培养条件对罗布麻愈伤组织中金丝桃苷和异槲皮苷积累的影响

目的 探究促进罗布麻愈伤组织积累金丝桃苷、异槲皮苷的培养条件.方法 以罗布麻无菌苗子叶为材料,在诱导培养基上诱导愈伤组织并继代,探索不同激素配比、培养基碳源、氮源和盐浓度对罗布麻愈伤组织生长率和金丝桃苷、异槲皮苷积累的影响.结果 (1)孵育在MS+0.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA培养基上的愈伤组织中,金丝桃苷、异槲皮苷含有量最高,分别为6.12 mg/g、7.23 mg/g;(2)培养基碳源为2.0 mg/L蔗糖+2.0 mg/L葡萄糖时,有利于愈伤组织中金丝桃苷、异槲皮苷的积累,两种成分分别为7.45 mg/g、8.69 mg/g,是植物叶片的1.24倍和1.22倍;(3)当培养基氮源为2 475 mg/L NH4NO3,0 mg/L KNO3时,金丝桃苷、异槲皮苷含有量均最高,分别为8.67 mg/g、9.86 mg/g,是植物叶片的1.44倍和1.38倍;(4)培养基中添加150 mmol/L NaCl时,愈伤组织中金丝桃苷、异槲皮苷含有量最高,分别为10.07 mg/g、11.15 mg/g,是植物叶片的1.67倍和1.56倍.结论 通过改变培养条件,可以促进罗布麻愈伤组织中金丝桃苷和异槲皮苷的积累,为进一步以罗布麻愈伤组织为材,工业化生产金丝桃苷和异槲皮苷这两种重要的药效成分奠定基础.     

利用动物耳皮肤组织培养成纤维细胞的研究

对采集的动物耳部皮肤样品采用将组织块剪碎后直接贴附于细胞培养瓶底部培养的方法与酶消化法对动物体细胞进行原代培养 ,前者使得对不同品种绵羊、山羊、牛、北山羊的原代体细胞出现率及可传代率均达到 1 0 0 %。两种培养方法在成纤维细胞出现及可进行传代时间上有所差别。对于在体细胞传代培养中出现的上皮样细胞与成纤维样细胞混合生长的问题根据两者贴壁紧实程度的不同 ,用 0 .0 5%的胰酶—EDTA对其进行不同时间的消化 ,将两种不同类型的细胞进行分离和纯化。纯化的体细胞经数次传代培养后进行冷冻—解冻后仍具有正常的传代能力。对不同代次绵羊和牛的体细胞进行的核型分析表明 ,在体外培养至 2 0～ 30代 (绵羊胎儿细胞培养至 45代 )成纤维细胞的染色体倍性及数目未发现异常     

新疆紫草无性繁殖体系的建立

目的 为了促进新疆紫草大面积人工栽培，缓解自然资源匮乏的现状，通过组织培养技术建立了新疆紫草的无性繁殖体系。方法 诱导新疆紫草多种外植体脱分化均已成功，胚状体扩增后萌发出大量的试管苗；愈伤组织扩增后诱导出大量的不定芽，不定芽经诱导生根后，得大量的试管苗，试管苗土栽成活。结果 外植体脱分化期间，2，4-D不可缺少，KT的作用优于BA；嫩芽切段脱分化最快，愈伤组织质量最好；降低2，4-D浓度有利于愈伤组织扩增和再分化；一定浓度KT或BA都可诱导出不定芽，前者还有利于球形胚的形成；球形胚培养初期，培养基中加入适量激素能使球形胚大量增殖，并很快发育；适当的昼夜温差(10℃～28℃)和自然光照有利于壮苗的形成和移栽成活。在移栽的236株试管苗中，31株土培成活，成活率达13．2％。结论 通过组织培养方法建立的新疆紫草无件繁殖体系稳定，可用。     

罗布麻和大叶白麻中芦丁与绿原酸含量的比较

目的比较两个产地、三个采集期的罗布麻和大叶白麻中芦丁与绿原酸含量,以此为依据评判大叶白麻是否可完全替代罗布麻入药,并为两种植物人工栽培场地的选择提供参考。方法采用HPLC法对大叶白麻和罗布麻的同一生境和不同生境、相同采集期和不同采集期以及不同器官中芦丁和绿原酸含量进行比较。结果在本实验条件下,就芦丁含量而言,精河产地在初花期和盛花期采摘罗布麻叶最佳。就绿原酸含量而言,库尔勒产地在结荚期采摘罗布麻叶最佳。结论大叶白麻不能完全替代罗布麻入药。     

