藏红花素抑制铁死亡改善糖尿病肾病的机制研究

[目的] 研究藏红花素（CRO）治疗糖尿病肾病（DN）的效果并从脂质过氧化与铁死亡角度探究其作用机制。[方法] 60只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周,HFD继续喂养8周,之后链脲霉素（STZ）造模并随机平均分为正常组、模型组、铁死亡抑制剂组（铁死亡抑制剂Fer-1,10 mg/kg,灌胃）、低剂量CRO组（CRO 5 mg/kg,灌胃）、中剂量CRO组（CRO 10 mg/kg,灌胃）、高剂量CRO组（CRO 20 mg/kg,灌胃）。治疗8周后,收集小鼠24 h尿液样本、血液样本、肾脏进行分析测定。采用试剂盒测定小鼠24 h尿蛋白定量（24 h-UPQ）,血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）,肾组织丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、4-羟基壬烯醛（4-HNE）水平,评估其肾功能与脂质过氧化水平。对肾脏同一部位进行苏木精-伊红（HE）、Masson以及TUNEL染色,观察其病理学变化以及细胞死亡情况。测定肾组织Fe水平并采用实时荧光定量反转录聚合酶连锁反应（RT-qPCR）以及蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测前列腺六跨膜上皮抗原3（STEAP3）、转铁蛋白（TF）、重链铁蛋白（FTH1）、轻链铁蛋白（FTL）以及谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）表达情况,以评估CRO对铁死亡的影响。[结果] 与模型组相比,CRO治疗后,DN小鼠Cr、BUN、24 h-UPQ有不同程度降低,肾组织病理损伤有不同程度的好转,MDA、ROS、4-HNE水平显著降低,肾组织中TUNEL荧光阳性反应明显减弱,肾组织Fe水平出现不同程度降低,STEAP3与TF表达下调,FTH1、FTL以及GPX4蛋白表达上调。[结论] CRO可以通过抑制脂质过氧化并减轻细胞铁死亡发挥对DN小鼠肾脏的保护作用。