α细辛醚对耐药性癫痫模型大鼠脑组织中P糖蛋白与多药耐药基因表达的影响

目的观察α细辛醚对戊四氮所致耐药性癫痫模型大鼠海马与皮层中P糖蛋白(P-gp)与多药耐药基因1a(Mdr1a)mRNA表达的影响。方法将8周龄Wistar雄性大鼠隔日腹腔注射亚剂量的戊四氮(30 mg/kg),持续30 d,按Racine分级将注射戊四氮后大鼠癫痫发作进行分级,连续3次及以上出现Ⅴ级发作者,视为癫痫造模成功,用于筛选耐药性癫痫大鼠。将癫痫造模成功的大鼠,灌服卡马西平(125 mg/kg)与苯妥英钠(62.5 mg/kg)1 h后,注射相同剂量的戊四氮,观察大鼠癫痫发作级别,动物筛选实验持续1周,连续3次出现5级发作者,视为耐药性癫痫大鼠模型。将耐药性癫痫大鼠随机分为α细辛醚低、高剂量组与模型组;另设正常组,干预3周后取材,使用Western blot技术检测大鼠海马与皮层中P-gp表达;使用real time PCR技术检测大鼠海马与皮层中Mdr1a mRNA的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠海马与皮层组织中P-gp和Mdr1a mRNA均明显升高(P<0.05);α细辛醚低、高剂量组大鼠海马与皮层中P-gp与Mdr1a mRNA的表达均较模型组降低,其中α细辛醚高剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论高剂量的α细辛醚能明显下调模型大鼠海马与皮层中P-gp与Mdr1a mRNA的表达,扭转P-gp介导的癫痫耐药性。     

柴贝止痫汤在大鼠体内主要入血成分及其药代动力学研究

目的借助于高效液相色谱(Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)-串联质谱(Tandem mass spectrometry,MS/MS)技术以及气相色谱(Gas Chromatography,GC)-MS/MS技术确定大鼠灌服柴贝止痫汤后主要吸收入血成分,并计算其在大鼠体内的药代动力学特征。方法采用Thermo Syncronis C18(2.1×100 mm,1.9μm)为色谱柱,乙腈-0.01%甲酸水为流动相,分析时间0~8分钟,进样量5μL,流速0.25 mL/min;电喷雾电离源ESI(+),监测模式为二级数据依赖性扫描;GC载气为He气,恒流模式,流速为1 mL/min,进样量1μL,气化室温度250℃,柱温为程序升温,起始温度为80℃,维持1分钟。雄性Wistar大鼠6只,给予中药柴贝止痫汤(生药8.125 g/kg)灌胃,分别于灌胃前及灌胃后各时间点眶静脉取血,样品处理后采用液质联用及气质联用技术检测17种单体成分在不同时间点大鼠血液中的浓度,采用DAS 2.0软件计算药代动力学参数:AUC_0-t、AUC_0-∞、MRT_0-t、MRT_0-∞、t 1/2、T max、C max。结果大鼠血浆中检测出15种单体成分,其含量由高到低排列依次为:天麻素、对羟基苯甲醛、胡芦巴碱、天麻苷元、原儿茶醛、柴胡皂苷A、香草醛、细辛醛、贝母素乙、α-细辛醚、茴香脑、β-细辛醚、柴胡皂苷C、贝母素甲、贝母辛,柠檬醛及柴胡皂苷D未检测出。柴贝止痫汤整体入血成分血药浓度在0.25~0.5小时达到高峰,半衰期平均值为4.28小时。结论该方法日内精密度和日间精密度良好,回收率在标准范围内,符合定量检测要求;柴贝止痫汤灌胃后贝母素甲、贝母素乙等15种化合物可吸收入血,0.25~0.5小时入血成分浓度达到高峰,可作为复方含药血清最佳采血时间。     