甘草耐盐性愈伤组织的诱导及植株再生研究

目的通过对耐盐性甘草愈伤组织再生植株研究,促进在盐碱滩人工栽培甘草技术的发展。方法诱导乌拉尔甘草G ly cy rrh iza ura lensis无菌苗子叶块和胚轴段在含盐培养基上脱分化均成功。逐步提高盐质量浓度诱导愈伤组织扩增,继之诱生不定芽,芽经扶壮后诱根,得到大量试管苗。结果子叶块和胚轴段在M S BA1.5 m g/L 2.4-D 1.2 m g/L N aC l 100 m g/L中脱分化效果好,愈伤多为淡黄色,稍透明。N aC l质量浓度增至250m g/L后愈伤组织长势很快下降,色暗,有些死亡。愈伤组织经无盐培养继代两轮后,转入M S BA 0.5 m g/L KT1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L上分化出大量不定芽,说明不定芽的耐盐性是遗传所致。降温(18~22℃)、自然光照、并添加适量的GA3有利于壮芽形成,在诱导生根的83个芽中的55个生根,其中1/2M S IAA1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L最适宜生根,生根率达66.26%。结论通过对耐盐性甘草愈伤组织的诱导可得到耐盐性甘草的再生植株。     

培养条件对大叶白麻愈伤组织中三萜类化合物积累的影响

目的:研究了培养条件对大叶白麻愈伤组织生长和三萜类化合物积累的影响.方法:以大叶白麻无菌苗下胚轴段为材,在MS+0.2 mg/L 6-BA+0.6 mg/L NAA培养基上诱导愈伤组织并继代,探索愈伤组织继代次数、光周期、培养基碳源和添加物对大叶白麻愈伤组织生长和三萜类化合物积累的影响.结果:(1)愈伤组织继代3次增长倍数最大,三萜类化合物的产量达最大值,分别为7.3倍和0.54%;(2)4种光周期处理中,16 h/d光照下的愈伤组织增长量、三萜类化合物含量最高,分别达到为7.2倍和0.52%;(3)蔗糖比葡萄糖、果糖更有利于愈伤组织的生物量增长和三萜类化合物的积累,以附加5%蔗糖最佳,分别为8.3倍和0.72%;(4)在3种含添加物的培养基中,以添加2 mg/L水杨酸的培养基上愈伤组织增长量最大,三萜类化合物含量也最高,分别为7.2倍和0.68%.结论:通过改变培养条件和培养基成分,可提高大叶白麻愈伤组织中三萜类化合物的产量.     

新疆紫草无性繁殖体系的建立

目的 为了促进新疆紫草大面积人工栽培，缓解自然资源匮乏的现状，通过组织培养技术建立了新疆紫草的无性繁殖体系。方法 诱导新疆紫草多种外植体脱分化均已成功，胚状体扩增后萌发出大量的试管苗；愈伤组织扩增后诱导出大量的不定芽，不定芽经诱导生根后，得大量的试管苗，试管苗土栽成活。结果 外植体脱分化期间，2，4-D不可缺少，KT的作用优于BA；嫩芽切段脱分化最快，愈伤组织质量最好；降低2，4-D浓度有利于愈伤组织扩增和再分化；一定浓度KT或BA都可诱导出不定芽，前者还有利于球形胚的形成；球形胚培养初期，培养基中加入适量激素能使球形胚大量增殖，并很快发育；适当的昼夜温差(10℃～28℃)和自然光照有利于壮苗的形成和移栽成活。在移栽的236株试管苗中，31株土培成活，成活率达13．2％。结论 通过组织培养方法建立的新疆紫草无件繁殖体系稳定，可用。     

甘草耐盐性愈伤组织的诱导及植株再生研究

目的通过对耐盐性甘草愈伤组织再生植株研究,促进在盐碱滩人工栽培甘草技术的发展。方法诱导乌拉尔甘草G ly cy rrh iza ura lensis无菌苗子叶块和胚轴段在含盐培养基上脱分化均成功。逐步提高盐质量浓度诱导愈伤组织扩增,继之诱生不定芽,芽经扶壮后诱根,得到大量试管苗。结果子叶块和胚轴段在M S BA1.5 m g/L 2.4-D 1.2 m g/L N aC l 100 m g/L中脱分化效果好,愈伤多为淡黄色,稍透明。N aC l质量浓度增至250m g/L后愈伤组织长势很快下降,色暗,有些死亡。愈伤组织经无盐培养继代两轮后,转入M S BA 0.5 m g/L KT1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L上分化出大量不定芽,说明不定芽的耐盐性是遗传所致。降温(18~22℃)、自然光照、并添加适量的GA3有利于壮芽形成,在诱导生根的83个芽中的55个生根,其中1/2M S IAA1.0 m g/L NAA 1.0 m g/L N aC l 200 m g/L最适宜生根,生根率达66.26%。结论通过对耐盐性甘草愈伤组织的诱导可得到耐盐性甘草的再生植株。