高职天然药物化学教学方法改进探索

天然药物化学是药学专业的一门重要专业课程,也是一门实践性、应用性、综合性很强的课程。根据高职高专药学专业人才培养目标以及高职学生的学习特点,从理论教学方法、实验设置等方面对教学进行探索。     

湖北道地药材中潜在抗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)活性成分的计算机虚拟筛选

目的：运用计算机虚拟筛选技术寻找湖北道地药材中抗新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的小分子抑制剂。方法：以药材名为关键词,在知网和PubMed数据库中搜索湖北道地药材的主要化学成分,从Pubchem数据库下载相应化合物结构,以新型冠状病毒3CL水解酶蛋白和血管紧张素转换酶Ⅱ（ACE2）为靶点,利用Sybyl软件中蛋白质预处理工具确定活性区域,应用Surflex-dock模块对小分子与靶蛋白进行分子对接,通过Total Score打分函数筛选出活性成分,采用Discovery Studio软件分析结合最好的蛋白复合体的相互作用力。结果：分子对接结果显示苍术苷A、厚朴木脂素C、异鼠李素是与SARS-CoV-2 3CL水解酶结合最强的3个化学成分,木兰苷B、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸、木兰苷D是与ACE2结合最强的3个化学成分,与抑制剂洛匹那韦、利托那韦得分接近,可能为中药苍术、厚朴和菊花抗SARS-CoV-2的潜在活性成分,化合物与蛋白之间的相互作用力以氢键、疏水作用力为主。结论：基于分子对接技术虚拟筛选潜在的抗新型冠状病毒的中药化学成分,为湖北道地药材抗击SARS-CoV-2提供了科学指导与理论依据。     

红毛七的化学成分及其抗肿瘤活性研究

目的研究红毛七Caulophyllumrobustum的化学成分及其抗肿瘤活性。方法采用硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶SephadexLH-20等色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱技术鉴定化合物的结构;采用CCK-8法,对化合物进行体外抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖的活性筛选。结果从红毛七根及根茎中分离出11个化合物,分别鉴定为collinsogenin(1)、常春藤皂苷元(2)、eechinocystic acid 3-O-α-L-arabinopyranoside(3)、magnolamide(4)、木兰箭毒碱(5)、columbamine(6)、4,4′-diphenylmethane-bis(methyl) Carbamate(7)、(-)-8,8′-二甲氧基-开环异落叶松树脂酚-L-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、紫花松果菊苷A(9)、2-[4-(3-hydroxy-1-propenyl)-2-methoxyphenoxy]-1,3-propanediol(10)、亚油酸甘油酯(11)。结论化合物1～2和4～11均首次从该属植物中分离得到;化合物1和2对人非小细胞肺癌A549细胞增殖具有中等强度的抑制作用。     

虎杖中白藜芦醇苷的大孔树脂吸附工艺研究

目的研究大孔树脂对白藜芦醇苷的吸附工艺。方法考察分白藜芦醇苷的提取条件、白藜芦醇苷纯化时大孔树脂类型、上样液浓度、流速对吸附率的影响,并绘制泄漏曲线以确定最佳上样量。结果将虎杖30%乙醇渗漉液浓缩为含白藜芦醇苷0.7774mg/mL,以3BV/h的流速过D101大孔树脂柱为最佳吸附条件,最佳上样量为10.88mg/mL。结论此法操作简单可行,适合工业大生产。     

姜黄中总姜黄素纯化方法的比较

目的研究总姜黄素较优的纯化方法.方法采用分光光度法,以总姜黄素的含量为指标,考察了从姜黄中提纯总姜黄素的3种不同方法.结果水杨酸钠法所得样品的含量最高为92.5%,其次为酸碱法74.0%,最低为活性炭法51.2%.结论水杨酸钠法操作简单,提取物纯度较高,为较好的纯化方法.     

