注射用血塞通(冻干)对家兔下腔静脉血栓的抑制作用研究

目的 观察注射用血塞通（冻干）对电刺激所致家兔下腔静脉血栓形成的影响,并对其作用机制进行探讨。方法 使用电刺激伴狭窄法制备家兔下腔静脉血栓模型,造模1 h后,连续5天iv给予5、10、20 mg/kg的注射用血塞通（冻干）、sc给予100 U/kg的低分子肝素钠注射液,最后一次给药1 h后测定家兔出血时间和出血量,颈动脉取血分离血浆,试剂盒法检测活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）以及纤维蛋白原（FIa）水平,ELISA试剂盒法检测血浆内凝血因子FIIa、FXa、FXIa、抗凝血酶III（ATIII）、凝血因子TAT、活化蛋白C（APC）、组织性纤维溶酶激活剂（t-PA）、纤溶酶原（PLG）、尿激酶原（PROUK）、胰蛋白酶（Trypsin）、6-酮前列腺素F1a（6-keto-PGF1a）和血栓素B₂（TXB₂）水平;取血栓,测定血栓湿质量、干质量以及基质量。在血小板聚集实验中,制备家兔贫、富血小板血浆,分别以胶原（CG）、二磷酸腺苷二钠盐（ADP）和花生四烯酸钠（AA）为诱导剂,比浊法测定不同浓度血塞通对血小板聚集的影响。结果 家兔iv注射用血塞通（冻干）后,与模型组比较,血栓湿质量、干质量及基质量均显著降低,并具有一定的剂量依赖性;出血时间和出血量未出现明显增加,APTT、PT和TT也未出现明显变化;血浆内t-PA和6-keto-PGF1a水平显著增加,TXB₂水平显著降低,其他指标没有明显变化。在血小板聚集实验中,血塞通可以剂量依赖性地抑制由AA诱导的血小板聚集。结论 注射用血塞通（冻干）具有良好的抑制下腔静脉血栓作用,且无明显出血副作用,作用机制与增强纤溶活性、抑制血小板聚集和血管收缩有关。     

复方芩兰口服液的体内外成分分析和网络药理学研究

目的 采用液质联用技术对复方芩兰口服液的主要化学成分及其进入血液和组织中的成分进行鉴定,并选择主要的体内成分开展网络药理学研究,初步揭示其作用机制。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS结合MSE技术进行复方芩兰口服液、血液和组织样本分析,结合精确相对分子质量、保留时间、碎片离子、中性丢失等信息进行复方芩兰口服液的化学成分和体内成分鉴定。利用Cytoscape软件分别构建复方芩兰口服液主要体内成分与其功能主治（感冒、发热、咳嗽、咽痛）之间的“化合物-靶点”作用网络,开展核心靶点和作用通路分析,并采用实时荧光定量PCR对核心靶点中的3个热休克蛋白（HSP90AA1、HSP90AB1、HSPA8）进行生物学验证。结果 大鼠ig给药后在血液样本中检测到3个原型成分和9个代谢产物,组织样本中检测到3个原型成分和5个代谢产物,代谢产物主要为葡萄糖醛酸结合物。网络药理学研究结果提示复方芩兰口服液的作用通路主要与炎症和免疫相关,且生物学验证结果表明上呼吸道感染大鼠肺脏组织中HSP90AA1、HSP90AB1、HSPA8的m RNA表达在给予复方芩兰口服液后显著上调（P<0.01）。结论 利用UP...     

