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目的 建立快速检测A(H3N2)亚型流行性感冒病毒(简称流感病毒)神经氨酸酶(M)基冈E119V奥司他韦耐药突变位点的双重实时荧光定量逆转录PCR(rRT-PCR)方法.方法 由GenBank获取2000-2012年A(H3N2)亚型流感病毒NA基因序列26条,据此设计特异性靶向NA E119V突变位点的TaqMan-MGB探针进行双重rRT-PCR反应,并利用耐药参考株、临床分离株进行敏感性、特异性和重复性评价.结果 建立了快速检测NA基因E119V位点的双重rRT-PCR检测方法.本方法在A(H3N2)病毒(HA=8)稀释度至10-5仍可检测到荧光信号,病毒滴度的对数与Ct值之间呈线性相关,具有较高的灵敏度;与无耐药突变的A(H3N2)流感病毒及其他呼吸道病毒均无交叉反应,两条TaqMan-MGB探针之问不存在交叉反应,具有很高的特异性,并能够检测耐药株和敏感株混合病毒中的耐药突变,在较高浓度的混合病毒中对耐药突变的检测限是5%,在低浓度混合病毒中的检测限是50%.重复性试验得到H3N2-119E和H3N2-119V两组探针批内平均变异系数(CV)值分别为2.32%和0.57%,批间CV值分别为1.77%和0.97%,具有较好的重复性.对其中20株病毒的NA基因序列进行分析,证实这些毒株的NA基因119位点均为谷氨酸(E),表明本研究设计的方法与序列测定结果一致.结论 建立了基于TaqMan-MGB探针检测A(H3N2)亚型流感病毒E119V耐药突变的双重rRT-PCR方法,该方法灵敏、特异、重复性好,实验过程和结果判读简单易操作. 相似文献
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目的: 植体周围一定程度的骨丧失可能会给牙种植治疗的美观效果带来不利影响。这种情况可能更容易影响软组织水平(Tissue-Level, TL)设计,因此,当强调形态的美观自然性时,骨组织水平(Bone-Level, BL)设计可能更有优势。除了植体的设计,牙龈生物型也被认为是维持牙槽骨稳定的重要因素。本研究拟针对具有不同牙龈生物型的患者,在其美学区域行软组织水平和骨水平牙种植治疗,探究其骨丧失的程度。材料和方法: 对41位患者行20个TL和22个BL种植治疗,术后即刻、术后随访对这42个位点行口内影像学检查;运用计算机技术行牙槽骨高度测量分析;运用TRAN法鉴定患者的牙龈生物型。结果: TL组平均4.9年的存留期里,厚龈型的12颗植体周围平均骨丧失0.21mm(SD:0.43mm);薄龈型的8颗植体周围平均骨丧失0.05mm(SD:0.47mm;P=0.31)。BL组平均1.9年的存留期里,厚龈型的14颗植体周围骨丧失为-0.03mm(SD:0.38mm),薄龈型的8颗植体周围骨丧失为+0.09mm(SD:0.32mm;P=0.84)。结论: 分析得到的数据发现,牙槽骨高度的变化与种植设计或是牙龈生物型并无直接相关性。然而在选择种植设计之前,评价软组织的厚度是有利的,其中BL种植设计更能获得自然的外形。为实现以上评价目的,TRAN法是最快速、简易的方法。 相似文献
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目的:探讨人类白细胞抗原HLA DRB1等位基因与广东汉族人群甲真菌病的关联性。方法:纳入64例广东汉族甲真菌病患者(包括10例红色毛癣菌甲癣患者)以及64例健康对照者,采用聚合酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术,对研究对象全血基因DNA进行HLA DRB等位基因分型,比较等位基因频率,分析甲真菌病与HLA基因多态性的关系。结果:甲真菌病患者HLA-DRB1*10基因频率高于健康对照组( X2=5.10,P<0.05)。红色毛癣菌感染的甲癣患者组HLA DRB1*12基因频率低于健康对照组( X2=4.70,P<0.05)。结论:HLA-DRB1*10等位基因可能是广东汉族人群甲真菌病遗传易感基因,而HLA-DRB1*12等位基因可能是红色毛癣菌感染的甲真菌病患者的保护性基因,HLA基因多态性与甲真菌病的发生可能存在遗传免疫关联性。 相似文献
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中国H3N2亚型流感病毒烷胺类药物耐药性研究 总被引:7,自引:0,他引:7
目的 通过监测我国自1989年以来H3N2亚型流感病毒对烷胺类药物产生耐药性的情况,为流感的临床治疗用药提供一定的指导.方法 从我国流感监测网络中所分离的H3N2亚型流感病毒中随机选择了584株病毒,通过对病毒与烷胺类药物耐药性相关的M2基因进行序列测定,同时在细胞水平上通过药物敏感试验分析病毒对药物的敏感性,从而分析病毒产生耐药的情况.结果 1989-1999年没有发现对烷胺类药物产生耐药性病毒株,但2003年对烷胺类药物产生耐药性病毒株的比例从2002年的3.4%升到了56.0%,2005年达到77.6%.结论 自2003年以后,流行的H3N2亚型流感病毒超过50%的病毒产生了对烷胺类药物的耐药性,并且耐药病毒株的比例呈逐年升高的趋势. 相似文献
