的含量，其方法是酶联免疫吸附试验（ELISA）；检测组织中CD19的表达， 其方法用蛋白印迹法（western-blot），以及用逆转录—聚合酶链反应（RT-PCR）检测IL-10和CD19基因的表 达。结果 给药后，大鼠体重回升，临床症状好转，RNS衰减率显著降低（P<0.05， P<0.01），血清中AchRAb含量显著下降（P<0.05， P<0.01），IL-10含量显著上升（P<0.05， P<0.01），组织中CD19蛋白表达下降 （P<0.05， P<0.01）。CD19和IL-10基因表达下降（P<0.01， P<0.001）。结论 EAMG大鼠经过益气升提 法治疗后，临床症状及体重下降趋势有明显改善作用，其机制可能是升高IL-10含量，下调IL-10和CD19基因表达以及下调CD19蛋白表达，降低血清中AchR-Ab含量，从而减少神经肌肉接头处AchR损害。