重组人白介素10对低氧条件下人单核细胞凋亡变化规律的影响

目的 研究低氧条件下,重组人白介素10(rhIL-10)对人单核细胞白细胞(THP-1)凋亡和caspase-3活性变化规律的影响.方法 悬浮培养THP-1细胞株,分为正常对照组(常规培养);低氧(5%O2,5%CO2,90%N2)培养THP-1,rhIL-10以10、50、100 ng/mL的浓度干预,分为低氧对照组...     

除虫菊素含量分析法的改进

除虫菊素在除虫菊花或制剂中的含量分析方法,有容量分析法,即A.O.A.C.法(汞还原法),比色法,极谱分析法,色层分析法,纸上层析法,光谱分析法等。其中以容量分析法比较准确,世界各国多采用它。但这方法操作步骤多、费时久,在应用上感觉不便,最初一步提取手续,以石油醚用索氏抽出器抽提除虫菊素时,就须迴流八小时,因此有改进的必要,我们用一种改进抽出装置,经过多次试验,只须45     

RhoA-Rock信号通路抑制剂对缺氧人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白细胞骨架的影响

目的 用RhoA-Rock信号通路抑制剂探讨肺出血时肺微血管内皮细胞的调控因素.方法 人肺微血管内皮细胞常规培养,分为4组:对照组、抑制剂组、缺氧组和抑制剂缺氧组.异硫氰酸荧光素-鬼笔环肽与胞浆内丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)结合而发出红色荧光,共聚焦显微镜扫描观察F-actin的变化情况并记录相应荧光值.结果 细胞缺氧组1h、12 h和24h的F-actin平均荧光强度分别为对照组的(64.3±5.5)％、(60.3±4.2)％和(47.8±4.6)％;抑制剂缺氧组1h、12 h和24h分别为对照组的(66.2±3.2)％、(67.1±6.2)％和(72.5±6.1)％.细胞缺氧组缺氧1h后,F-actin平均荧光强度降低[(64.3±5.5)％],与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),至缺氧24h,F-actin含量已下降至对照组的(47.8±4.6)％,差异有统计学意义(P＜0.05).抑制剂缺氧组缺氧1h后,F-actin平均荧光强度较缺氧组1h有所升高,为对照组的(66.2±3.2)％,抑制剂组缺氧24h后F-actin平均荧光强度为对照组的(72.5±6.1)％,与缺氧组缺氧24h相比差异有统计学意义(P＜0.05).而抑制剂组不经缺氧的F-actin平均荧光强度与对照组相比无显著变化(P＞0.05).缺氧后细胞皮质状结构消失,应力纤维排列紊乱,随着缺氧时间的延长,F-actin逐渐解聚断裂.用RhoA-Rock信号通路抑制剂预处理细胞后再缺氧,核周围F-actin所形成的皮质状结构重新出现,细胞浆内应力纤维的排列和分布趋向于规律,F-actin断裂减少.结论 RhoA-Rock信号通路在肺微血管内皮细胞缺氧过程中介导了F-actin的损伤,用RhoA-Rock信号通路抑制剂干预可以为新生儿肺出血的治疗研究提供一个新的方向.     

功能性超声心动图参数在新生儿脓毒症休克中的临床应用价值

目的 探讨功能性超声心动图参数在新生儿脓毒症休克中的临床应用价值。方法 纳入72例脓毒症休克新生儿,根据脓毒症休克评分最高值,分为非难治性组(42例)与难治性组(30例),比较2组患儿临床资料、实验室检查结果、功能性超声心动图参数等资料,采用受试者工作特征曲线评价功能性超声心动图参数对脓毒症休克新生儿死亡的预测效能。结果 难治性组患儿心输出量和心脏指数(cardiac index,CI)低于非难治性组,而平均动脉压与CI比值(mean arterial pressure to cardiac index ratio,MAP/CI)高于非难治性组(均P<0.05)。CI与MAP/CI对脓毒症休克相关死亡的预测界值分别为2.6 L/(min·m²)(灵敏度为79%,特异度为83%,曲线下面积为0.841,P<0.05)和11.4 (灵敏度为83%,特异度为73%,曲线下面积为0.769,P<0.05);CI对脓毒症休克新生儿28 d内全因死亡的预测界值为2.9 L/(min·m²),灵敏度和特异度均为69%,曲线下面积为0.71...     

浅析毛德文运用“截断逆转”法、“扶阳培土”法、“通腑开窍”法论治肝衰竭

毛德文教授认为肝衰竭的病因是"毒邪"(内毒、外毒)、"毒浊",核心病机是"热毒内蕴、瘀血内阻",并提出了治疗肝衰竭全程、全方位的治疗大法——"截断逆转"法、"扶阳培土"法、"通腑开窍"法。文章首先围绕急黄的病因病机做出简要的阐述;接着引出毛德文教授的"肝衰竭毒邪-毒浊"新学说;然后就"截断逆转"法、"扶阳培土"法、"通腑开窍"法的提出、分析以及其在肝衰竭中的具体运用进行了概况,为防治肝衰竭开启了新的方向。     