α细辛醚对大鼠脑微血管内皮细胞P糖蛋白表达与功能的影响

目的 探讨α细辛醚对大鼠脑微血管内皮细胞P糖蛋白(P-gp)功能与表达的影响。方法 采用100 μmol/L L-谷氨酸作用于脑微血管内皮细胞30 min,诱导其细胞膜上P-gp高表达,模拟癫痫反复发作诱导的耐药性癫痫血脑屏障中血管内皮细胞P-gp升高。MTT法检测α细辛醚的安全药物浓度范围,设置3个浓度梯度(12.5、25.0、50.0 μg/μl) 干预模型细胞24 h。干预完成后,采用 Western blot法检测P-gp表达,Real-time PCR检测多药耐药基因1a(Mdr1a)mRNA扩增,罗丹明 123(Rh123)转运实验测定Rh123在脑微血管内皮细胞内的累积量变化,判断α细辛醚对P-gp功能的影响。结果 正常大鼠脑微血管内皮细胞经谷氨酸刺激后,P-gp(F=1.924,P=0.020)与Mdr1a mRNA(F=1.788,P=0.019)表达皆显著升高。25.0(F=1.924,P=0.025;F=1.788,P=0.017)、50.0 μg/μl(F=1.924,P=0.035;F=1.788,P=0.026)α细辛醚作用后,p-gp和Mdr1a mRNA的表达较模型组均显著降低。与模型细胞相比,25.0(t=6.085,P=0.000)、50.0 μg/μl(t=8.912,P=0.000)α细辛醚作用后,血管内皮细胞内Rh123皆显著升高,升高率分别接近40%和60%。结论 α细辛醚可以扭转谷氨酸诱导的大鼠脑微血管内皮细胞P-gp/Mdr1a的高表达,显著增加Rh-123在脑微血管内皮细胞内的蓄积。α细辛醚可能对P-gp介导的耐药性癫痫的耐药性具有一定扭转作用。     

葛根素干预小鼠成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA的表达

背景：研究证实葛根素对小鼠卵巢以及与睾丸切除所致骨质疏松具有很好的防治作用,但关于葛根素对成骨细胞分化的影响却少有报道。
　　目的：观察葛根素对成骨细胞碱性磷酸酶mRNA、骨涎蛋白mRNA、骨桥蛋白mRNA以及骨钙素mRNA表达的影响情况。
　　方法：体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞,随机分为3组。空白对照组仅更换培养基;葛根素组更换为含有葛根素1×10-6 mol/L 培养基;雌二醇组更换为含有雌二醇1×10-7 mol/L 培养基。RT-PCR 法测定MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素mRNA的表达
　　结果与结论：葛根素和雌二醇能够延长碱性磷酸酶表达时间,在第12天达到高峰;葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增加骨涎蛋白mRNA的表达。葛根素和雌二醇在第5天和第12天能够减少骨桥蛋白的表达;葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增强骨钙素表达。结果表明葛根素能够通过影响成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA表达,促进成骨细胞的分化,可能是葛根素抗骨质疏松的重要的细胞分子机制之一。     

从“水饮”论治癫痫的机制探讨

本文探讨了中医对癫痫病因病机的认识,提出"水饮"是癫痫病因之一。笔者梳理了水饮证的历史源流及形成机理,通过比较癫痫与水饮致病特点之间的内在联系,得出水饮证可以导致癫痫证候的观点,而水饮诱发癫痫发作的内在机制在于水饮上冲,并通过相关医案验证了从水饮上冲辨治癫痫的可行性。本文通过探索水饮与癫痫之间的内在联系,希望借此丰富中医相关理论,为临床辨治癫痫提供新的思路。     

