健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究＊

目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响，从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制。方法 培养HCT116细胞，细胞设3组：对照组，健脾消癌方组（加入15%健脾消癌方含药血清）及人参皂苷Rg3组；制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液（分组及制备方法见实验方法），用条件培养液干预HUVEC（脐静脉内皮细胞，Human Umbilical Vein Endothelial Cells），Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。随后采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、VEGF（血管内皮生长因子，Vascular endothelial growth factor）蛋白表达。最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响，并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况。结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加（P<0.05）；健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少（P<0.01）。p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组（P<0.05），健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组（P<0.01）；PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义。与对照组比较，模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加，差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长，其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关。     

疏凿饮子加减治疗早期恶性腹腔积液65例

腹腔积液是恶性肿瘤患者临床上常见的并发症，笔者2012年10月-2013年8月应用疏凿饮子加减治疗早期恶性腹腔积液患者65例，疗效满意，现报告如下。     

蒋益兰教授从“虚、瘀、毒”论治大肠癌经验

蒋益兰教授认为"脾虚、瘀积、岩毒"并存是大肠癌发病的基本病机特点,瘀毒未尽合并正气不足是大肠癌术后复发转移的主要病机;强调分期论治,以健脾益气法贯穿全程;重视身心合调和内外合治;灵活应用虫类药及活血化瘀药;以自拟"健脾消癌方"应用于临床20余年,取得了较好的临床疗效。     

中药配合介入化疗治疗中晚期原发性肝癌35例

笔者对原发性肝癌进行了长期的临床研究与探索,总结出了健脾益肾、和胃降逆、化瘀解毒的治疗方法,并将该方法配合介入化疗,共治疗本病35例（治疗组）,取得了较好的协同疗效,并与采用介入治疗的30例（对照组）进行了对照观察,现报告如下。     

中医外治法治疗大肠癌概况

大肠癌（CRC）是结肠癌、直肠癌的总称,为最常见的消化道恶性肿瘤之一。据统计,全世界大肠癌的发病率为恶性肿瘤的第3位。在发达国家,大肠癌发病率位于第2位;在我国,大肠癌发病率占恶性肿瘤的第4位。中医文献中虽无大肠癌的病名,但有“肠覃”、“肠风”、“脏毒”等类似肠道肿瘤的记载。我国CRC的发病率近年来呈逐渐上升的趋势,手术切除为公认的主要治疗手段,但后期放疗、化疗对身体伤害大,对于不能手术或带瘤生存的患者,则生活质量较差,     

鼻咽癌干细胞增殖特征及细胞周期相关蛋白表达水平研究

目的　研究鼻咽癌干细胞的增殖特征并初步探讨其分子机制。方法　采用无血清悬浮培养法从鼻咽癌细胞CNE2和5-8F获得鼻咽癌干细胞CNE2-SC、5-8F-SC,分别采用细胞存活率分析计数器、细胞平板克隆形成试验观察鼻咽癌干细胞的增殖特性和克隆形成能力,Western blot法检测细胞周期相关蛋白表达水平。结果　鼻咽癌干细胞比其来源的鼻咽癌细胞增殖速度显著降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。鼻咽癌干细胞克隆形成率显著高于其来源鼻咽癌细胞（P＜0.01）,但肿瘤干细胞克隆显著小于其来源细胞。与普通鼻咽癌细胞比较,鼻咽癌干细胞的细胞周期蛋白CylinD1、CylinD3及细胞周期调控蛋白CDK2、CDK4、CDK6的表达水平显著下调（P＜0.01）。结论　鼻咽癌干细胞比其来源的鼻咽癌细胞生长增殖缓慢,可能与其细胞周期蛋白和周期蛋白依赖激酶表达水平下调有关。     

健脾消癌方干预结肠癌细胞外泌体MIF调控肝Kupffer细胞TGF-β1表达的研究

目的 通过细胞实验研究健脾消癌方干预结肠癌细胞外泌体(CT26-exo)中巨噬细胞迁移抑制因子(MIF)对肝Kupffer细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法 采用CT26-exo干预肝Kupffer细胞,反转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝Kupffer细胞中TGF-β1 mRNA表达;进一步采用小干扰核糖核酸(siRNA)干扰技术敲低CT26细胞MIF基因表达后,用其外泌体干预Kupffer细胞,RT-PCR及酶联免疫吸附测定(ELISA)检测Kupffer细胞TGF-β1表达;用不同浓度的健脾消癌方含药血清干预后,采用RT-PCR及蛋白免疫印迹法(WB)检测CT26细胞及其外泌体中MIF表达;用含药血清干预后的CT26-exo干预Kupffer细胞,RT-PCR及ELISA检测Kupffer细胞TGF-β1表达量。结果 CT26-exo干预后,小鼠Kupffer细胞TGF-β1 mRNA表达升高(P<0.05);敲低CT26细胞MIF基因表达后,其外泌体对Kupffer细胞中TGF-β1的上调作用减弱(P<0.05);20%的健脾消癌方含药...     

健脾消癌饮治疗晚期胃癌52例临床观察

本文采用随机分组的方法，报道两组治疗晚期胃癌共８２例，其中中药组５２例，治以健脾化瘀解毒，用自拟健脾消癌饮治疗；化疗组３０例用ＦＡＭ方案化疗，结果有效率中药组为８４．５％，化疗组为７０．０％。１、３、５年生存率中药组为８６．６％、５３、１％、３４．０％，化疗组为８０．０％、４２．５％、１５．７％。提示中医药治疗晚期胃癌疗效肯定，无毒副反应，并能改善症状，延长生存期，提高生活质量。     

基于中医传承辅助平台挖掘黎月恒教授治疗中晚期肺癌用药规律

目的 挖掘黎月恒教授治疗中晚期肺癌的用药经验并分析组方规律,为新方研发提供参考。方法 收集黎月恒教授治疗中晚期肺癌患者的中药处方663首,建立方剂数据库,采用中医传承辅助平台（V2.5）进行频次统计、组方规律和新方分析。结果 663首方剂中,使用频次>100次的药物有36味,挖掘出20个核心药物组合和10个潜在新方。结论 黎月恒教授治疗中晚期肺癌以益气养阴、健脾行气为主,兼顾清热解毒。利用无监督的数字挖掘系统,可有效、快速、全面、客观地分析黎月恒教授治疗中晚期肺癌的理论思想以及用药特色,实现名中医的经验传播。