脂多糖对人肺微血管内皮细胞细胞骨架及TNF-α, IFN-γ表达的影响

摘 要 目地 探讨脂多糖 (lipopolysaccharide LPS) 直接诱导人肺微血管内皮细胞 (HPMVEC)后,细胞骨架的改变,肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）mRN的表达及细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ的表达水平的改变。方法 HPMVEC生长至80 %以上融合时,加入LPS 以 500 ng/ml浓度刺激细胞分别至 0、4、6、8 h,经鬼笔环肽染色后采用激光共聚焦观察HPMVEC细胞骨架的变化。至预定时相点离心收集培养液上清,利用实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ mRNA的表达,采用 ELISA方法测定细胞培养上清中TNF-α、IFN-γ的表达水平,并进行统计学分析。结果 发现LPS 刺激培养后,8h组细胞开始出现细胞骨架改变;4h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达与0h组无差异（P>0.05）,6h组TNF-α、IFN-γ mRNA表达则高于0h组（P<0.05）,8h组TNF-α、IFN-γ表达高于0h组（P<0.05）;4h 组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较无差异（P>0.05）,6h 组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较升高（P<0.05）,8h组细胞培养上清TNF-α、IFN-γ的表达水平与0h组比较升高（P<0.05）。结论 表明细菌致病因子LPS能直接刺激HPMVEC使细胞结构发生改变,同时影响细胞因子( cytokine, CK)的分泌,使促炎因子TNF-α、IFN-γ分泌升高,参与肺损伤。这可能是LPS发挥其毒性作用诱发ALI/ARDS的一个重要途径。     

六味醒神颗粒治疗肝硬化轻微型肝性脑病的临床疗效及其对血氨和内毒素的影响

目的:观察六味醒神颗粒治疗肝硬化轻微型肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)的临床疗效及其对血氨、内毒素的影响.方法:将肝硬化MHE患者52例按照随机数字表法分为两组各26例.对照组予常规支持治疗,治疗组在对照组基础上加用六味醒神颗粒.治疗2周后统计临床疗效,检测两组治疗前后肝...     

超未成熟儿高酪氨酸血症I型1例

患儿男,出生后1h+,因"胎龄26周,生后1+h"入院。患儿为第3胎第1产孕26周臀位助产娩出,出生体重986g。无早破水,羊水清,胎盘、脐带正常。无宫内窘迫史,有产后窒息抢救史,经复苏处理,于气管插管正压通气下转入NICU。其母自然流产1次。体查:精神一般,反应尚可,前囟平软,心肺腹检查未见异常,神经系统检查无     

重组人白细胞介素-10对缺氧条件下人肺微血管内皮细胞凋亡的影响

目的研究低氧条件下,重组人IL-10(rhIL-10)对人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)凋亡和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的影响。方法常规培养HPMVEC细胞株,分为5组:正常对照组(常规培养);缺氧对照组(50 mL·L-1CO2,950mL·L-1N2);缺氧培养并加入rhIL-10,并按rhIL-10剂量(10×103ng.L-1、50×103ng.L-1、100×103ng.L-1)分为rhIL-10低剂量干预组、rhIL-10中剂量干预组、rhIL-10高剂量干预组。培养4 h、12 h、24 h、48 h离心收集细胞,化学比色法检测细胞核内Caspase-3活性,24 h核荧光染色并在荧光显微镜下观察荧光强度,并进行统计学分析。结果 4 h,凋亡蛋白Caspase-3相对活性各组间无明显差异(P>0.05);12 h,缺氧对照组,rhIL-10低、中剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),rhIL-10高剂量干预组与正常对照组比较无明显差异(P>0.05),rhIL-10各剂量干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa<0.05);24 h,缺氧对照组、rhIL-10各剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),rhIL-10各剂量干预组与缺氧对照组比较明显降低(Pa<0.05);48 h,缺氧对照组和rhIL-10低剂量干预组与正常对照组比较显著升高(Pa<0.05),低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较明显降低(Pa>0.05);缺氧凋亡峰值见于24 h。24 h,各组行凋亡细胞核Hoechst荧光染色,缺氧对照组和rhIL-10低、中、高剂量干预组灰度值与正常对照组比较均显著升高(Pa<0.05);rhIL-10低、中、高剂量rhIL-10干预组与缺氧对照组比较显著降低(Pa<0.05)。结论缺氧可促进HPMVEC凋亡,rhIL-10可一定程度地抑制HPMVEC凋亡,这些变化可能与急性缺氧性各器官疾病密切相关。     

激光共聚焦扫描显微镜检测缺氧人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白的变化

目的研究人肺微血管内皮细胞丝状肌动蛋白(F-actin)在缺氧前后的变化,探讨在血管内皮细胞水平研究新生儿肺出血机制的方法。方法人肺微血管内皮细胞常规培养,分为对照组和1、2、4、6、12 h和24 h缺氧培养组,每组设8个复孔,异硫酸氢荧光素-鬼笔环肽与胞浆内F-actin结合而发出红色荧光,共聚焦显微镜扫描观察F-actin的变化情况并记录相应荧光值。结果缺氧1 h组F-actin平均荧光强度明显降低,为对照组的66.3%±5.3%,差异有统计学意义(P<0.05),缺氧24 h F-actin含量下降至对照组的47.1%±6.9%。缺氧后,细胞变得狭长,细长的丝状伪足明显可见,核周F-actin的分布明显减少,皮质状结构消失,应力纤维排列紊乱或部分消失,随着缺氧时间的延长F-actin逐渐解聚断裂。结论通过观察缺氧前后肺血管内皮细胞F-actin变化,可以为在内皮细胞水平研究新生儿肺出血发病机制提供实验研究基础。