葛根素干预小鼠成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA的表达CSCD

背景:研究证实葛根素对小鼠卵巢以及与睾丸切除所致骨质疏松具有很好的防治作用,但关于葛根素对成骨细胞分化的影响却少有报道。目的:观察葛根素对成骨细胞碱性磷酸酶mRNA、骨涎蛋白mRNA、骨桥蛋白mRNA以及骨钙素mRNA表达的影响情况。方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞,随机分为3组。空白对照组仅更换培养基;葛根素组更换为含有葛根素1×10-6 mol/L培养基;雌二醇组更换为含有雌二醇1×10-7 mol/L培养基。RT-PCR法测定MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素mRNA的表达结果与结论:葛根素和雌二醇能够延长碱性磷酸酶表达时间,在第12天达到高峰;葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增加骨涎蛋白mRNA的表达。葛根素和雌二醇在第5天和第12天能够减少骨桥蛋白的表达;葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增强骨钙素表达。结果表明葛根素能够通过影响成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA表达,促进成骨细胞的分化,可能是葛根素抗骨质疏松的重要的细胞分子机制之一。     

大黄附子汤加味对脓毒症大鼠小肠运动水平及黏膜通透性的影响

目的观察温下法对脓毒症大鼠胃肠运动水平及肠黏膜通透性的影响。方法 48只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组10只;其余38只大鼠采用盲肠结扎穿孔法复制大鼠脓毒症模型。对造模成功的36只大鼠随机分为模型对照组、大黄附子汤加味组(中药组)与枸橼酸莫沙必利组(西药组)各12只。造模成功后各组大鼠均禁食不禁水饲养,中药组大鼠予大黄附子汤加味中药灌胃,西药组给予枸橼酸莫沙必利灌胃,正常对照组与模型对照组予等量灭菌注射用水灌胃。造模成功24 h后观察各组大鼠死亡率,对存活大鼠采用小肠碳末推进百分率评估小肠动力学,观察小肠黏膜病理改变并评分;ELISA方法检测血清D-乳酸及血清降钙素原(PCT)、胃泌素(GAS)及胃动素(MTL)水平。结果死亡率比较:正常对照组中药组模型组和西药组(P0.05)。小肠黏膜损伤指数、D-乳酸及PCT水平比较:正常对照组中药组模型组和西药组(P0.05)。小肠传输率、MTL及GAS比较:正常对照组中药组和西药组模型对照组(P0.05),小肠传输率、MTL及GAS在中药组和西药组间差异无统计学意义(P0.05)。结论温下法可能通过调节肠道运动和肠黏膜通透性调节炎症状态发挥治疗脓毒症的作用。     

癫痫发作的病机探析

癫痫作为一种发作性脑部疾病,其发作具有短暂性、重复性和刻板性的特征,且发作期与间歇期交替,时发时止.对于癫痫发作的病机,历来并无统一说法.本文主要从伏邪致病、少阳枢机不利、中焦气机不畅、节律紊乱以及玄府病变五个角度论述癫痫发作的中医学病机,并探讨中西医发病机制间的联系,以期从病机的角度为癫痫的临床诊疗提供思路.     

骨代谢与肠道菌群

背景：骨代谢与肠道菌群肠道内定植了数量众多、种类丰富的肠道菌群,它们和宿主间形成了互利共生的关系,对宿主的健康产生着重大影响。研究发现肠道菌群不仅调控肠道活动,并且能通过调节免疫系统状态进而干预骨代谢。 目的：综述肠道菌群对骨代谢影响研究的新进展。 方法：以“Gut microbiota,immunesystem,bonemetabolism,osteoporosis”为关键词检索PubMed 数据库,选择内容与肠道菌群、免疫及骨代谢相关文献,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。最总共纳入文献46篇,从肠道菌群与免疫、骨代谢与免疫、肠道菌群与骨代谢3方面进行综述。 结果与结论：肠道菌群对骨质疏松症的影响研究将涉及到骨生理学、肠胃病学、免疫学以及微生物学等多门学科。无菌小鼠与人体内实验研究发现肠道菌群对骨代谢具有重要影响,利用抗生素、益生菌、益生元干预肠道菌群进一步证实了肠道菌群对骨量具有很好的调节作用。这些作用主要表现在迅速生长期,例如骨量需求较大的青春期,以及骨量丢失较明显的妇女更年期。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程