吡喹酮压力下日本血吸虫耐药性的诱导和虫体差异表达蛋白的分析

目的 分析经吡喹酮(PZQ)半数有效量(ED₅₀)诱导虫体与未诱导虫体之间的差异表达蛋白,为阐明PZQ的作用机制,探索候选疫苗靶抗原及药物治疗靶点,提供实验依据。方法 应用PZQ ED₅₀(25.98 mg/kg),对单性感染4周后ICR鼠连续灌胃给药30 d,停药21 d后,再给予治疗剂量(200 mg/kg)连续灌胃5 d,肝门静脉灌注法收集成虫体外培养,观察虫体对PZQ的敏感性。收集诱导虫体和未诱导虫体,利用2D-DIGE分离差异蛋白,并予MALDI-TOF- MS鉴定,进而在线Uniprot软件检索差异蛋白功能。结果 诱导成虫在8倍未诱导成虫临界致死浓度(112 μmol/L)PZQ作用下,仍有75.6%存活率,与未诱导成虫临界致死浓度组相比差异有统计学意义(P<0.05)。诱导虫体和未诱导虫体共确认有30个差异表达蛋白,其中12个蛋白表达上调,18个蛋白表达下调,主要是细胞骨架相关蛋白、细胞中参与糖代谢和能量代谢的酶类、氧化还原酶类以及应激蛋白和参与解毒代谢的蛋白酶等。结论 诱导虫体对PZQ敏感性下降显著,显示出明显的耐受性。诱导后,蛋白表达上调或下调提示PZQ诱导促进或抑制了某些特定基因的表达。为深入阐明PZQ作用机制,探索新的疫苗候选抗原及药物治疗的靶点,提供科学依据,同时为研发抗血吸虫新药开拓新途径和新思路。     

泛素连接酶Pirh2与恶性肿瘤相关性的研究进展

泛素连接酶Pirh2(p53-induced RING-H2 protein)是一种具有E3连接酶活性的新蛋白,能促进p53发生泛素化而降解,从而使p53抑制肿瘤生长的功能减弱或消失,导致肿瘤发生和进一步恶化。近年来研究发现,多种恶性肿瘤中Pirh2蛋白的表达量有明显变化,这提示Pirh2在恶性肿瘤的发生、发展中可能具有重要的作用;Pirh2可能作为一个癌基因,在肿瘤发生过程中调节一些信号转导通路。因此,推测Pirh2可作为肿瘤基因治疗的一个潜在靶点。本文就Pirh2与恶性肿瘤相关性的最新研究进展作一简要综述。     

乏氧诱导因子促进肿瘤侵袭转移的研究进展

肿瘤细胞在乏氧环境中会发生一系列生物学行为的改变，包括肿瘤侵袭性和转移能力的增加，其中乏氧诱导因子1α（hypoxia induciactor 1α, HIF1α）起关键作用。HIF1α可作用于多个环节促进肿瘤转移。在细胞运动方面：肝细胞生长因子(HGF)的受体cMet在乏氧时增加，能促进细胞活动性并通过与肝细胞生长因子结合而增加细胞的侵袭性；基质降解方面：肿瘤细胞侵袭转移能力与其产生或诱导MMPs的能力密切相关，HIF1可引起MMPs的表达增加，进而促进恶性肿瘤的转移；细胞黏附方面：HIF1     

shRNA干扰HIF-1α对人宫颈癌细胞黏附分子表达的影响

目的在细胞和移植瘤水平研究shRNA干扰低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)对宫颈腺癌HeLa细胞中黏附分子CD44v6及上皮型钙黏素(E-cadherin)表达的影响.方法将人宫颈癌Hela细胞株(记为H0细胞)、转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞株(记为H1细胞)及转染HIF-1α-shRNA质粒的HeLa细胞株(记为H2细胞)分别行常氧培养及低氧(1%O2)培养,应用Western blotting检测每组HeLa细胞中HIF-1α、CD44v6、E-cadherin及β连接素(β-catenin)在细胞水平的表达情况,应用免疫组织化学法检测HIF-1α、CD44v6、E-cadherin及β-catenin在上述3种HeLa细胞裸鼠移植瘤模型瘤组织水平的表达情况.结果Western blotting分析显示,H0和H1细胞低氧组检测到HIF-1α、β-catenin、CD44v6蛋白呈强阳性,而E-cadherin表达减弱;常氧状态下H0、H1和H2组及低氧下H2组HIF-1α无表达、E-cadherin表达呈阳性.免疫组化分析发现H0及H1组移植瘤组织中HIF-1α、E-cadherin、β-catenin及CIM4v6的表达分别为0.651±0.057、0.198±0.015、0.465±0.061及0.687±0.102,0.671±0.069、0.201±0.020、0.452±0.038及0.701±0.071,H2组分别为0.194±0.023、0.548±0.045、0.421±0.052及0.187±0.057,H2组与H0和H1组间HIF-1α、E-cadherin、及CD44v6表达的差异有统计学意义(P＜0.05);相关性分析提示HIF-1α与E-cadherin、CD44v6的表达有一定相关性.结论通过shRNA干扰抑制人宫颈癌HeLa细胞HIF-1α,可一定程度上下调低氧环境中宫颈癌HeLa细胞黏附分子CD44v6及上调E-cadherin的表达.     

