LBL与PBL相结合的教学法在生物制药工艺学教学中的应用研究

为了提高生物制药工艺学课程的教学质量。将LBL教学法主要应用于分离纯化技术的理论授课,PBL教学法主要应用于各类生物药物具体生产工艺的讲授。这种相结合的教学模式可以提高学生的自学能力、语言表达能力,培养学习兴趣。因此,在教学改革实践不断深入的背景下,重视PBL和LBL在生物制药工艺学课程教学中的有机结合可以增强教学效果和学生的综合水平。     

响应面法优化金果榄多糖提取工艺及抗氧化活性研究

目的研究复合酶提取金果榄多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法复合酶种类及配比为纤维素酶∶果胶酶∶木瓜蛋白酶=1∶1∶1,液料比固定为20 mL/g,以金果榄多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、复合酶添加量、酶解温度为自变量,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺;采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力体系评价金果榄多糖体外抗氧化活性。结果金果榄多糖最佳提取条件为:酶解pH值5.1,酶解时间56 min,复合酶添加量2.0%,酶解温度52℃。在此条件下多糖得率为14.03%,与理论值14.12%的相对误差5%。酶解温度对多糖得率影响最显著,酶解时间、酶解pH值次之,酶添加量影响最小。金果榄多糖对DPPH、·OH、O2_~-·清除的半数抑制浓度分别为1.358、0.927、1.096 mg/mL,与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论本研究优选的金果榄多糖复合酶法提取工艺方便可行,酶解得到的多糖具有较强的体外抗氧化活性。     

SIRT3介导褪黑激素保护帕金森病多巴胺能神经元的作用机制

目的研究SIRT3在褪黑激素保护帕金森病(Parkinson’s disease,PD)多巴胺能神经元中的作用。方法48只小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,治疗组小鼠给予褪黑激素(10 mg·kg-1)和MPTP(30 mg·kg-1)腹腔注射,模型组小鼠给予MPTP腹腔注射,对照组小鼠同时给予等量生理盐水,褪黑激素连续给药14 d。采用免疫组化分析黑质TH、Iba-1表达情况,ELISA法检测中脑组织氧化应激指标(ROS、MDA、SOD)及炎症因子(TNF-α、IL-1β)水平,实时定量PCR分析SIRT3 mRNA水平,免疫荧光和Western blot检测蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠黑质TH表达减少、Iba-1表达增多,中脑组织氧化应激与炎症损伤明显增强,黑质SIRT3 mRNA和蛋白表达水平明显降低,SOD2蛋白表达减少,iNOS蛋白表达增多,组间比较差异均具有统计学意义( P <0.05)。治疗组小鼠经褪黑激素干预后,TH表达增多、Iba-1表达减少,氧化应激与炎症损伤明显减弱,SIRT3 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD2蛋白表达上调,iNOS蛋白表达下调,与模型组比较,差异均具有统计学意义( P <0.05)。 结论 褪黑激素通过上调SIRT3表达抵抗PD多巴胺能神经元损伤,作用机制与其抑制小胶质细胞激活减轻氧化应激和炎症损伤有关。