基于miR23b调控的GABA能神经元功能研究电针镇痛的机理＊

目的 观察电针（electroacupuncture， EA）GB30（环跳）、GB34（阳陵泉）对慢性压迫损伤（chronic compression injury，CCI）模型大鼠GABA能神经元功能的影响，分析电针镇痛与miR23b调控的GABA能神经元功能的关系。方法 将52只SPF级SD雄性大鼠，随机均分为正常组、CCI组、CCI+EA组、CCI+miR23b组，每组13只。CCI组、CCI+EA组、CCI+miR23b组进行左侧坐骨神经结扎手术造成CCI模型，正常组除不结扎坐骨神经，其余步骤一样。术后CCI+miR23b组进行两次腰部硬脊膜注射miR23b，术后第4天进行第1次注射miR23b，第8天注射第2次miR23b，每次注射12.5 μL，术后第14天取组织。CCI+EA组进行左侧GB30、GB34电针，每天电针1次，每次30 min，连续电针10天。实验结束后取动物脊髓腰段膨大组织及血清，进行实时定量PCR法检测GABA（A）、GABA（B）、mir23b的表达，ELISA法检测GABA的含量、原位杂交检测miR23b指标及免疫组化检测GABAAR beta-1，GABA B R2的表达。结果 采用ELISA法检测大鼠血清GABA的含量的实验结果表明，与CCI组比，CCI+miR23b组、CCI+EA组大鼠血清GABA含量明显上调，差异具有显著性意义（P<0.05）。实时定量PCR的实验结果表明，与正常组比，CCI组大鼠的GABAA、GABAB及mir23b表达明显下调（P<0.05）；与CCI组比，CCI+miR23b组、CCI+EA组GABAA、GABAB及mir23b表达明显上调（P<0.05）。原位杂交及免疫组化检测结果表明，与CCI组比，CCI+miR23b组、CCI+EA组GABA A R beta-1、GABA B R2、miR23b免疫阳性细胞表达灰度值明显下调，即表达上升，差异具有显著性意义（P<0.05）。结论 电针可以调节疼痛引起的GABA A R beta-1、GABA B R2及miR23b指标的改变。说明电针通过调控miR23b的表达，改善疼痛模型大鼠脊髓背角GABA能神经元功能，达到镇痛的效果。