姜黄素对酒精性肝损伤大鼠CYP3A的影响及机制探讨

目的 探究姜黄素对酒精性肝损伤（ALD）大鼠细胞色素P450 3A（CYP3A）的影响及其机制。方法 60只 建模成功的ALD大鼠按随机数字表法分为模型组,姜黄素低、中、高剂量组（分别灌胃40、80、160 mg/kg姜黄素）及阳 性对照组（腹腔注射200 mg/kg腺苷蛋氨酸）,每组12只;对照组12只正常饲养,灌胃等体积生理盐水,连续6周。全 自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）水平;苏木精-伊红 （HE）染色观察肝脏形态变化;荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测肝脏组织中孕烷X受体（PXR）、组成型雄甾烷受 体（CAR）、CYP3A25 mRNA水平;Western blot检测肝脏组织中PXR、CAR蛋白水平。以大鼠原代肝细胞为研究对象, 分别用0、100、200、300、400、500 mmol/L乙醇培养细胞,取细胞增殖抑制率约为50%时的乙醇浓度进行下一步实验; 0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 μmol/L姜黄素培养细胞,取最适姜黄素浓度进行后续研究。实验分为对照组、乙醇组、姜 黄素组、姜黄素+siRNA-NC 组及姜黄素+siRNA-CYP3A25 组。CCK-8 检测细胞增殖情况;qPCR 检测细胞中 CYP3A25 mRNA水平;Western blot检测细胞中PXR、CAR蛋白水平。结果 动物实验：与对照组相比,模型组血清中 ALT、AST、ALP水平升高（P＜0.05）;与模型组相比,姜黄素低剂量组血清中ALT、ALP水平降低,肝脏组织中PXR、 CAR mRNA和蛋白,CYP3A25 mRNA水平升高（P＜0.05）,姜黄素中、高剂量组血清中ALT、AST、ALP水平降低,肝脏 组织中PXR、CAR mRNA和蛋白,CYP3A25 mRNA水平升高（P＜0.05）;随着剂量升高,各指标逐渐恢复。细胞实验： 与对照组相比,乙醇组细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,细胞中PXR、CAR蛋白水平降低（P＜0.05）;与乙醇组相比,姜 黄素组细胞增殖抑制率降低（P＜0.05）,细胞中CYP3A25 mRNA,PXR、CAR蛋白水平升高（P＜0.05）;与姜黄素组相 比,姜黄素+siRNA-CYP3A25 组细胞增殖抑制率升高（P＜0.05）,细胞中 CYP3A25 mRNA,PXR、CAR 蛋白水平降低 （P＜0.05）。结论 姜黄素可上调 CYP3A25 水平,促进药物代谢,实现对 ALD 的缓解,这一过程可能与升高 PXR、 CAR表达有关。     

藤茶中总黄酮的含量测定

目的:对藤茶样品中总黄酮进行含量测定。方法:采用分光光度法,以芦丁为对照品,并利用Na NO3-Al(NO3)3-Na OH显色方法,对藤茶样品中总黄酮的含量进行测定。结果:总黄酮在8.24-49.44ug/m L(r=0.9995)范围内线性关系良好,平均加样回收率为98.98%,RSD=2.07%,不同产地藤茶中总黄酮含量存在一定差异,以湖南藤茶中总黄酮含量最高。结论:该方法快速、简便、准确,可作为该药材的质量评价标准的参考方法。     

杜鹃兰假鳞茎化学成分研究

目的:研究杜鹃兰假鳞茎的化学成分。方法:利用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、反相制备液相色谱等方法进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR等波谱技术进行结构鉴定。结果:从杜鹃兰假鳞茎的乙酸乙酯部位中分离得到10个化合物,分别鉴定为:shancigusinⅠ(Ⅰ)、4-O-β-D-glucopyranosyl cinnamate(Ⅱ)、bulbocodin D(Ⅲ)、blestriarene A(Ⅳ)、7-羟基-2,4-二甲氧基菲(Ⅴ)、coelonin(Ⅵ)、militarine(Ⅶ)、天麻苷(Ⅷ)、3-羟基苯丙酸(Ⅸ)、肉桂酸(Ⅹ)。结论:其中,化合物Ⅰ~Ⅲ、Ⅸ、Ⅹ为首次从该植物中分离得到。     

大孔树脂纯化肺形草总黄酮工艺研究

目的研究大孔树脂分离纯化肺形草中总黄酮的工艺。方法通过静态吸附及解吸试验,以吸附率和解吸率为指标考察6种型号大孔吸附树脂对肺形草中总黄酮的纯化性能,筛选最佳的大孔树脂,采用动态吸附考察上样液浓度、上样流速、上样量对吸附的影响,并通过正交试验确定最佳洗脱工艺。结果 AB-8型大孔树脂对肺形草总黄酮有较好的吸附和洗脱效果,其最佳分离纯化工艺为:上样液浓度为5.285 mg/m L,上样流速为2 BV/h,上样量为17.62 mg/m L,依次用4 BV 10%乙醇洗脱除杂,5 BV 50%乙醇洗脱总黄酮,洗脱流速为4 BV/h。经AB-8树脂处理后的总黄酮纯度达61.95%,收率为87.28%。结论该优选工艺稳定可行,适用于肺形草总黄酮的纯化分离。     

中药毛慈菇的化学成分研究

目的:研究中药毛慈菇的化学成分。方法:利用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱、反相制备液相色谱等方法进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR等波谱技术进行结构鉴定。结果:从毛慈菇90%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离得到11个化合物,分别鉴定为:neoechinulin A(1)、blespirol(2)、落叶松脂醇(3)、hydroxytyrosol-4-β-D-glucoside(4)、3',5-dimethoxy-3-hydroxybibenzyl(5)、1-(4-羟苄基)-4,7-二羟基-2-甲氧基二氢菲(6)、阿魏酸(7)、5-羟甲基糠醛(8)、对羟基苯甲酸(9)、对羟基苯丙酸甲酯(10)、batatasinⅢ(11)。结论:其中,化合物1~4为首次从该属植物中分离得到。