持续静压力环境下MC3T3-E1细胞的基因测序分析

目的：通过对持续静压力环境下MC3T3-E1细胞的基因测序,筛选出Hub基因并分析其与骨质疏松症相关性。方法 ：采用MTT检测细胞增殖和免疫荧光检测细胞骨架蛋白,筛选出最佳实验条件。用TRIzol法提取RNA与基因测序,通过Mfuzz聚类、富集分析、GSVA分析,利用NCBI GEO数据库、Genecards数据库、molecular signatures database数据库,分析对比持续静压力环境下MC3T3-E1细胞差异表达基因,筛选Hub基因,对比分析其与骨质疏松症信号通路关联的分子学机制。结果：在持续静压力环境下,MC3T3-E1细胞增殖显著降低,在1.0 MPa处理8 h和0.5 MPa处理24 h细胞模型组的细胞骨架中,微管蛋白和肌动蛋白的抑制作用显著。通过空白组与模型组基因测序对比后发现29 164个差异基因,其中14 489个上调、14 675个下调。这些差异基因涉及1 658个GO功能,包括1 096 GO＿BP（生物过程）,255 GO＿CC（细胞组分）,307 GO＿MF（分子功能）,MC3T3-E1细胞在持续静压力作用下受到差异基因调控的信号转导通路有305...     

基于拟靶标代谢组学考察不同煎煮方式对大黄功效组分煎出的影响

目的采用拟靶标代谢组学的研究方法揭示不同煎煮时间和不同煎煮温度对大黄煎出的蒽醌类、蒽酮类及鞣质类等化学成分的影响,为大黄临床用药提供依据。方法利用线性离子阱-静电场轨道阱质谱(LTQ-Orbitrap MSⁿ)准确挖掘大黄各类化学成分的特征离子,通过特征离子确定尽量多的化学成分离子对,利用三重四级杆-质谱(QQQ-MS)的多反应监测(MRM)模式获取各种成分的峰面积,采用多元统计分析结合配对t检验比较不同煎煮方式对大黄煎出化学成分的影响。结果煎煮时间和煎煮温度对大黄煎出化学成分均有影响,短时间煎煮(15 min)有利于双蒽酮苷类和蒽醌苷类成分煎出,长时间煎煮(60 min)则利于鞣质类成分煎出;与沸水浸泡相比,沸水煎煮有利于蒽醌类、鞣质类成分煎出。结论采用拟靶标代谢组学的方法,明确指出了短时间煎煮或浸泡利于大黄泻下功效的发挥,长时间沸水煎煮利于清热解毒功效的发挥,为大黄的临床应用提供了参考。     

经典名方当归四逆汤物质基准的关键质量属性传递规律分析

[目的] 探究当归四逆汤（DSD）物质基准关键质量属性的传递规律。[方法] 制备15批DSD冻干粉作为物质基准样品,测定多指标性成分含量、特征图谱及干膏率,并计算上述指标在药材-饮片-水煎液-物质基准传递过程中的转移率。[结果] 指标性成分藁本内酯、桂皮醛、肉桂酸、芍药苷、细辛脂素和甘草酸在药材-物质基准中转移率范围分别为：0.65%~1.18%、0.08%~0.30%、10.40%~37.05%、23.96%~48.18%、0.83%~1.32%、4.94%~11.83%;特征图谱共指认20个特征峰,在传递过程中无丢失,多数特征峰相对峰面积的转移率在平均值的70%~130%范围;15批物质基准的干膏率转移率为47.87%~61.53%。[结论] DSD物质基准的关键质量属性可在药材-饮片-水煎液-物质基准中稳定传递,文章初步构建了DSD物质基准的全过程质量控制体系,为后续复方制剂的开发提供数据支撑。     

基于Citespace分析中医药治疗骨质疏松症的研究热点和趋势

目的：基于Citespace对中医药治疗骨质疏松症(osteoporosis, OP)的中文文献进行研究现状、研究热点及前沿展示与分析。方法：检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普中文期刊服务平台等数据库2000—2021年发表的中医药治疗OP的相关文献,统计发文量、文章发表年度及发表期刊;使用Citespace 5.8.R2软件对文献共现网络和关键词进行可视化分析。结果：共纳入文献6 613篇,2000—2021年发文量总体呈增长趋势,共有585本期刊收录了中医药治疗OP的相关文章,中国骨质疏松杂志发文量为875篇。发文量最高的作者为郑洪新(82篇),高产作者之间存在合作关系,形成了以郑洪新团队为代表的核心团队,中介中心性>0的作者共23位。涉及589个科研机构,形成了以中医院校为代表的研究机构,中介中心性>0的机构55个。关键词共现分析发现有骨质疏松、老年、中医药、补肾药、骨钙素等192个关键词,对其聚类分析发现骨质疏松、成骨细胞、动物、中医中药、药理作用等13个关键词聚类标签;关键词突现分析发现25个突现词,实验研究、动物等是突现时间较早的关键词,信号通路、中医药等...     

经典名方桃核承气汤物质基准关键质量属性研究

目的建立桃核承气汤(Taohe Chengqi Decoction,TCD)物质基准的HPLC特征图谱及指标成分含量测定方法,阐明TCD物质基准的关键质量属性,构建其质量控制体系。方法特征图谱1,色谱柱为Diamonsil钻石二代C₁₈色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,体积流量为1.0 mL/min,梯度洗脱,进样量为10μL,柱温30℃,检测波长为254 nm;特征图谱2,色谱柱为Diamonsil钻石一代C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相,体积流量为1.0 mL/min,梯度洗脱,进样量为10μL,柱温35℃,检测波长为210 nm。结果根据方中成分的极性差异,建立2张特征图谱,结果显示,15批TCD物质基准相似度分别为0.928～0.992和0.809～0.995,共确定32个特征峰,并指认苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸铵、芦荟大黄素、大黄酸5个共有成分。15批TCD物质基准的平均出膏率为19.10%,苦杏仁苷、甘草酸铵、桂皮醛、芦荟大黄素、大黄酸的...     

代谢组学和蛋白组学在骨质疏松研究中的应用

骨质疏松症(osteoporosis, OP)是以全身骨密度降低和骨组织微结构退化为特征的慢性骨骼疾病。骨质疏松症已成为一个严重的社会问题而备受广泛关注。近年来，国内外学者通过蛋白组学及代谢组学探究骨质疏松症的发病机制、诊断及防治，虽已取得初步进展，但研究不够系统、完善。笔者查阅相关文献，将对代谢组学和蛋白组学在骨质疏松症中的应用进行对比分析，并对骨质疏松症研究进展进行综述，以期为骨质疏松症的发病机制、诊断及防治提供理论参考。