流动条件下血栓通胶囊抗血小板黏附的分子药理学机制研究

研究流动条件下血栓通胶囊(XST)抗血小板黏附的效应及其可能的作用机制。利用Bio Flux 1000控剪应力微流培养系统模拟体内流动条件,建立TNF-α诱导的血管内皮细胞损伤模型,动态实时观察XST(0.3 g·L-1)对血小板黏附于受损血管内皮细胞表面的影响。以Western blotting法测定血管内皮细胞VCAM-1的表达,以放射免疫法检测6-keto-PGF1α,TXB2的分泌。结果显示,生理和病理流动条件下XST均可抑制血小板黏附,抑制率分别为15.0%,34.1%;在病理低剪应力或静态条件下,XST能够明显抑制血管内皮细胞VCAM-1的表达和TXB2释放(P0.05)。该研究从血流/血管/血液相互作用的角度发现,XST可能通过内皮细胞保护途径,抑制血小板黏附,进而发挥其抗血栓形成的效应。在不同流动条件下,XST抗血小板黏附的效应有所不同,病理低剪应力更有利于XST药效的发挥。     

复方芩兰口服液防治副流感病毒感染药效学研究

目的:评价复方芩兰口服液防治副流感病毒感染的药效作用,并针对药效结果开展组织病理学、血清和肺组织匀浆免疫因子高通量筛选研究。方法:采用副流感病毒(仙台株)感染ICR小鼠模型,观察复方芩兰口服液对该模型小鼠的治疗作用,并探讨其对该模型小鼠肺组织病理改变、血清及肺组织免疫因子含量的影响。结果:复方芩兰口服液高剂量[22 mL/(kg·d)]能显著降低模型小鼠肺指数(P<005),高剂量[22 mL/(kg·d)]、中剂量[11 mL/(kg·d)]、低剂量[55 mL/(kg·d)]组肺指数抑制率分别为4947%、2968%、1846%,且抑制率显示出了量效关系;复方芩兰口服液高剂量[22 mL/(kg·d)]、中(11 mL/(kg·d)剂量可以显著改善模型小鼠肺支气管病变(P<005);复方芩兰口服液高剂量[22 mL/(kg·d)]可以显著降低血清免疫因子诱导蛋白-10（IP-10)、单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、RANTES、嗜酸性粒细胞趋化因子含量(P<005),中剂量[11 mL/(kg·d)]可以显著降低血清免疫因子MCP-3含量(P<005);复方芩兰口服液高剂量[22 mL/(kg·d)]可以显著降低肺组织免疫因子生长调节癌基因(GRO)-α、MCP-1、MCP-3、MIP-2、IP-10、MIP-1α、MIP-1β、RANTES含量(P<005),中剂量[11 mL/(kg·d)]可以显著降低肺组织免疫因子GRO-α、MCP-1、MCP-3、MIP-2含量(P<005),低剂量[55 mL/(kg·d)]可以显著降低肺组织免疫因子GRO-α含量(P<005)。结论:复方芩兰口服液对副流感病毒感染肺炎有一定的治疗作用,可以改善肺支气管病变,降低血清及肺组织免疫因子含量。     

小儿热速清糖浆抗流感病毒和抗菌作用研究

目的检测小儿热速清糖浆的抗病毒及抗菌作用。方法采用细胞培养法计算小儿热速清糖浆对病毒的半数抑制率,建立肺炎动物模型计算小儿热速清糖浆对肺炎小鼠肺指数和肺抑制率影响。采用试管二倍稀释法测定小儿热速清糖浆体外对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、乙型溶血性链球菌和表皮葡萄球菌最小抑菌浓度和累积抑菌率;体内实验检测小儿热速清糖浆对金黄色葡萄球菌感染小鼠死亡率的影响。结果小儿热速清糖浆体外抗病毒实验表明在稀释32倍时能完全抑制流感病毒、呼吸道合胞病毒致细胞病变;体内研究表明流行性感冒病毒所致肺炎小鼠20 m L/kg、40 m L/kg给药治疗作用明显(P0.05)。体外抗菌实验研究表明小儿热速清糖浆2倍稀释对6种细菌抑制率可达90%以上;金黄色葡萄球菌感染小鼠40 m L/kg给药能完全抑制其死亡。结论小儿热速清糖浆在体内外均具有一定的抗病毒及抑菌作用,能同时达到抗病毒及抗菌效果。     