RNA干扰HIF-1α对人子宫颈癌裸鼠移植瘤多药耐药相关蛋白表达的影响

目的 通过RNA干扰技术沉默人子宫颈癌HeLa细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,在细胞及移植瘤水平研究低氧对子宫颈癌HeLa细胞多药耐药的影响.方法 ①将人子宫颈癌HeLa细胞株(记为HO细胞)、转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞株(记为H1细胞)及转染HIF-1α-shRNA质粒的Hel.a细胞株(记为H2细胞)分别行不同时间低氧培养,应用免疫印迹法分析每组HeLa细胞中HIF-1α及多药耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)在蛋白水平的表达情况.②应用免疫组织化学法检测HIF-1α及P-gp在上述3种HeLa细胞裸鼠移植瘤模型组织水平的表达情况.结果 ①免疫印迹法检测发现H0和H1组低氧24 h后HIF-1α、p-gp呈强阳性表达,常氧状态下HO、H1和H2组及低氧24 h后H2组未见HIF-1α表达,P-gp呈弱阳性表达.②HO、H1、H2组移植瘤中HIF-1α的平均吸光度值分别为(0.550 8±0.077 1)、(0.573 1±0.053 8)、(0.1701±0.088 4),P-gp的平均吸光度值分别为(0.697 62±0.114 0)、(0.696 4±0.107 2)、(0.213 8±0.035 1).结论 RNA干扰技术沉默人子宫颈癌HeLa细胞低氧诱导因子HIF-1α,可显著降低人子宫颈癌HeLa细胞中H1F-1α及P-gp表达,且二者有明显的相关性.     

中央型小细胞肺癌与肺鳞癌CT征象分析

目的 分析中央型小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)及肺鳞癌(squamous carcinoma,SC)的CT表现,探讨各自影像学特点及鉴别诊断价值.方法 选取2019年1月～2019年12月在我院经病理证实的SCLC及SC患者的临床及影像学资料,分为SCLC组30例,SC组31例,对...     

全身化疗联合肝动脉栓塞化疗治疗乳腺癌术后肝转移的临床疗效观察

目的:探讨全身化疗联合肝动脉栓塞化疗治疗乳腺癌术后肝转移的临床疗效及毒副反应。方法:对62例乳腺癌患者分别采用全身化疗或全身化疗联合肝动脉栓塞化疗,比较其疗效。结果:62例患者中总有效率(OR)为51.6%,其中,全身化疗组的客观有效率(RR)为37.0%,全身化疗加肝动脉栓塞化疗的患者客观有效率(RR)为62.9%,联合治疗组的疗效明显好于单纯化疗组(P<0.05)。总中位生存期为17个月,其中,全身化疗组中位生存期为15个月,全身化疗加TACE组中位生存期为22个月,两者的生存期有显著差异(P<0.05)。主要毒副反应为骨髓抑制和胃肠道反应。结论:全身化疗联合肝动脉栓塞化疗治疗乳腺癌肝转移疗效显著,毒副作用小,可以作为乳腺癌肝转移综合治疗中的主要治疗手段。     

Real-time PCR法用于日本血吸虫感染宿主血清DNA的定量检测及其感染度的评价

目的以日本血吸虫高度重复序列-逆转录转座子SjR2为靶序列,建立TaqMan实时定量PCR法检测宿主血清中的日本血吸虫DNA用于评价感染度。方法以real-timePCR法检测不同感染度的家兔模型血清DNA。结果该法具有高度的敏感性和特异性,可以检测到44．7拷贝的重组质粒DNA。在感染家兔后的3d到7周血清中均能检测到血吸虫DNA,不同感染度早期检测的时间节点及其检测阈值分别为,家兔感染30条尾蚴（EPG=14）需在感染后2周才能检测到目的DNA,其含量为119．03拷贝,感染50条尾蚴（EPG=24）、感染100条尾蚴（EPG=48）则在感染后1周可检测到目的DNA,其含量分别为54．36拷贝和72．24拷贝,在家兔感染200条尾蚴（EPG=97）、感染500条尾蚴（EPG=232）最早在感染后3d即可检测到目的DNA,其含量分别为60．34拷贝和142．47拷贝。日本血吸虫感染宿主血清DNA水平与感染度呈正相关,即血清DNA浓度随感染度的增大而上升。结论本研究所建立的real-timePCR法可定量检测血清DNA动态变化并对日本血吸虫病诊断及感染度的评价具有潜在的应用价值,为日本血吸虫病诊断与疗效考核提供了新方法。     

浅析AS用法

英语中许多单词都具有一词多种含意和一词多种作用的特点,as就是其中之一。As一词可以被用作副词、连词、介词和代词。词性不同,其作用也不一样。本文旨在探讨as一词的各种作用及不同含意。     

运用阅读技巧 提高阅读能力

近年来,许多阅读材料已将阅读技巧的培养作为主要目标。在外语阅读教学中重点培养学生的阅读