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本综述对于在修复治疗过程中使用的排龈剂进行了综合概述,并介绍了牙医在临床使用时可能遇到的问题。止血剂对于成功的排龈和止血具有重要作用,然而,牙医必要了解止血剂对于修复治疗过程和口腔组织有大量的负面影响。本综述通过以下关键词及其各种组合:“止血剂(hemostatic agents)”、“收敛剂(astringency,astringent)”、“肾上腺素(epinephrine)”、“硫酸铁(ferric sulfate)”、“氯化铝(aluminium chloride)”、“出血控制(hemorrhage control)”、“软组织(soft tissue)”、 “牙体硬组织(hard dental tissue)”、“自酸蚀粘结(self-etch adhesive)”、“全酸蚀粘结(total-etch adhesive)”、“粘结力(bond strength)”、“印模(impression)”、“石膏(gypsum)”、“石膏模型(plaster cast)”和“牙科印模(dental cast)”,在Pubmed 和Google Scholar数据库检索并收集截止至2017(包括2017)已发表的文献。过去30年来,临床牙医使用的止血剂从肾上腺素转变为现在最常用的收敛剂,如氯化铝AlCl3,和硫酸铁Fe2(SO4)3。所有已知的止血剂都会导致一些局部的、暂时的牙龈组织损伤,其中只有肾上腺素被认为可能导致全身性副作用。关于止血剂对印模材料的影响的研究结果十分矛盾,止血剂可能会影响印模材料的聚合反应,但研究可能缺乏标准化的研究方法。止血剂可能通过影响牙本质表面性质,使其更能抵抗酸蚀。因此,相较于全酸蚀粘结剂,酸性更弱的自酸蚀粘结剂对于更抗酸蚀的牙本质来说可能粘结强度不足。 相似文献
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老公是个"闷葫芦"下夜班,已经是夜里11点了。推开家门,看到客厅里杯盘狼藉,老公张波斜躺在沙发看电视,茶几上的烟灰缸里,烟蒂堆得满满的,烟灰散落得到处都是。我气不打一处来:"张波,你怎么回事啊,碗也不洗,只会躺在沙发上看电视。难道还要等着我回家来帮你们收拾吗?"我的话好像是在对牛弹琴,张波对我的话丝毫没有反应。他正在看的是韩国电影《happy end》(快乐到死)。素有"韩国周润发"之称的偶像明星崔民植演的也是个"闷葫芦"老公,这两个"闷葫芦"还真对上眼了。我最气张波的就是这点,他不跟你吵不跟你闹,脸上什么表情都没有。"这个家也有你的份,干嘛什么活都等着我来做呢?如果我死了你怎么办?"见老公不理睬我,我更生气了,一把夺过他手中的遥控器,把电视和DVD机都关了,冲着他大吼:"你有没有在听我说话?你是 相似文献
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H5N1禽流感病毒NS1蛋白与干扰素诱导蛋白10表达的相关性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究高致病性禽流感(HPAI)H5N1病毒NS1蛋白对干扰素诱导蛋白10(IP-10)的影响.方法 分别将禽流感病毒A/Anhui/1/2005(H5N1)的NS1基因、插入80-84位缺失氨基酸的NS1突变基因及流感病毒A/Puerto Rico/8/1934(H1N1)的NS1基因克隆至真核表达载体pEGFP-N1,转染人支气管上皮细胞BEAS-2B,流式细胞仪检测转染细胞内IP-10的表达情况.结果 与pEGFP-N1对照组相比,三种NS1蛋白均能下调BEAS-2B细胞IP-10的表达(P<0.01),但三者之间下调程度差异无统计学意义(P>0.01).结论 A/Anhui/1/2005(H5N1)禽流感病毒单一NS1蛋白能够抑制BEAS-2B细胞IP-10表达,但这并不能完全阐明其与病毒致病性之间的关系. 相似文献
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目的 研究1983-2013年间B型流感病毒的重配变异情况.方法 对GenBank数据库中1983-2013年间具有8个片段全基因组序列的B型流感病毒进行分析,利用Simplot软件筛选重配病毒,利用MEGA软件进行系统进化分析验证重配病毒.结果 获得432株B型流感病毒的全基因组序列,在66株代表病毒中,共计发现了22株重配株,其中9个为系内重配,13个为系间重配.在9个系内重配病毒中,2个B/Vic-87系内重配,7个B/Yam-88系内重配.Simplot软件结果和MEGA软件验证结果相似.结论 B型流感病毒间的重配事件频繁发生,既存在系内重配,也存在两系间的重配.Simplot软件可以用于快速筛选B型流感重配病毒. 相似文献
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人感染高致病性禽流感病毒H5N1核酸检测方法的建立及应用 总被引:9,自引:0,他引:9
目的 建立人感染高致病性禽流感病毒H5N1的核酸检测方法,用于人感染高致病性禽流感病毒疑似病例临床标本的检测.方法 针对甲型流感病毒保守基因M设计RT-PCR和real-time PCR引物检测是否为甲型流感病毒,同时针对H5N1禽流感病毒设计针对H5和N1基因的特异性RT-PCR和real-time PCR引物作亚型检测,建立禽流感H5N1病毒RT-PCR和real-time PCR检测方法.结果 本研究建立的RT-PCR和real-time PCR方法可以特异性地检测H5N1病毒,并且与人流感病毒H1、H3没有交叉反应.RT-PCR检测方法灵敏度可到1TCID50,real-time PCR灵敏度可达0.01TCID50.利用上述方法检测人感染高致病性禽流感病毒H5N1疑似病例临床标本,从42例不明原因肺炎病例中检测出阳性标本13例.结论 本研究建立的RT-PCR和real-time PCR方法可以用于人感染高致病性禽流感病毒H5N1临床标本的实验室检测. 相似文献