刺五加注射液改善阿霉素诱导大鼠心脏收缩功能下降的作用研究

目的研究刺五加注射液对化疗药物阿霉素诱导心脏收缩功能下降的改善作用,为其临床应用提供实验依据。方法采用阿霉素诱导大鼠心脏毒性模型,造模方法为大鼠ip 2.5 mg/kg的盐酸阿霉素,每周注射1次,共6周,累积总药量15 mg/kg。刺五加注射液高、中、低剂量(200、100、50 mg/kg)组及阳性药参芪扶正注射液(25 m L/kg)组分别于阿霉素注射后立即尾静脉输注相应的药液,时长1 h,共6次。给药结束后测定大鼠心脏收缩功能参数包括射血分数(EF)、缩短分数(FS)、左室压最大上升速率(+LVdp/dtmax)以及心脏构型。免疫组化法测定心肌细胞凋亡率;化学法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)、脂质过氧化物(LPO)氧化应激因子水平,酶联免疫法测定凋亡相关蛋白表达水平;电镜下观察心肌组织的超微结构变化。结果与模型组相比,刺五加注射液50、100、200 mg/kg治疗后,可改善心脏收缩功能:使下降的EF、FS、+LVdp/dtmax均显著增加(P0.05、0.01);刺五加注射液可改善心脏构型:使扩张的收缩期的左室内径(LVIDs)明显缩短(P0.05、0.01);使扩张的收缩期的左室腔体积(LVVs)显著缩小(P0.05、0.01)。刺五加注射液可显著抑制阿霉素引起的心肌细胞凋亡(P0.01),使Bax/Bcl-2显著降低(P0.01)。刺五加注射液100、200 mg/kg可不同程度降低LPO、MDA生成量,提高SOD活性。结论刺五加注射液能有效缓解阿霉素诱导的大鼠心脏收缩功能下降,可增强心脏收缩功能、改善心脏构型,减轻心肌组织超微结构损伤,其机制可能与减轻氧化应激损伤、抑制受损心肌细胞凋亡有关。     

基于抑制血小板聚集活性检测的血栓通胶囊质量控制研究

通过建立血栓通胶囊(XST)体外抑制血小板聚集的生物活性测定法用于补充其质量控制方法。以体外抑制大鼠血小板聚集作用来考察血栓通胶囊的生物活性。以三七总皂苷、注射用血塞通冻干粉作为标准对照物质进行效价测定。研究结果发现血栓通胶囊对凝血酶诱导的血小板聚集具有显著抑制作用,并且呈现出剂量依赖关系。注射用血塞通冻干粉比三七总皂苷对照品体外抗血小板活性更稳定,适宜作为标准对照物质。采用"量反应平行线"法作为血栓通胶囊体外抗凝血酶诱导血小板聚集的生物效价检测方法,重复性较好(RSD 2.9%),样品检测结果均能通过可靠检验(偏离直线P>0.05,偏离平行P>0.05)。该研究建立的生物效价检测方法可以作为血栓通胶囊生物评价的质控方法之一。     

复方芩兰口服液对呼吸道病毒感染的药效作用

目的：考察复方芩兰口服液对甲型流感病毒肺炎、呼吸道合胞病毒肺炎、腺病毒咽炎的药效作用。方法：采用甲型流感病毒（A/FM/1/47(H1N1)）感染ICR小鼠肺炎模型,考察复方芩兰口服液对模型小鼠的死亡率、死亡抑制率、平均存活天数及生命延长率的影响,对肺组织及支气管病变的影响,以及对血清免疫因子的影响;采用腺病毒感染ICR小鼠咽炎模型,考察复方芩兰口服液对模型小鼠咽喉部黏膜组织病变的影响;采用呼吸道合胞病毒感染ICR小鼠肺炎模型,考察复方芩兰口服液对模型小鼠肺指数、肺组织及支气管病变、血清免疫因子及肺组织免疫因子的影响。结果：复方芩兰口服液对甲型流感病毒感染有一定的死亡保护作用,治疗给药可以改善肺组织及肺支气管病变、降低血清免疫因子水平;复方芩兰口服液对呼吸道合胞病毒感染有良好的预防作用,治疗给药可以改善肺组织及肺支气管病变、降低血清及肺组织免疫因子水平;复方芩兰口服液对腺病毒引起的咽炎有良好的治疗作用,可以改善咽部病变。结论：复方芩兰口服液对甲型流感病毒肺炎、呼吸道合胞病毒肺炎、腺病毒咽炎均有良好的疗效。     

刺五加注射液对化疗药物心脏损伤保护及辅助治疗的实验研究

目的 研究刺五加注射液对化疗药物阿霉素诱导心肌损伤的保护及助眠、抗抑郁作用,为其临床的辅助治疗应用提供实验依据。方法 1）大鼠ip 2.5 mg/kg的盐酸阿霉素,每周1次,连续6周,诱导大鼠心脏毒性模型;于阿霉素注射后立即尾静脉输注药液,时长1 h,共6次,对照组、模型组给予生理盐水,受试药组给予刺五加注射液（50、100、200 mg/kg,以总黄酮计）,阳性对照组给予参芪扶正注射液（25 mL/kg）;测定大鼠血清心肌酶、炎性因子,以及心肌组织病理改变。2）以地西泮（0.5 mg/kg）为阳性对照,测定刺五加注射液（30、60、120 mg/kg）对戊巴比妥钠阈剂量（45 mg/kg）及阈下剂量（30 mg/kg）致小鼠睡眠的影响。3）采用小鼠悬尾实验,以氟西汀（20 mg/kg）为阳性对照,测定刺五加注射液（30、60、120 mg/kg）对不动时间的影响,观察其抗抑郁作用。结果 与模型组比较,刺五加注射液50、100、200 mg/kg不同程度减轻心肌病理改变,减少心肌酶乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）漏出,除刺五加注射液50 mg/kg组CK-MB外,均差异显著（P<0.05）;可使IL-1β、IL-6、TNF-α水平不同程度降低,其中100、200 mg/kg组均差异显著（P<0.05、0.01）。与对照组比较,刺五加注射液30、60、120 mg/kg剂量相关性地显著缩短小鼠睡眠潜伏期（P<0.05、0.01、0.001）,120 mg/kg组显著延长睡眠时间（P<0.001）,60、120 mg/kg组显著增加入睡率（P<0.05、0.01）。与对照组比较,刺五加注射液各剂量组明显缩短小鼠悬尾不动时间（P<0.05、0.01）。结论 刺五加注射液对化疗药物阿霉素导致的心肌损伤治疗效果明显,而且能助眠、抗抑郁,这些作用对于恢复机体体力、促进健康有重要作用。     

基于抑制单核巨噬细胞增殖活性检测的注射用骨肽质量控制

目的:通过建立注射用骨肽抑制单核巨噬细胞(THP-1)增殖的生物活性测定法,以补充完善其质量控制方法。方法:采用CCK-8法以体外抑制THP-1增殖作用来考察注射用骨肽的生物活性。以A01160410批次注射用骨肽作为对照物质进行效价测定。结果:注射用骨肽对THP-1的增殖具有一定的抑制作用。采用量反应平行线(2·2)法作为注射用骨肽抑制THP-1增殖的生物效价检测方法,重复性较好,样品检测结果均能通过可靠性检验(回归P0.01,偏离平行P0.05)。A20160102批次注射用骨肽效价94.50 U·m L-1,可信限率(FL)=6.14%,可信限范围为88.87~100.47 U·m L-1;A01160401批次注射用骨肽效价为92.04 U·m L-1,FL=4.36%,可信限范围为88.12~96.15 U·m L-1;A01160406批次注射用骨肽效价为83.25 U·m L-1,FL=8.52%,可信限范围为76.46~90.65 U·m L-1。3个批次注射用骨肽实验结果合并分析结果显示,注射用骨肽抑制THP-1的效价为90.37 U·m L-1,FL=8.63%,可信限范围为82.91~98.51 U·m L-1。不同操作人员对注射用骨肽的效价测定结果没有明显差别,具有良好的可重复性。结论:该研究建立的生物效价检测方法可以补充作为注射用骨肽生物评价的质控方法之一。